Gel purification of rHaa86The Ni–NT

Gel purification of rHaa86
The Ni–NTA purified rHaa86 was eluted from 8 % nonreducing
polyacrylamide gels. The gel slices were mixed
thoroughly with PBS, pH 7.4 containing cocktail of protease
inhibitors and incubated the mixture over night at 4 C on
magnetic stirrer. The targeted protein was collected from the
supernatant by centrifugation at 15,000 rpm for 30 min at
4 C. The eluted protein was checked by SDS-PAGE. The
concentration of eluted protein was estimated by Fluorometer
(Cubett, Invitrogen, USA) and stored at -20 C. This
gel purified protein was used for in vitro antigenic stimulation
of lymphocytes in blood culture.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เจลทำให้บริสุทธิ์ของ rHaa86RHaa86 Ni – NTA บริสุทธิ์ถูก eluted จาก nonreducing 8%polyacrylamide gels รวมชิ้นเจอย่างละเอียด ด้วย PBS, pH 7.4 ประกอบด้วยค็อกเทลรติเอสinhibitors และ incubated ผสมข้ามคืนที่ 4 C บนช้อนคนแม่เหล็ก โปรตีนเป้าหมายรวบรวมจากการsupernatant โดย centrifugation ที่ 15000 rpm ใน 30 นาทีที่ค. 4 โปรตีน eluted ถูกตรวจสอบ โดยองค์กรหน้า ที่ความเข้มข้นของโปรตีน eluted ถูกประเมิน โดย Fluorometer(Cubett, Invitrogen สหรัฐอเมริกา) และเก็บไว้ที่-20 c.นี้เจบริสุทธิ์ใช้สำหรับกระตุ้น antigenic ในโปรตีนของ lymphocytes ในเลือดวัฒนธรรม

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เจลบริสุทธิ์ของ rHaa86
Ni-NTA บริสุทธิ์ rHaa86 ถูกชะจาก 8% nonreducing
เจลอะคริเลต ชิ้นเจลผสม
ให้สะอาดด้วยพีบีเอสพีเอช 7.4 ที่มีค๊อกเทลของน้ำย่อย
โปรตีนและบ่มผสมข้ามคืนที่ 4 องศาเซลเซียสใน
กวนแม่เหล็ก โปรตีนที่มีการกำหนดเป้าหมายที่ถูกเก็บรวบรวมจาก
สารละลายโดยการหมุนเหวี่ยงที่ 15,000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาทีที่
4 องศาเซลเซียส โปรตีนชะได้รับการตรวจสอบโดยวิธี SDS-PAGE
ความเข้มข้นของโปรตีนชะเป็นที่คาดกันโดย fluorometer
(Cubett, Invitrogen, USA) และเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส นี้
เจลโปรตีนบริสุทธิ์ที่ใช้สำหรับในหลอดทดลองกระตุ้นแอนติเจน
ของเซลล์เม็ดเลือดขาวในเลือดวัฒนธรรม

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เจลฟอก rhaa86
ฉัน– NTA บริสุทธิ์ rhaa86 คือตัวอย่างจาก 8% nonreducing
โพลีอะคริลาไมด์เจล เจลชิ้นปะปนกัน
อย่างละเอียดกับ PBS pH 7.4 ที่มีค็อกเทล i
การบ่มส่วนผสมผ่านคืนที่ 4  C
stirrer แม่เหล็ก โปรตีนเป้าหมายได้ถูกเก็บรวบรวมจากที่นำโดย 3
ที่ 15 , 000 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 30 นาทีที่ 
4 Cตัวอย่างโปรตีนที่ถูกตรวจสอบโดยการศึกษา .
ตัวอย่างประมาณความเข้มข้นของโปรตีนฟลู โรมิเตอร์
( cubett Invitrogen , USA ) และเก็บไว้ที่ - 20 C นี้
 เจลโปรตีนบริสุทธิ์ที่ใช้ในการกระตุ้นเม็ดเลือดขาวชนิด
วัฒนธรรมในสายเลือด