2.7. Bacterial challenge and antibo

2.7. Bacterial challenge and antibody titer
A frozen stock-culture of S. iniae (ARS 98-60) from an outbreak of
streptococcal disease in Nile tilapia was grown in tryptic soy broth
(TSB) at 25 °C with shaking at 100 rpm for 24 h. The concentration of
the culture was adjusted to an optical density of 1.0 measured on a
Shimadzu UV-1601 spectrophotometer (Shimadzu Scientific Instruments,
Inc., Norcross, Georgia) at 540 nm to give a S. iniae
concentration of 1×109 colony forming units (CFU)/mL.
At the end of the 12-week feeding period, twenty remaining fish
per aquarium were randomly selected and intra-peritoneally (IP)
injected with 0.1 mL of 1×106 cfu/mL of S. iniae (1×105 cfu/fish)
using a tuberculin syringe. They continued to receive their respective
diets. Fish were monitored and mortality was recorded twice daily for
15 days following injection and dead fish were removed.
At the end of the S. iniae challenge trial, blood samples were
collected from four randomly chosen surviving fish and serum was
collected following centrifugation. Agglutinating antibody titers
against S. iniae in pre- and post-challenge serum samples were
determined by modifying the method of Chen and Light (1994) as
described in Yildirim-Aksoy et al. (2007).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.7. แบคทีเรีย titer ท้าทายและแอนติบอดีการแช่แข็งสินค้าวัฒนธรรมของ S. iniae (อาอาร์ส 98-60) จากการระบาดของโรค streptococcal ในปลานิลถูกปลูกในซุปถั่วเหลือง tryptic(TSB) ที่ 25 ° C ด้วยการสั่นที่รอบต่อนาทีที่ 100 ใน 24 ชม ความเข้มข้นของวัฒนธรรมมีการปรับปรุงให้มีความหนาแน่นออปติคัลของ 1.0 บนการเครื่องทดสอบกรดด่าง Shimadzu UV-1601 (Shimadzu เครื่องทางวิทยาศาสตร์อิงค์ Norcross จอร์เจีย) ที่ 540 nm ให้เป็น S. iniaeความเข้มข้น 1 × 109 อาณานิคมขึ้นหน่วย (CFU) / mLในตอนท้ายของรอบระยะเวลา 12 สัปดาห์ให้อาหาร ยี่สิบเหลือปลาต่อสัตว์ถูกสุ่มเลือก และ intra-peritoneally (IP)ฉีด ด้วย 0.1 mL ของ 1 × 106 cfu/mL ของ S. iniae (1 × 105 cfu/ปลา)ใช้เข็ม tuberculin พวกเขายังคงได้รับความเกี่ยวข้องอาหาร ปลาถูกตรวจสอบ และการตายถูกบันทึกสองครั้งต่อวันสำหรับ15 วันต่อการฉีดและปลาตายถูกเอาออกในตอนท้ายของ S. iniae ความท้าทายทดลอง ตัวอย่างเลือดได้รวบรวมจากท่านสุ่มปลารอดตายและเซรั่มเป็นรวบรวมต่อ centrifugation Agglutinating titers แอนติบอดีกับ S. iniae ในซีรั่มก่อน และหลังท้าทาย ตัวอย่างดีกำหนด โดยการปรับเปลี่ยนวิธีการของเฉิน และเบา (1994) เป็นอธิบายไว้ใน Yildirim Aksoy et al. (2007)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.7 ท้าทายแบคทีเรียและแอนติบอดี
แช่แข็งหุ้นวัฒนธรรมของเชื้อ S. iniae (ARS 98-60) จากการระบาดของ
โรคเชื้อในปลานิลได้รับการปลูกในน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic
(TSB) ที่ 25 ° C ในการเขย่า 100 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 24 ชั่วโมง . ความเข้มข้นของ
วัฒนธรรมได้รับการปรับเปลี่ยนให้มีความหนาแน่นของออปติคอล 1.0 วัด
Shimadzu Spectrophotometer UV-1601 (Shimadzu เครื่องมือทางวิทยาศาสตร์,
Inc, แอตแลนตา, จอร์เจีย) ที่ 540 นาโนเมตรเพื่อให้เชื้อ S. iniae
เข้มข้น 1 × 109 โคโลนีหน่วย (CFU) / มล.
ในตอนท้ายของระยะเวลาการให้อาหาร 12 สัปดาห์ยี่สิบปลาที่เหลือ
ต่อพิพิธภัณฑ์สัตว์น้ำได้รับการคัดเลือกแบบสุ่มและภายใน peritoneally (IP)
ฉีด 0.1 มล 1 × 106 โคโลนี / มิลลิลิตรของเชื้อ S. iniae (1 × 105 โคโลนี / ปลา)
โดยใช้เข็มฉีดยาวัณโรค พวกเขายังคงได้รับของตน
อาหาร ปลาจะถูกตรวจสอบและการเสียชีวิตได้รับการบันทึกเป็นครั้งที่สองในชีวิตประจำวันสำหรับ
15 วันต่อไปนี้การฉีดและปลาที่ตายแล้วถูกถอดออก.
ในตอนท้ายของเชื้อ S. iniae ทดลองท้าทายตัวอย่างเลือดไป
เก็บมาจากสี่สุ่มเลือกที่รอดตายปลาและซีรั่ม
ที่เก็บรวบรวมการหมุนเหวี่ยงต่อไปนี้ Agglutinating ระดับแอนติบอดี
ต่อเชื้อ S. iniae ในก่อนและหลังการท้าทายตัวอย่างซีรั่มที่ถูก
กำหนดโดยการปรับเปลี่ยนวิธีการของเฉินและแสง (1994) ตามที่
อธิบายไว้ใน Yildirim-Aksoy และคณะ (2007)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.7 . แบคทีเรียที่ท้าทายและแอนติบอดี
แช่แข็งหุ้นวัฒนธรรมของสหรัฐอเมริกา iniae ( ARS 98-60 ) จากการระบาดของโรคในปลานิล
streptococcal ปลูกถั่วเหลืองในอาหารน้ำซุป
( TSB ) ที่อุณหภูมิ 25 ° C สั่นที่ 100 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 24 ชั่วโมง ความเข้มข้นของ
วัฒนธรรมคือปรับแสงสำหรับตรวจวัดความหนาแน่น บน
Shimadzu uv-1601 Spectrophotometer ( Shimadzu
อิงค์ , เครื่องมือวิทยาศาสตร์นอร์ครอส , จอร์เจีย ) 540 nm ให้เอส iniae
เข้มข้น 1 × 109 อาณานิคมสร้างหน่วย ( CFU ) / มล.
ที่จุดสิ้นสุดของระยะเวลา 12 สัปดาห์ ยี่สิบที่เหลือต่อตู้ปลาปลา
สุ่มและภายใน peritoneally ( IP )
ฉีด 0.1 มิลลิลิตร 1 × 106 cfu / ml . S . iniae ( 1 × 105 CFU / ปลา )
โดยใช้เข็มฉีดยาวัณโรค . พวกเขายังคงที่จะได้รับของตน
อาหารปลาที่ได้ตรวจสอบและอัตราการตายที่ถูกบันทึกไว้สองครั้งทุกวัน
15 วันต่อไปนี้การฉีดและปลาตายถูกลบออก .
ที่ส่วนท้ายของ S . iniae ท้าทายศาล ตัวอย่างเลือดที่เก็บจากสี่สุ่มเลือกได้

เก็บปลาและซีรั่มมีดังต่อไปนี้การปั่นเหวี่ยง แอนติบอดีต่อ S .
สิงสถิตย์โดย iniae ก่อนและตัวอย่างซีรั่มท้าทายถูก
โพสต์กำหนดโดยการปรับเปลี่ยนวิธีการของเฉิน และ แสง ( 2537 ) ตามที่อธิบายไว้ในม
aksoy et al . ( 2007 )