Grazing by nauplii on A. anophageff

Grazing by nauplii on A. anophagefferens
Treatments consisted of 100% A. anophagefferens (Aa), 100% of a control alga and 20:80, 50:50, 80:20% mixtures of Aa:control. These percentages were based on carbon content. A total carbon concentration equivalent to 500 000 cells mL−1 of A. anophagefferens was used in all treatments (648 ng C mL−1 assuming 1.296 pg C cell−1) (after Menden-Deuer and Lessard, 2000), representing a moderate brown tide (Gobler et al., 2005). An equivalent carbon concentration for the control alga I. galbana corresponded to ∼70 000 cells mL−1 (Bricelj et al., 2001). Experiments were conducted in two parts: (i) 100% Aa, 50:50 Aa:ISO and 100% ISO were performed simultaneously and (ii) 20:80 Aa:ISO, 80:20 Aa:ISO and another 100% ISO treatment were conducted separately. Nauplii used in parts 1 and 2 were not taken from the same cohort.

Each treatment included three replicate acid-washed jars (70 mL glass amber) with 20 nauplii (stages NIV–NVI) and three control jars without nauplii. Final naupliar densities, 280 nauplii L−1, fell within the range of densities measured in Long Island bays (Lonsdale et al., 1996). To minimize the addition of culture water into mixtures, nauplii were rinsed twice with treatment water prior to the final transfer into experimental jars. An equivalent amount of water from the final naupliar transfer dish was added to control jars. Nitrate and phosphate were added to each treatment to achieve a concentration of 100 and 10 µM, respectively, to minimize any effects naupliar excretion may have had on algal growth. All jars were topped off with treatment water (final volume 71.5 mL) and closed tightly to minimize air bubbles and turbulence, which can affect normal feeding behavior (Saiz and Kiørboe, 1995). Jars were then rotated on a plankton wheel at 0.5 rev min−1 for a 24 h in the dark at 22°C to maintain suspension of the non-motile A. anophagefferens cells. Bottles were kept in the dark to limit algal growth during the incubation period. Clearance rates achieved by nauplii were such that a sufficient density of algae remained available over the course of the experiment without the addition of more food.

Triplicate 4.5 mL samples were collected for the determination of initial cell densities. A single sample was collected from each jar after the 24 h incubation period to determine final cell density. All samples were preserved in 1% gluteraldehyde (final concentration) and refrigerated until processing. Cell counts were conducted by compound light microscopy using a Neubauer haemocytometer. Total cell counts ranged between 100 and 300 cells per sample. Visual distinction between the two different cell types made it possible to measure grazing on individual algal species in mixtures in addition to total grazing. Samples containing A. anophagefferens were passed through a syringe (21 G 1″ needle by Becton Dickinson) prior to counting to disaggregate any cell clumps present. This process did not lyse or alter cell densities (data not presented). Clearance and ingestion rates were determined by comparing initial and final cell counts after Frost (Frost, 1972). Negative clearance and grazing rates due to higher final cell densities in experimental treatments were recorded as zero.

Two electivity indices were calculated and compared to determine if nauplii displayed selective preference or avoidance for either algal type in mixtures: (i) Ivlev’s original index and (ii) Jacob’s Index, a variation of Ivlev’s, which takes the relative abundance of the prey items into account (Ivlev, 1961; Jacobs, 1974). Indices range from −1 (selective avoidance) to 1 (preference). A value of zero indicates no selective behavior. Calculations were based on algal carbon content. To evaluate whether A. anophagefferens is a “toxic” food source, we used an experimental design similar to that of Colin and Dam (Colin and Dam, 2002), whereby a reference line is drawn between the total ingestion rate of a food source known to support growth (control alga) and the potentially noxious alga in question. Ingestion rates on various mixtures of phytoplankton should fall on the reference line if A. anophagefferens is not toxic. If ingestion rates (±1 SE) for the mixtures fall above the reference line, the two algal species together have a supplementary effect. If ingestion rates (±1 SE) for the mixtures fall below the reference line, A. anophagefferens is deemed “toxic” as it would be suppressing total algal consumption.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Grazing โดย nauplii บน A. anophagefferens
บำบัดประกอบด้วย 100% A. anophagefferens (Aa), 100% ของการควบคุม alga และ 20:80 คนละครึ่ง 80:20% ส่วนผสมของ Aa:control เปอร์เซ็นต์เหล่านี้ได้ขึ้นอยู่กับปริมาณคาร์บอน คาร์บอนรวมเข้มข้นเท่ากับเซลล์ 500 000 mL−1 ของอ. anophagefferens ถูกใช้ในการรักษาทั้งหมด (648 ng C mL−1 สมมติว่า 1296 cell−1 pg C) (หลังจาก Menden Deuer และ Lessard, 2000), แทนน้ำสีน้ำตาลปานกลาง (Gobler et al., 2005) มีความเข้มข้นเทียบเท่าคาร์บอนสำหรับ galbana alga I. ควบคุม corresponded การ ∼70 เซลล์ 000 mL−1 (Bricelj และ al., 2001) ได้ดำเนินการทดลองในส่วนที่สอง: (i) 100% เอเอ Aa:ISO คนละครึ่ง และ ISO ดำเนินพร้อมกัน 100% และ (ii) 20:80 Aa:ISO, 80:20 Aa:ISO และมาตรฐาน ISO อื่น 100% การรักษาได้ดำเนินการแยกต่างหาก Nauplii ใช้ในส่วนที่ 1 และ 2 ไม่ได้มาจากเดียวกันผู้ผ่าน

ทรีตเมนท์รวมสามจำลองกรดล้างขวด (แก้ว 70 mL สีเหลืองอำพันกับ 20 nauplii (ระยะ NIV–NVI)) และสามขวดควบคุม โดย nauplii สุดท้าย naupliar ความหนาแน่น 280 nauplii L−1 ลดลงของความหนาแน่นในอ่าวเกาะยาว (นลอนส์เดล et al., 1996) ลดแห่งวัฒนธรรมน้ำลงในส่วนผสม nauplii ถูก rinsed สองกับน้ำก่อนที่จะโอนย้ายสุดท้ายลงในขวดทดลอง มีเพิ่มจำนวนน้ำจากจานโอน naupliar สุดท้ายเทียบเท่าควบคุมขวด ไนเตรตและฟอสเฟตมีเพิ่มการรักษาแต่ละ เพื่อให้ความเข้มข้นของ 10 และ 100 µM ตามลำดับ เพื่อลดผลกระทบใด ๆ อาจจะมีการขับถ่าย naupliar บนสาหร่าย ทุกขวดถูกราดปิดน้ำรักษา (ปริมาตรสุดท้ายมล 71.5) และปิดแน่นเพื่อลดฟองอากาศและความปั่นป่วน ซึ่งสามารถมีผลต่อการทำงานให้อาหารปกติ (Saiz และ Kiørboe, 1995) ขวดได้แล้วหมุนบนล้อแพลงก์ตอนที่ min−1 เรฟ 0.5 สำหรับ 24 ชมในมืดที่ 22° C เพื่อรักษาระงับเซลล์ไม่ใช่ motile A. anophagefferens ขวดที่ถูกเก็บไว้ในมืดเพื่อจำกัดสาหร่ายในช่วงระยะฟักตัว ราคาเคลียร์โดย nauplii ถูกที่ยังคงมีความหนาแน่นเพียงพอของสาหร่ายในช่วงทดลองโดยไม่มีการเพิ่มเติมอาหาร

Triplicate 4.5 mL ตัวอย่างถูกเก็บรวบรวมสำหรับการกำหนดความหนาแน่นของเซลล์เริ่มต้น อย่างเดียวรวบรวมจากแต่ละขวดหลังจากระยะฟักตัว 24 h เพื่อกำหนดความหนาแน่นเซลล์สุดท้าย ตัวอย่างทั้งหมดถูกเก็บรักษาไว้ใน gluteraldehyde 1% (ความเข้มข้นสุดท้าย) และรเออร์จนประมวลผล Microscopy แสงผสมที่ใช้ Neubauer haemocytometer ได้ดำเนินการตรวจนับเซลล์ นับจำนวนเซลล์ทั้งหมดที่อยู่ในช่วงระหว่าง 100 และ 300 เซลล์ต่อตัวอย่าง มองเห็นความแตกต่างระหว่างสองชนิดเซลล์ต่าง ๆ ทำไปวัด grazing ในแต่ละสปีชีส์ algal ในน้ำยาผสมนอกจากรวม grazing ตัวอย่างที่ประกอบด้วย anophagefferens อ.ถูกส่งผ่านผ่านเข็มฉีดยา (21 กรัม 1″ เข็ม โดยสัน Becton) ก่อนการนับจำนวนการ disaggregate กระจุกของเซลล์ปัจจุบัน กระบวนการนี้ไม่ได้ lyse หรือเปลี่ยนแปลงความหนาแน่นเซลล์ (ข้อมูลไม่แสดง) ราคาและการเคลียร์ถูกกำหนด โดยการเปรียบเทียบเริ่มต้น และสุดท้ายเซลล์นับหลังจากน้ำค้างแข็ง (Frost, 1972) เคลียร์ลบและ grazing ราคาเนื่องจากความหนาแน่นสูงของเซลล์สุดท้ายในการรักษาทดลองบันทึกเป็นศูนย์

สอง electivity ดัชนีที่คำนวณ และเปรียบเทียบเพื่อกำหนด nauplii ถ้าชอบเลือกหรือหลีกเลี่ยงสำหรับชนิด algal ในน้ำยาผสม: (i) ดัชนีเริ่มต้น Ivlev และ (ii) ยาโคบดัชนี รูปแบบของ Ivlev ของ ซึ่งพิจารณาความสัมพันธ์ของเหยื่อสินค้า (Ivlev, 1961 เจคอปส์ 1974) ดัชนีในช่วงตั้งแต่ −1 (หลีกเลี่ยงใช้) 1 (ชอบ) ค่าศูนย์บ่งชี้ว่า ลักษณะการทำงานไม่เลือก คำนวณได้โดยใช้คาร์บอน algal เพื่อประเมินว่าอ. anophagefferens เป็นแหล่งอาหาร "พิษ" เราใช้ออกแบบการทดลองโคลินและเขื่อน (โคลินและเขื่อน 2002), โดยลากเส้นการอ้างอิงระหว่างอัตรารวมกินแหล่งอาหารที่จะสนับสนุนการเจริญเติบโต (ควบคุม alga) และ alga อาจสลายตัวในคำถาม อัตราส่วนผสมต่าง ๆ ของ phytoplankton กินควรอยู่ในรายการอ้างอิงถ้าอ. anophagefferens ไม่เป็นพิษ ถ้ากินราคา (±1 SE) สำหรับส่วนผสมอยู่เหนือเส้นอ้างอิง พันธุ์ algal สองมีผลเสริมกัน ถ้ากินราคา (±1 SE) สำหรับส่วนผสมอยู่ด้านล่างบรรทัดอ้างอิง A. anophagefferens เป็นว่า "พิษ" มันจะถูกเมื่อรวมปริมาณการใช้ algal

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ปศุสัตว์โดย nauplii บน anophagefferens A .
การบำบัดประกอบด้วย anophagefferens A 100% ( AA ) 100% ของพืชทะเลจำพวกเห็ดราควบคุมและ 20 : 8050 : 50 ส่วนผสม 80 : 20% ของการควบคุม AA : เปอร์เซ็นต์เหล่านี้อยู่บนพื้นฐานเนื้อหาคาร์บอน ยอดรวมที่ความเข้มข้นคาร์บอนเทียบเท่ากับเซลล์ 500000 มล. 1 ของ anophagefferens A .ถูกใช้ในการบำบัดทั้งหมด( 648 มล.ไนจีเรีย c - 11296 PG C เซลล์ 1 )(หลังจาก menden-deuer และ lessard 2000 )เป็นตัวแทนระดับน้ำสีน้ำตาลปานกลาง( gobler et al . 2005 ) การรวมกลุ่มคาร์บอนเทียบเท่าสำหรับ galbana I .พืชทะเลจำพวกเห็ดราการควบคุมที่สอดคล้องกับ∼ 70000 มล. 1 เซลล์( bricelj et al . 2001 ) ได้ทำการทดลองในสองส่วน( i ) 100% aa 50 : 50 AA :มาตรฐาน ISO และ ISO 100% นั้นดำเนินการพร้อมกันและ( ii ) 20 : 80 AA :มาตรฐาน ISO 80 : 20 AAISO และอีก 100 การบำบัดมาตรฐาน ISO %ได้จัดขึ้นให้แยกต่างหาก nauplii ใช้ในส่วน 1 และ 2 ไม่ได้มาจากที่เดียวกันกับกลุ่มคนสูงอายุ.

แต่ละการบำบัดรวมถึงสามลอกเลียนแบบได้น้ำกรด - ล้างเหยือก( 70 มล.กระจกสีเหลือง)พร้อมด้วย 20 nauplii (ขั้นตอนศึกษา NIV - เครื่อง nvi )และสามการควบคุมเหยือกโดยไม่ nauplii . หนาแน่น naupliar สุดท้าย 280 nauplii L 1ลง ภายใน ช่วงที่หนาแน่นของวัดใน Long Island ช่องใส่ไดรฟ์(โรงแรม Swallow Lonsdale et al . 1996 ) ในการลดการเพิ่มน้ำวัฒนธรรมเข้าไปในส่วนผสม nauplii ก็ล้างทำความสะอาดสองครั้งด้วยการบำบัดน้ำก่อนที่จะถ่ายโอนสุดท้ายเข้าไปในเหยือกทดลอง จำนวนเทียบเท่ากับที่ของน้ำที่มาจากการโอน naupliar จานสุดท้ายที่ถูกเพิ่มเข้าในเหยือกการควบคุมฟอสเฟตและดินประสิวถูกเพิ่มลงในการใช้แต่ละครั้งเพื่อให้ได้ความเข้มข้นของ 100 และ 10 μ m ตามลำดับเพื่อลดผลกระทบใดๆขี้ naupliar อาจมีการขยายตัวของ algal เหยือกทั้งหมดได้ทางด้านบนสุดพร้อมด้วยการบำบัดน้ำ( 71.5 มิลลิลิตรจำนวนมากสุดท้าย)และปิดให้แน่นเพื่อลด สภาวะ แปรปวนและฟองอากาศซึ่งจะมีผลต่อพฤติกรรมการปกติ( saiz และ kiørboe 1995 )โถปั่นได้หมุนล้อสัตว์ปีกที่ 0.5 Rev นาที - 1 สำหรับ 24 ชั่วโมงในสีเข้มที่ 22 ° C เพื่อรักษาระบบกันสะเทือนของเซลล์ไม่ motile A anophagefferens แล้ว บรรจุขวดนมได้รับการดูแลรักษาให้อยู่ในสีเข้มในการจำกัดการขยายตัว algal แสดงระยะฟักตัวในระหว่างช่วงเวลานี้อัตราการอนุญาตโดย nauplii ได้ว่าความหนาแน่นของพืชทะเลจำพวกเห็ดราเพียงพอที่ยังอยู่ในเกณฑ์ดีจัดให้บริการผ่านทางหลักสูตรของการทดลองโดยไม่รวมของอาหารมากขึ้น.

4.5 ตัวอย่างมล.เป็นสามได้จากการเก็บข้อมูลสำหรับความมุ่งมั่นที่หนาแน่นของเซลล์ครั้งแรก ตัวอย่างตัวเดียวที่ถูกเก็บรวบรวมจากโถปั่นหลังจากช่วงระยะเวลา 24 ชั่วโมงแสดงระยะฟักตัวในการกำหนดความหนาแน่นเซลล์สุดท้ายตัวอย่างทั้งหมดได้รับการสงวนรักษาอย่างดีเยี่ยมใน 1% gluteraldehyde (ที่ความเข้มข้นสุดท้าย)และสำหรับอาหารแช่แข็งในตู้เย็นจนกว่าการประมวลผล นับจำนวนเซลล์ได้ทำการตรวจวิเคราะห์สารเคมีโดยไฟผสมโดยใช้ haemocytometer neubauer ที่ นับจำนวนเซลล์รวมความคิดเห็นระหว่าง 100 และ 300 เซลล์ต่อตัวอย่างความแตกต่างระหว่าง ภาพ สอง ประเภท บริการข้อมูลของสถานีฐานที่แตกต่างกันทำให้เป็นไปได้ในการวัดกินหญ้าในสายพันธุ์ algal แบบเฉพาะรายในส่วนผสมในการกินหญ้ารวมถึง ตัวอย่างที่มี anophagefferens A .ก็ผ่านกระบอกฉีด( Dickinson , 21 G 1 "เข็มโดย becton )ก่อนที่จะนับ disaggregate พุ่มเซลล์ใดๆในปัจจุบัน การดำเนินการนี้ไม่ lyse หรือเปลี่ยนแปลงหนาแน่นเซลล์(ข้อมูลไม่แสดง)อัตราค่าบริการถ่ายเอกซเรย์และการขออนุญาตมีกำหนดโดยการเปรียบเทียบนับเซลล์ครั้งแรกและครั้งสุดท้ายหลังจากน้ำค้างแข็ง(น้ำค้างแข็ง 1972 ) อัตราค่าบริการกินหญ้าและการขออนุญาตติดลบเนื่องจากหนาแน่นเซลล์สุดท้ายในระดับที่สูงกว่าการบำบัดทดลองมีการบันทึกเป็นศูนย์

สองดัชนี electivity คำนวณและเมื่อเทียบกับในการกำหนดว่า nauplii ปรากฏขึ้นการหลีกเลี่ยงการสรรหาหรือการตั้งค่าสำหรับ ประเภท algal ทั้งในส่วนผสม( i )แบบดั้งเดิมของ ivlev และดัชนีของ( ii )ยาโคบความแตกต่างของ' sivlev ซึ่งจะนำความอุดมสมบูรณ์ซึ่งญาติของเหยื่อที่เข้าไปในรายการบัญชี( ivlev 1961 Jacobs ค.ศ. 1974 ) ดัชนีช่วงจาก 1 (การหลีกเลี่ยงการสรรหา)ไปที่ 1 (การตั้งค่า) ค่าของศูนย์แสดงว่าไม่มีพฤติกรรมการสรรหา การคำนวณขนาดของแหล่งจ่ายไฟได้ตามปริมาณคาร์บอน algal ในการประเมินผลว่า a .anophagefferens เป็น"เป็นพิษ"อาหารแหล่งที่มาที่เราใช้ทดลองการออกแบบที่เหมือนกันกับที่ของพลเอก Colin Powell และเขื่อน(พลเอก Colin Powell และเขื่อน, 2002 )ซึ่งได้ข้อมูลอ้างอิงบรรทัดคือมาระหว่างที่รวมทางเดินหายใจ:อัตราของอาหารแหล่งที่มาที่รู้จักกันดีในการสนับสนุนการเติบโต(การควบคุมพืชทะเลจำพวกเห็ดรา)และที่ทำให้เกิดเป็นพิษพืชทะเลจำพวกเห็ดราในคำถาม อัตราถ่ายเอกซเรย์ในส่วนผสมต่างๆของ phytoplankton ควรอยู่ในข้อมูลอ้างอิงบรรทัดที่หาก A .anophagefferens มีสารพิษไม่ได้ หากอัตราถ่ายเอกซเรย์( SE ± 1 )สำหรับส่วนผสมที่ตกเหนือข้อมูลอ้างอิงบรรทัดที่สองสายพันธุ์ algal ที่ได้ร่วมกันมีผลเพิ่มเติม หากอัตราถ่ายเอกซเรย์( SE ± 1 )สำหรับส่วนผสมที่ลงด้านล่างข้อมูลอ้างอิงบรรทัด anophagefferens A คือถือว่า"เป็นพิษ"ว่าจะเป็นการ บริโภค algal ผิวน้ำทั้งหมด