2.2. Microorganisms and culture conditions
T. reesei RUT-C30 ATCC 56765 and Clostridium acetobutylicum
ATCC824 were obtained from ATCC (American Type Culture
Collection). T. reesei RUT-C30 was routinely maintained and
sporulated on potato dextrose agar plate for 2 weeks till spore
crop was developed. Four milliliters of sterile 0.05% Tween 80
solution was added to the plate and swirled to gently release
the spores. Approximately, 1 mL of the spore suspension
consisting of 106
e107 spores was used as the inoculum [9].
Fermentation studies were conducted in 125 mL screw
capped bottles containing 100 mL of medium. Prior to autoclaving
the enzymatic hydrolysate containing 40.01 g L1 of
glucose and 3.55 g L1 xylose, the pH was adjusted to 6.5 using
2 M NaOH. The medium containing carbon source and yeast
extract (3 g L1
; Sigma, USA) was sterilized at 121 C for 15 min.
On cooling to 35 C under oxygen-free nitrogen atmosphere (in
an anaerobic chamber), filter-sterilized P2 stock solutions
[(buffer: KH2PO4, 50 g L1
; K2HPO4, 50 g L1
; ammonium acetate,
220 g L1
), (vitamin: para-amino-benzoic acid, 0.1 g L1
;
thiamin, 0.1 g L1
; biotin, 0.001 g L1
), and (mineral:
MgSO4$7H2O, 20 g L1
; MnSO4$H2O, 1 g L1
; FeSO4$7H2O,
1gL1
; NaCl, 1 g L1
)] were added (1 mL each), followed by
inoculation with highly active cells of C. acetobutylicum ATCC
824 (5 mL cell suspension in 100 mL medium).. The synthetic
medium containing the same amount of sugar (40.01 g L1 of
glucose and 3.55 g L1 xylose) with the same composition and
initial pH was used as the control medium.
2.3. Enzyme p
2.2. จุลินทรีย์และสภาพวัฒนธรรมต. reesei รูด C30 ATCC 56765 และเชื้อ Clostridium acetobutylicumATCC824 ได้รับจาก ATCC (ชนิดวัฒนธรรมอเมริกันคอลเลกชัน) ต. reesei รูด C30 ที่รักษาเป็นประจำ และsporulated บนแผ่นมันฝรั่งขึ้น agar 2 สัปดาห์จนถึงสปอร์พืชได้รับการพัฒนา Milliliters สี่กอซ 0.05% Tween 80โซลูชันเพิ่มจาน และ swirled ลั่นเบา ๆเพาะเฟิร์น การระงับสปอร์ประมาณ 1 mLประกอบด้วย 106ใช้เพาะเฟิร์น e107 เป็น inoculum [9]ได้ดำเนินการศึกษาการหมักในสกรู 125 mLร็อคกี้ขวด 100 mL ของกลางประกอบด้วย ก่อน autoclavingด้วยเอนไซม์ในระบบที่ประกอบด้วย g 40.01 L1 ของกลูโคสและ 3.55 g L1 xylose, pH ถูกปรับปรุงไปใช้ 6.52 M NaOH สื่อประกอบด้วยแหล่งคาร์บอนและยีสต์แยก (3 g L1; ซิกมา สหรัฐอเมริกา) ถูก sterilized ที่ 121 C สำหรับ 15 นาทีในการระบายความร้อนถึง 35 C ภายใต้บรรยากาศไนโตรเจนที่ปราศจากออกซิเจน (ในการไม่ใช้หอการค้า), กรอง sterilized p 2 หุ้นโซลูชั่น[(บัฟเฟอร์: KH2PO4, 50 g L1; K2HPO4, 50 g L1; acetate แอมโมเนีย220 กรัม L1), (วิตามิน: กรดพาราอะมิโน-benzoic, 0.1 g L1;thiamin, 0.1 g L1; ไบโอติน 0.001 g L1), และ (แร่:MgSO4$ 7H2O, L1 20 g; MnSO4$ H2O, L1 1 g; FeSO4$ 7H2O1gL1; NaCl, L1 1 g)] เพิ่ม (1 mL แต่ละ), ตามด้วยinoculation เซลล์สูงใช้งานของ C. acetobutylicum ATCC824 (5 mL เซลล์ระงับใน 100 mL) ... หนังสังเคราะห์แบบขนาดกลางประกอบด้วยจำนวนน้ำตาล (40.01 g L1 ของเดียวกันxylose L1 กลูโคสและ 3.55 g) มีองค์ประกอบเดียวกัน และค่า pH เริ่มต้นถูกใช้เป็นสื่อในการควบคุม2.3. เอนไซม์ p
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.2 จุลินทรีย์และเงื่อนไขวัฒนธรรม
ตัน reesei RUT- สนาม C30 ATCC 56765 และ Clostridium acetobutylicum
ATCC824 ที่ได้รับจาก ATCC (American ประเภทวัฒนธรรม
การเก็บ) T. reesei RUT- สนาม C30 ถูกเก็บรักษาไว้เป็นประจำและ
sporulated บนจานอาหารเลี้ยงเชื้อเดกซ์โทรสมันฝรั่งเป็นเวลา 2 สัปดาห์จนถึงสปอร์
พืชได้รับการพัฒนา สี่มิลลิลิตรหมัน 0.05% Tween 80
การแก้ปัญหาถูกบันทึกอยู่ในแผ่นและหมุนวนไปเบา ๆ ปล่อย
สปอร์ ประมาณ 1 มิลลิลิตรของสปอร์แขวนลอย
ประกอบด้วย 106
สปอร์ e107 ถูกใช้เป็นหัวเชื้อ [9].
การศึกษาการหมักได้ดำเนินการใน 125 มิลลิลิตรกรู
ปกคลุมขวดขนาด 100 มิลลิลิตรที่มีของกลาง ก่อนที่จะนึ่ง
ไฮโดรไลเอนไซม์ที่มี 40.01 กรัม L1 ของ
กลูโคสและ 3.55 กรัม L1 ไซโลสพีเอชได้รับการปรับเปลี่ยนให้ใช้ 6.5
M NaOH 2 ขนาดกลางที่มีแหล่งคาร์บอนและยีสต์
สารสกัด (3 กรัม L1
; Sigma, USA) ได้รับการฆ่าเชื้อที่อุณหภูมิ 121 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 15 นาที.
ในการระบายความร้อนถึง 35 องศาเซลเซียสภายใต้บรรยากาศไนโตรเจนที่ปราศจากออกซิเจน (มีอะไรบ้าง?
ห้องเพาะกาย), P2 กรองฆ่าเชื้อ โซลูชั่นหุ้น
[(บัฟเฟอร์: KH2PO4 50 กรัม L1
; K2HPO4 50 กรัม L1
; อะซิเตตแอมโมเนียม
220 กรัม L1
), (วิตามินกรดพาราอะมิโนเบนโซอิก, 0.1 กรัม L1
;
วิตามินบี, 0.1 กรัม L1
; ไบโอติน 0.001 กรัม L1
) และ (แร่:
$ MgSO4 7H2O, 20 กรัม L1
; MnSO4 $ H2O 1 กรัม L1
; $ FeSO4 7H2O,
1gL1
; โซเดียมคลอไรด์ 1 กรัม L1
)] ถูกเพิ่ม (1 มิลลิลิตรแต่ละ) ตามด้วย
การฉีดวัคซีนที่มีการใช้งานสูง เซลล์ซี acetobutylicum ATCC
824 (5 มิลลิลิตรเซลล์แขวนลอยในระดับปานกลาง 100 มิลลิลิตร) .. สังเคราะห์
ขนาดกลางที่มีปริมาณที่เท่ากันของน้ำตาล (40.01 กรัม L1 ของ
กลูโคสและ 3.55 กรัม L1 ไซโลส) ที่มีองค์ประกอบเดียวกันและ
pH เริ่มต้นที่ใช้เป็น กลางควบคุม.
2.3 เอนไซม์พี
การแปล กรุณารอสักครู่..
