IEL Subpopulations
The intestinal IEL were isolated as described by Chai
and Lillehoj (1988) and Dalloul et al. (2003), and lymphocyte
subpopulations were determined as described
by Lee et al. (2010). Briefly, intestinal sections were cut
longitudinally and washed in several changes of ice-cold
Hank’s balanced salt solution (HBSS) without calcium
chloride and magnesium sulfate (TaKaRa, Dalian, China),
and cut into small pieces. The pieces were treated
with 10 mM dithiothreitol (Sigma, St. Louis, MO),
followed by incubation in 100 μM EDTA for 20 min,
both in calcium and magnesium-free HBSS containing
5% fetal calf serum (Zhejing Tianhang Biological
Technology Co., Ltd., Hanzhou, China) with continuous
swirling at 37°C. The released intestinal IEL were
passed through a nylon wool column and resuspended
in HBSS containing 5% fetal calf serum and 0.01% sodium
azide. Then, intestinal IEL obtained were analyzed
using a flow cytometer (Becton, Dickinson and
Company, Franklin Lakes, NJ). The cells were stained
using monoclonal antibodies (Southern Biotech Associates,
Birmingham, AL) against K55 (total chicken
lymphocytes), CD3+ (chicken T cells), CD4+ (chicken
T helper lymphocytes), and CD8+ (chicken cytotoxic
T lymphocytes). Lymphocyte subpopulations were expressed
as the percentage of total lymphocytes stained
with monoclonal antibody K55.
IEL Subpopulations
IEL ลำไส้ถูกแยกตามที่อธิบายไว้ โดยชัย
และ Lillehoj (1988) และ Dalloul et al. (2003), และ lymphocyte
subpopulations ที่กำหนดดังที่
โดย Lee et al. (2010) สั้น ๆ ถูกตัดลำไส้ส่วน
longitudinally และล้างในการเปลี่ยนแปลงหลายอย่างของน้ำแข็งเย็น
ของแฮงก์สมดุลเกลือโซลูชัน (HBSS) โดยแคลเซียม
คลอไรด์และแมกนีเซียมซัลเฟต (TaKaRa ต้าเหลียน จีน),
และตัดเป็นชิ้นเล็ก ๆ ชิ้นได้รับการรักษา
กับ dithiothreitol 10 มม. (ซิก เซนต์หลุยส์ MO),
ตาม ด้วยฟักตัวใน 100 μM EDTA สำหรับ 20 นาที,
ทั้งแคลเซียมและแมกนีเซียมฟรี HBSS ประกอบด้วย
เซรั่มลูกครรภ์ 5% (Zhejing Tianhang ชีวภาพ
Technology Co., Ltd., Hanzhou จีน) มีอย่างต่อเนื่อง
หมุนรอบที่ 37 องศาเซลเซียส IEL ลำไส้ออกได้
ผ่านคอลัมน์ขนสัตว์ไนลอน และ resuspended
ใน HBSS ประกอบด้วย 5% ลูกครรภ์เซรั่มและ 0.01% โซเดียม
azide ได้วิเคราะห์ IEL ลำไส้ที่รับแล้ว
ใช้ cytometer กระแส (Becton สัน และ
บริษัท แฟรงคลินทะเลสาบ NJ) เซลล์มีสี
ใช้แอนตี้ monoclonal (ใต้เทคโนโลยีชีวภาพร่วม,
เบอร์มิงแฮม AL) กับ K55 (ไก่รวม
lymphocytes), CD3 (ไก่ T เซลล์), CD4 (ไก่
T lymphocytes ช่วย), และ CD8 (cytotoxic ไก่
T lymphocytes) Lymphocyte subpopulations มีแสดง
เป็นเปอร์เซ็นต์ของ lymphocytes รวมสี
กับแอนติบอดี monoclonal K55
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
IEL ประชากร
ลำไส้ IEL ที่แยกได้ตามที่อธิบายไว้โดยชัย
และ Lillehoj (1988) และ Dalloul และคณะ (2003) และเม็ดเลือดขาว
ประชากรได้รับการพิจารณาตามที่อธิบายไว้
โดยลีและคณะ (2010) สั้น ๆ , ส่วนลำไส้ถูกตัด
ตามยาวและล้างในหลายการเปลี่ยนแปลงของน้ำแข็งเย็น
สารละลายเกลือสมดุลของแฮงค์ (HBSS) โดยแคลเซียม
คลอไรด์และแมกนีเซียมซัลเฟต (TaKaRa, Dalian, จีน),
และตัดเป็นชิ้นเล็ก ๆ ชิ้นได้รับการรักษา
กับ 10 มิลลิ dithiothreitol (Sigma, เซนต์หลุยส์ MO)
ตามด้วยการบ่มเพาะใน 100 ไมครอน EDTA 20 นาที
ทั้งในแคลเซียมและแมกนีเซียมฟรี HBSS มี
5% ซีรั่มวัวของทารกในครรภ์ (Zhejing Tianhang ชีวภาพ
เทคโนโลยี จำกัด จำกัด Hanzhou, จีน) ที่มีอย่างต่อเนื่อง
หมุนที่ 37 องศาเซลเซียส ที่ปล่อยออกมาในลำไส้ IEL ได้
ผ่านคอลัมน์ขนไนลอนและ resuspended
ใน HBSS มี 5% ซีรั่มวัวของทารกในครรภ์และ 0.01% โซเดียม
azide จากนั้นลำไส้ IEL ที่ได้มาวิเคราะห์
โดยใช้ cytometer ไหล (Becton ดิกคินสันและ
บริษัท แฟรงคลินเลคส์, นิวเจอร์ซีย์) เซลล์มีการย้อม
โดยใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดี (ภาคใต้ไบโอเทคร่วม
เบอร์มิงแฮม, อัล) กับ K55 (ไก่ทั้งหมด
lymphocytes) CD3 + (เซลล์ไก่ T), CD4 + (ไก่
lymphocytes T ผู้ช่วย) และ CD8 + (cytotoxic ไก่
lymphocytes T) ประชากรเม็ดเลือดขาวได้แสดง
เป็นร้อยละของลิมโฟไซต์รวมสี
กับ K55 แอนติบอดี
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)
สอง IEL
IEL ลำไส้แยกตามที่อธิบายไว้โดยชัย
และ lillehoj ( 1988 ) และ dalloul et al . ( 2003 ) และเม็ดเลือดขาวแต่ละถูกกำหนดไว้
ลี et al . ( 2010 ) สั้น ๆ , ส่วนลำไส้ถูกตัดออก
ตามยาวและล้างในการเปลี่ยนแปลงหลายเย็น
แฮงค์สมดุลสารละลายเกลือ ( hbss ) โดยแคลเซียม คลอไรด์ และซัลเฟต แมกนีเซียม
( ทาคาระ ต้าเหลียนจีน ) ,
และตัดเป็นชิ้นเล็ก ๆ ชิ้นได้รับการรักษา
10 มม. บัตรแข็ง ( Sigma , St . Louis , MO )
ตามบ่มใน 100 μ M EDTA 20 นาที
ทั้งแคลเซียมและแมกนีเซียมที่มีฟรี hbss
5 % เซรั่มของลูกวัว ( Zhejing tianhang ชีวภาพ
Technology Co . , Ltd hanzhou , จีน )
หมุนอย่างต่อเนื่อง ที่อุณหภูมิ 37 องศา ตัวไส้ IEL )
ผ่านผ้าไนล่อนขนเสา และ resuspended
ใน hbss ที่มีถึง 5 % ของซีรัมลูกโคและ 0.01 % โซเดียม
ไซด์ . แล้วลำไส้ IEL ได้มาวิเคราะห์
ใช้การใช้โมโน ( เบคตอนดิกคินสันและ
, บริษัท , Franklin Lakes , NJ ) เซลล์ก็เปื้อน
โดยใช้โมโนโคลนอลแอนติบอดี ( ภาคใต้เทคโนโลยีชีวภาพ Associates ,
Birmingham , AL ) กับ k55 ( เม็ดเลือดขาวไก่
ทั้งหมด ) ทันที ( เซลล์ t ไก่ )( ไก่
T เม็ดเลือดขาว CD4 และ CD8 ( ผู้ช่วย ) ไก่ลิมป์
T เม็ดเลือดขาว ) โดยแต่ละแสดงออก
เป็นเปอร์เซ็นต์ของลิมโฟซัยท์รวมเปื้อน
กับโมโนโคลนอลแอนติบอดี k55 .
การแปล กรุณารอสักครู่..
![](//thimg.ilovetranslation.com/pic/loading_3.gif?v=b9814dd30c1d7c59_8619)