Mutant T66 was isolated from 450 mu

Mutant T66 was isolated from 450 mutants (constructed with Agrobacterium tumefaciens-mediated transformation method) of Trichoderma harzianum. Maize seeds coated with T66 were more susceptible to Curvularia lunata when compared with those coated with wild-type (WT) strain. The disease index of maize treated with T66 and WT were 62.5 and 42.1%, respectively. Further research showed T-DNA has inserted into the ORF of one gene, which resulted in the functional difference between WT and T66. The gene was cloned and named Thc6, which encodes a novel 327 amino acid protein. To investigate its function, we obtained knockout, complementation, and overexpression mutants of Thc6. Challenge inoculation studies suggested that the Thc6 overexpression mutant can reduce the disease index of maize inbred line Huangzao 4 against the leaf spot pathogen (C. lunata). Meanwhile, The Thc6 mutants were found to affect the resistance of maize inbred line Huangzao 4 against C. lunata by enhancing the activation of jasmonate-responsive genes expression. Liquid chromatography–mass spectrometry (LC–MS) data further confirmed that the concentration of jasmonate in the induced maize exhibits a parallel change tendency with the expression level of defense-related genes. Hence, the Thc6 gene could be participated in the induced resistance of maize inbred line Huangzao 4 against C. lunata infection through a jasmonic acid-dependent pathway.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แยกต่างหากจาก 450 สายพันธุ์ (สร้าง ด้วยวิธีการแปลง tumefaciens mediated อโกรแบคทีเรียม) ของ Trichoderma harzianum T66 กลายพันธุ์ได้ เมล็ดข้าวโพดที่เคลือบ ด้วย T66 อ่อนแอมากขึ้นไป Curvularia lunata เมื่อเทียบกับเคลือบ ด้วยชนิดของป่า (WT) ต้องใช้ได้ ดัชนีโรคของข้าวโพดรับ T66 และ WT 42.1% และ 62.5 ตามลำดับ วิจัยเพิ่มเติมพบว่า ดีเอ็นเอทีมีแทรก ORF ของยีนหนึ่ง ซึ่งมีผลในการทำงานความแตกต่างระหว่าง WT T66 ยีนที่โคลน และชื่อ Thc6 ที่จแมปเป็นนวนิยาย 327 กรดอะมิโนโปรตีน การตรวจสอบการทำงานของ เรารับสายพันธุ์ชนะน็อกโดยเทคนิค complementation และ overexpression ของ Thc6 inoculation ศึกษาแนะนำว่า Thc6 overexpression mutant สามารถลดดัชนีโรคของข้าวโพด inbred ท้าทายสาย Huangzao 4 กับศึกษาใบจุด (C. lunata) ในขณะเดียวกัน สายพันธุ์ Thc6 ที่พบจะมีผลต่อความต้านทานของข้าวโพด inbred สาย Huangzao 4 กับ C. lunata โดยเพิ่มการเรียกใช้นิพจน์ยีน jasmonate ตอบสนอง Spectrometry chromatography-มวลของเหลว (LC – MS) ข้อมูลเพิ่มเติมยืนยันว่า ความเข้มข้นของ jasmonate ในข้าวโพดอาจจัดแสดงแนวโน้มการเปลี่ยนแปลงขนานกับระดับนิพจน์ของยีนที่เกี่ยวข้องกับการป้องกัน ดังนั้น ยีน Thc6 สามารถร่วมในการต่อต้านอาจของข้าวโพด inbred บรรทัด Huangzao 4 กับ lunata ค.การติดเชื้อผ่านทางเดินขึ้นอยู่กับกรดจัสโมนิก

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

T66 กลายพันธุ์ที่แยกได้จากการกลายพันธุ์ 450 (สร้างด้วยวิธีการเปลี่ยนแปลง Agrobacterium tumefaciens พึ่ง) เชื้อรา Trichoderma harzianum ของ เมล็ดข้าวโพดเคลือบด้วย T66 เป็นอ่อนแอมากขึ้นเพื่อ Curvularia lunata เมื่อเทียบกับผู้ที่เคลือบด้วยป่าชนิด (น้ำหนัก) สายพันธุ์ ดัชนีโรคข้าวโพดรับการรักษาด้วย T66 และ WT เป็น 62.5 และ 42.1% ตามลำดับ นอกจากนี้การวิจัยแสดงให้เห็นว่า T-DNA ได้ใส่เข้าไปใน ORF ของยีนที่ก่อให้เกิดความแตกต่างระหว่างการทำงานและ WT T66 ยีนเป็นโคลนและตั้งชื่อ Thc6 ซึ่ง encodes นวนิยาย 327 อะมิโนโปรตีนกรด ในการตรวจสอบการทำงานของเราได้รับสิ่งที่น่าพิศวง, complementation และกลายพันธุ์แสดงออกของ Thc6 การศึกษาการฉีดวัคซีนท้าทายบอกว่ากลายพันธุ์แสดงออก Thc6 สามารถลดดัชนีโรคของสายพันธุ์ข้าวโพด Huangzao 4 กับเชื้อโรคใบจุด (C. lunata) ในขณะเดียวกันการกลายพันธุ์ Thc6 พบว่าส่งผลกระทบต่อความต้านทานของสายพันธุ์ข้าวโพด Huangzao 4 กับ C. lunata โดยการเสริมสร้างการทำงานของการแสดงออกของยีน jasmonate-ตอบสนอง มวลสาร-ของเหลว chromatography (LC-MS) ข้อมูลเพิ่มเติมยืนยันว่าความเข้มข้นของ jasmonate ในการจัดแสดงนิทรรศการข้าวโพดเหนี่ยวนำให้เกิดแนวโน้มการเปลี่ยนแปลงขนานกับระดับการแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการป้องกัน ดังนั้นยีน Thc6 อาจจะมีส่วนร่วมในการต่อต้านการเหนี่ยวนำข้าวโพดสายพันธุ์ Huangzao 4 ต่อการติดเชื้อ C. lunata ผ่านทางเดินกรดขึ้นอยู่กับ jasmonic

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กลายพันธุ์เป็นสายพันธุ์ที่แยกได้จาก t66 450 ( สร้างด้วย Agrobacterium tumefaciens โดยวิธีการแปลง ) ปริมาณเชื้อรา Trichoderma harzianum . เมล็ดพันธุ์ข้าวโพดเคลือบด้วย t66 อ่อนไหว Curvularia lunata เมื่อเทียบกับผู้ที่เคลือบด้วยยา ( WT ) สายพันธุ์ ดัชนีของโรคข้าวโพดที่ได้รับการรักษาด้วย t66 WT ) และ 62.5 และ 42.1 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับการวิจัยยังแสดงให้เห็นว่า t-dna ได้แทรกเข้าไปใน ORF ของยีน ซึ่งส่งผลให้เกิดความแตกต่างของการทำงานระหว่าง WT และ t66 . ยีนที่ถูกโคลนและชื่อ thc6 ซึ่ง encodes นวนิยาย 327 กรดอะมิโนโปรตีน เพื่อศึกษาการทำงานของมัน เราได้รับเอนไซม์ที่น่าพิศวง และ overexpression พันธ์ของ thc6 .การท้าทายการศึกษาชี้ให้เห็นว่า thc6 overexpression กลายพันธุ์สามารถลดดัชนีของโรคข้าวโพดสายพันธุ์แท้สาย huangzao 4 ต่อต้านเชื้อโรคใบจุด ( C . lunata ) ขณะเดียวกัน thc6 สายพันธุ์พบว่ามีผลต่อความต้านทานของข้าวโพดสายพันธุ์แท้สาย huangzao 4 กับ C . lunata โดยเพิ่มการกระตุ้นการตอบสนองของ jasmonate ยีนสีหน้าliquid chromatography - มวลสาร ( LC ( MS ) ข้อมูลเพิ่มเติมยืนยันว่า ความเข้มข้นของ jasmonate ในการเหนี่ยวนำข้าวโพดแสดงแนวโน้มเปลี่ยนขนานกับการแสดงออกของยีนที่ระดับการป้องกันที่เกี่ยวข้อง ดังนั้น thc6 ยีนสามารถมีส่วนร่วมในการต้านทานของข้าวโพดสายพันธุ์แท้สาย huangzao 4 ต่อการติดเชื้อ C . lunata ผ่านจังหวัดเอซอนขึ้นอยู่กับเส้นทาง