As a first step,the performance of the production strains was characterized inshake flask experiments and in bioreactors operated in batchmode (Table 1). While in shake flask GALG20 produced 10 times more pDNA (∼90 mg/L) than MG1655endArecA (∼8.8 mg/L),the volumetric productivity of the two strains in batch mode-operated bioreactors was similar (∼90 mg/L). These results couldbe associated with acetate consumption during batch fermen-tation by MG1655endArecA. Although acetate accumulationwas observed when using MG1655endArecA in shake flasks(∼3.1 mg/L at harvest), the same strain eventually consumed allthe acetate produced during batch fermentation (Table 1). Inter-estingly, GALG20 produced similar amounts of pDNA in both shakeflask and batch-mode bioreactor; however, DH5 produced morepDNA in the bioreactor than in a shake flask (Table 1).Acetate consumption usually occurs when the carbon sourceis depleted and cells start to assimilate acetate. The synthesis ofacetate by E. coli generally occurs as a result of the need of cells toregenerate cofactors used in glycolysis and to recycle coenzyme A.To initiate the tricarboxylic acid (TCA) cycle, pyruvate is convertedinto acetyl-CoA. Excess pyruvate or acetyl-CoA are directly con-verted to acetate. In aerobic conditions, acetate production occurswhen high concentrations of glucose inhibit respiration (Crabtreeeffect). Under these conditions, around 15% of the glucose is con-verted to acetate (Wolfe, 2005). In theory, if PPP is the majorpathway for glucose catabolism, both glycolysis and TCA cycle aredown-regulated, and thus acetate production is minimized (Usuiet al., 2012). Indeed, GALG20 produced very low amounts of acetateand did not accumulate any acetate at the end of the batch fermen-tation in the bioreactor or shake flask (Table 1).
มีลักษณะเป็นขั้นตอน ประสิทธิภาพของสายพันธุ์ผลิตหนาว inshake ทดลอง และใน bioreactors ดำเนินการใน batchmode (ตารางที่ 1) ขณะในการสั่น หนาว GALG20 ผลิต 10 ครั้งเพิ่มเติม pDNA (∼90 mg/L) มากกว่า MG1655 endA recA (∼8.8 mg/L), volumetric ประสิทธิผลของสายพันธุ์ที่สองในชุดดำเนินโหมด bioreactors คล้ายกัน (∼90 mg/L) Couldbe ผลลัพธ์เหล่านี้สัมพันธ์กับปริมาณการใช้วัสดุ acetate ระหว่างชุด fermen-tation โดย MG1655 endA recA แต่สังเกตเมื่อใช้ recA endA MG1655 ใน accumulationwas acetate เขย่าน้ำ (∼3.1 mg/L ในการเก็บเกี่ยว), สายพันธุ์เดียวกันใช้ allthe acetate ผลิตชุดหมัก (ตาราง 1) ในที่สุด อินเตอร์-estingly, GALG20 ผลิตจำนวนคล้าย pDNA ใน shakeflask และโหมดชุด bioreactor อย่างไรก็ตาม DH5 ผลิต morepDNA ใน bioreactor กว่าในหนาวสั่น (ตาราง 1)ปริมาณการใช้วัสดุ acetate มักเกิดขึ้นเมื่อคาร์บอน sourceis พร่องและเซลล์เริ่มสะท้อน acetate Ofacetate สังเคราะห์ โดย E. coli โดยทั่วไปเกิดจากเซลล์จำเป็นต้องใช้โคแฟกเตอร์ toregenerate ใช้ใน glycolysis และรีไซเคิล A.To เริ่มต้นวงจร tricarboxylic กรด (TCA) coenzyme, pyruvate จะ convertedinto acetyl-CoA Pyruvate เกินหรือ acetyl-CoA จะตรงคอน-verted การ acetate ในสภาพแอโรบิก acetate ผลิต occurswhen สูงความเข้มข้นของกลูโคสยับยั้งหายใจ (Crabtreeeffect) ภายใต้เงื่อนไขเหล่านี้ ประมาณ 15% ของน้ำตาลกลูโคสได้คอน verted กับ acetate (Wolfe, 2005) ในทางทฤษฎี PPP เป็น majorpathway สำหรับแคแทบอลิซึมกลูโคส glycolysis และ TCA วงจรควบคุม aredown แล้วจึง ผลิต acetate ถูกย่อเล็กสุด (Usuiet al., 2012) จริง ๆ GALG20 ผลิตจำนวนน้อยมาก acetateand ไม่ได้สะสมใด ๆ acetate จบ fermen-tation ชุดในแบบ bioreactor หรือสั่นหนาว (ตารางที่ 1)
การแปล กรุณารอสักครู่..