2.1. Extraction of active component

2.1. Extraction of active components from common bean seed
The locally obtained common bean (P. vulgaris) dry seed was
ground to a fine powder by using a laboratory mill and sieved
through 0.4 mm sieve. The fraction with particle size less than
0.4 mm was used in experiments. Ten grams of seed powder
was suspended in 1 L of NaCl water solution (0.5 mol/L). The
suspension was stirred using a magnetic stirrer for 10 min to
accomplish extraction and then filtered through a rugged filter
paper (Macherey-Nagel, MN 651/120) to obtain filtrate – crude
extract of active components.

2.2. Preparation of fractions of natural coagulant by
ultrafiltration
The coagulation active components from common bean extract
were further processed by ultrafiltration in Amicon stirred cell
(model 8200, MilliporeTM) with polyethersulfone membranes
(Biomax, MilliporeTM) having cut-off 10,000 and 30,000 Da. Ultrafiltration
was performed under constant pressure of inert gas
(2.5 bar) and gentle magnetic stirring (30 rpm) at constant room
temperature (21 ◦C). The flow rate through membranes with 10,000
and 30,000 Da cut-off was 13.5 and 35 mL/h, respectively.
Fractionation of components was conducted using membranes
in consecutive manner – ultrafiltration through lower cut-off membrane
was followed by the one through membrane having higher
used cut-off. In both steps ultrafiltration was running until volume
of retentates reached 10% of initial volume. After each ultrafiltration
step, volumes of retentates were adjusted to value of initial
volume with 0.5 mol NaCl/L. Permeate obtained by ultrafiltration
with membrane cut-off 10,000 was assigned as the 1st fraction,
fraction containing components having approximate molecular
weight between 10,000 and 30,000 Da was assigned as the 2nd
fraction, and retentate from ultrafiltration with 30,000 cut-off as
the 3rd fraction.
2.3. Preparation of turbid water
Turbid water for coagulation tests was prepared by adding 1 g
kaolin to 1 L tap water. The suspension was stirred for 1 h to achieve
uniform dispersion of kaolin particles, and then it was allowed to
remain for 24 h for completing hydration of the particles. This suspension
was used as the stock suspension. Turbid water having
35 nephelometric turbidity units (NTU) was prepared by diluting of
stock suspension to 1000 mL tap water just before the coagulation
test. The initial pH of the synthetic water was adjusted to 9.0, 9.5 or
10.0 with 1 mol/L NaOH, in accordance to previous investigations
(ˇS ´ciban et al., 2005) just before experiments.
2.4. Coagulation test
Coagulation activity of fractions of natural coagulant prepared
by ultrafiltration as well as crude extract was evaluated in jar tester
VELP model FC6S. Samples were added to the beakers at different
dosages (from 0.125 to 2.5 mL/L turbid water) and the content was
stirred at 200 rpm for 1 min. The mixing speed was then reduced
to 60 rpm and was kept for 30 min. Then, the suspensions were
left to allow sedimentation. After 1 h of sedimentation, upper clarified
liquid was collected and residual turbidity was measured. The
residual turbidity of sample was RTS. The same coagulation test was
performed with no coagulant as the blank. The residual turbidity
in the blank was RTB. Coagulation activity was calculated as:
Coagulation activity (%)
= RTB −
RTS
RTB
·
100 (1)
2.5. Analytical methods
Protein concentration was measured according to Bradford
(1976) with bovine serum albumin as standard. Turbidity was measured
using a turbidimeter (WTW TURB 550/550 IR) and it was
expressed in nephelometric turbidity units (NTU). Chemical oxygen
demand was determined according to Standard Methods (APHAAWWA-
WEF, 1998).
All experiments were run in duplicate (the accuracy is considered
to be
±5%) and the mean value is presented herein.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.1 การสกัดส่วนประกอบที่ใช้งานอยู่จากเมล็ดถั่วทั่วไปได้รับภายในทั่วไป (P. vulgaris) ถั่วแห้งเมล็ดได้พื้นดินจะเป็นผงละเอียด โดยใช้ห้องปฏิบัติการโรงสี และ sievedผ่านตะแกรง 0.4 mm เศษส่วนที่ มีขนาดอนุภาคน้อยกว่า0.4 mm ใช้ในการทดลอง 10 กรัมของผงเมล็ดถูกระงับใน L 1 ของ NaCl น้ำ (0.5 โมล/ลิตร) ที่ระงับได้กวนใช้ช้อนคนเหล็ก 10 นาทีไปยังทำการสกัด และกรองผ่านตัวกรองที่ทนทานแล้วกระดาษ (Macherey Nagel, MN 651/120) รับสารกรองดิบแยกส่วนประกอบที่ใช้งานอยู่2.2 การเตรียมส่วนของ coagulant ธรรมชาติโดยultrafiltrationแยกส่วนประกอบโรงงานจากถั่วทั่วไปมีการประมวลผลเพิ่มเติม โดย ultrafiltration ในเซลล์คน Amicon(รุ่น 8200, MilliporeTM) มีสาร polyethersulfone(Biomax, MilliporeTM) มี Ultrafiltration Da. ตัด 10000 และ 30000มีดำเนินการภายใต้ความดันคงที่ของก๊าซเฉื่อย(2.5 บาร์) และอ่อนโยน (30 รอบต่อนาที) กวนแม่เหล็กคงที่ห้องอุณหภูมิ (21 ◦C) อัตราการไหลผ่านเยื่อหุ้มกับ 10000และตัดดา 30000 35 mL/h และ 13.5 ตามลำดับนั้นแยกส่วนประกอบวิธีการใช้สารในลักษณะต่อเนื่อง – ultrafiltration ผ่านเยื่อตัดล่างด้วยหนึ่งผ่านเมมเบรนที่มีสูงขึ้นใช้ตัด ในทั้งสองขั้นตอน รัน ultrafiltration จนปริมาตรของ retentates ถึง 10% ของปริมาตร หลังจากแต่ละ ultrafiltrationขั้นตอน ปริมาณของ retentates ถูกปรับปรุงค่าเริ่มต้นปริมาตร 0.5 โมลกับ NaCl/L. Permeate รับ โดย ultrafiltrationโดยเยื่อ ตัด 10000 ถูกกำหนดให้เป็นเศษส่วน 1เศษส่วนที่ประกอบด้วยส่วนประกอบที่มีประมาณโมเลกุลกำหนดให้น้ำหนักระหว่าง 10000 และ 30000 ดาเป็นที่ 2เศษส่วน และ retentate จาก ultrafiltration กับตัด 30000 เป็นเศษส่วน 32.3. เตรียมน้ำ turbidน้ำ turbid สำหรับทดสอบการแข็งตัวของเลือดถูกเตรียม โดยการเพิ่ม 1 gkaolin 1 L ก๊อกน้ำ การระงับได้กวนสำหรับ h 1 เพื่อให้บรรลุยูนิฟอร์มการกระจายตัวของอนุภาค kaolin แล้ว ก็ได้รับอนุญาตให้ครั้งใน 24 ชมสอบไล่น้ำของอนุภาค ระบบกันสะเทือนนี้มีใช้เป็นระบบกันสะเทือนหุ้น มีน้ำ turbid35 หน่วย nephelometric ความขุ่น (NTU) ถูกเตรียม โดย diluting ของระงับหุ้นน้ำประปา 1000 mL ก่อนการแข็งตัวของเลือดการทดสอบ PH ของน้ำสังเคราะห์เริ่มถูกปรับปรุง 9.0, 9.5 หรือ10.0 กับ 1 โมล/L NaOH ในการตรวจสอบก่อนหน้านี้(ˇS ´ciban et al., 2005) ก่อนการทดลอง2.4 การทดสอบแข็งตัวของเลือดกิจกรรมการแข็งตัวของเศษส่วนของธรรมชาติ coagulant ที่เตรียมไว้โดย ultrafiltration เป็นสารสกัดหยาบถูกประเมินในขวด testerVELP รุ่น FC6S เพิ่มตัวอย่างการ beakers ที่แตกต่างกันdosages (จาก 0.125 น้ำ turbid 2.5 mL/L) และเนื้อหากวนที่ rpm 200 ใน 1 นาที แล้วถูกลดความเร็วในการผสมถึง 60 รอบต่อนาที และถูกเก็บไว้ 30 นาที แล้ว พักถูกซ้ายให้ตกตะกอน หลังจาก 1 ชั่วโมงของการตกตะกอน สูงขึ้ของเหลวที่ถูกรวบรวม และมีวัดความขุ่นเหลือ ที่ความขุ่นของน้ำส่วนที่เหลือของตัวอย่างอาร์ทีเอส การทดสอบเลือดแข็งตัวเหมือนกันทำกับ coagulant ไม่เป็นว่างเปล่า ความขุ่นของน้ำที่เหลือในว่าง RTB มีคำนวณกิจกรรมเฟนเป็น:กิจกรรมการแข็งตัวของเลือด (%)= RTB −อาร์ทีเอสRTB·100 (1)2.5 การวิเคราะห์วิธีเป็นวัดความเข้มข้นของโปรตีนตามแบรดฟอร์ด(1976) กับวัว serum albumin เป็นมาตรฐาน เป็นวัดความขุ่นใช้ turbidimeter (WTW TURB IR 550/550) และมีแสดงในหน่วย nephelometric ความขุ่น (NTU) ออกซิเจนทางเคมีกำหนดความต้องการตามวิธีมาตรฐาน (APHAAWWA-WEF, 1998)ทดลองทั้งหมดถูกเรียกใช้ซ้ำ (ความถูกต้องถือเป็นจะ± 5%) และค่าเฉลี่ยนำเสนอนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.1 การสกัดส่วนประกอบที่ใช้งานจากเมล็ดถั่วแขกถั่วหาได้ในท้องถิ่นทั่วไป (พีขิง) เมล็ดแห้งบดให้เป็นผงละเอียดโดยใช้ห้องปฏิบัติการโรงงานและร่อนผ่านตะแกรง0.4 มม ส่วนที่มีขนาดอนุภาคน้อยกว่า0.4 มมถูกนำมาใช้ในการทดลอง สิบกรัมของผงเมล็ดถูกระงับใน 1 ลิตรของการแก้ปัญหาน้ำโซเดียมคลอไรด์ (0.5 โมล / ลิตร) ระงับถูกกวนกวนโดยใช้แม่เหล็กเป็นเวลา 10 นาทีที่จะประสบความสำเร็จในการสกัดและการกรองแล้วผ่านตัวกรองขรุขระกระดาษ(Macherey-แจคกี้, มินนิโซตา 651/120) เพื่อให้ได้กรอง - น้ำมันดิบ. สารสกัดจากส่วนประกอบที่ใช้งาน2.2 การเตรียมเศษของธรรมชาติโดยการตกตะกอนกรองส่วนประกอบที่ใช้งานการแข็งตัวของสารสกัดจากถั่วแขกที่ถูกประมวลผลต่อไปโดยการกรองในAmicon ขยับมือถือ(รุ่น 8200, MilliporeTM) กับเยื่อ polyethersulfone (Biomax, MilliporeTM) ได้ตัด 10,000 และ 30,000 ดา Ultrafiltration ได้ดำเนินการภายใต้ความกดดันอย่างต่อเนื่องของก๊าซเฉื่อย(2.5 บาร์) และอ่อนโยนกวนแม่เหล็ก (30 รอบต่อนาที) ณ ห้องคงที่อุณหภูมิ(21 ◦C) อัตราการไหลผ่านเยื่อกับ 10,000 และ 30,000 ดาตัดเป็น 13.5 และ 35 มิลลิลิตร / ชั่วโมงตามลำดับ. Fractionation ของชิ้นส่วนได้รับการดำเนินการโดยใช้เยื่อในลักษณะต่อเนื่องกัน- กรองผ่านเยื่อตัดลดลงตามมาด้วยหนึ่งผ่านมีสูงกว่าเมมเบรนใช้ตัด ทั้งในขั้นตอนการกรองได้ทำงานจนกว่าปริมาณของ retentates ถึง 10% ของปริมาณการเริ่มต้น หลังจากที่แต่ละกรองขั้นตอนเล่ม retentates มีการปรับมูลค่าของการเริ่มต้นปริมาณโซเดียมคลอไรด์0.5 โมล / ลิตร ซึมที่ได้จากการกรองด้วยเมมเบรนตัด 10,000 ได้รับมอบหมายให้เป็นส่วนที่ 1 ส่วนที่มีโมเลกุลที่มีส่วนประกอบโดยประมาณน้ำหนักระหว่าง 10,000 และ 30,000 ดาได้รับมอบหมายให้เป็น 2 ส่วนและจาก retentate กรอง 30,000 ตัดออกเป็นส่วนที่3 2.3 เตรียมน้ำขุ่นน้ำขุ่นสำหรับการทดสอบการแข็งตัวถูกจัดทำขึ้นโดยการเพิ่ม 1 กรัมดินขาว1 ลิตรน้ำประปา ระงับถูกกวนเป็นเวลา 1 ชั่วโมงเพื่อให้บรรลุการกระจายตัวของอนุภาคเครื่องแบบดินขาวและจากนั้นจะได้รับอนุญาตให้ยังคงอยู่เป็นเวลา24 ชั่วโมงสำหรับการให้ความชุ่มชื้นของอนุภาค ระงับนี้ถูกใช้เป็นระงับหุ้น น้ำขุ่นมี35 หน่วยความขุ่น nephelometric (NTU) ได้รับการจัดทำขึ้นโดยเจือจางของการระงับหุ้น1000 มิลลิลิตรน้ำประปาก่อนการแข็งตัวทดสอบ ค่าพีเอชเริ่มต้นของน้ำสังเคราะห์ปรับ 9.0 9.5 หรือ10.0 1 mol / L NaOH ตามการสืบสวนก่อนหน้า(S'ciban et al., 2005) ก่อนที่การทดลอง. 2.4 แข็งตัวทดสอบกิจกรรมการแข็งตัวของเศษของการตกตะกอนตามธรรมชาติเตรียมโดยกรองเช่นเดียวกับสารสกัดหยาบได้รับการประเมินในการทดสอบขวดFC6S รูปแบบ VELP ตัวอย่างถูกเพิ่มเข้าไปในบีกเกอร์ที่แตกต่างกันโด (0.125-2.5 มิลลิลิตร / ลิตรน้ำขุ่น) และเนื้อหาที่ถูกขยับที่200 รอบต่อนาทีเป็นเวลา 1 นาที ความเร็วในการผสมได้ลดลงไปแล้วถึง 60 รอบต่อนาทีและถูกเก็บไว้เป็นเวลา 30 นาที จากนั้นสารแขวนลอยที่ถูกทิ้งไว้เพื่อให้การตกตะกอน หลังจาก 1 ชั่วโมงของการตกตะกอนชี้แจงบนของเหลวที่ถูกเก็บรวบรวมและความขุ่นที่เหลือวัด ความขุ่นที่เหลือของกลุ่มตัวอย่างเป็น RTS การทดสอบการแข็งตัวเดียวกันดำเนินการกับการตกตะกอนเป็นที่ว่างเปล่าไม่มี ความขุ่นที่เหลือในที่ว่างเปล่าเป็น RTB กิจกรรมการแข็งตัวที่คำนวณได้เป็น: กิจกรรมแข็งตัว (%) RTB = - RTS RTB · 100 (1) 2.5 วิธีการวิเคราะห์ความเข้มข้นของโปรตีนวัดตามแบรดฟอ(1976) กับอัลบูมิซีรั่มวัวเป็นมาตรฐาน ความขุ่นวัดโดยใช้เครื่องวัดความขุ่น (WTW turb 550/550 IR) และมันก็แสดงในหน่วยความขุ่นnephelometric (NTU) ออกซิเจนเคมีความต้องการได้รับการพิจารณาตามวิธีมาตรฐาน (APHAAWWA- WEF, 1998). การทดลองทั้งหมดได้รับการทำงานในที่ซ้ำกัน (ความถูกต้องได้รับการพิจารณาให้เป็น± 5%) และค่าเฉลี่ยจะนำเสนอในที่นี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.1 . การสกัดส่วนประกอบที่ใช้งานจากเมล็ดถั่วที่พบได้ทั่วไปในประเทศ
( P . vulgaris ) ถั่วเมล็ดแห้ง
พื้นเพื่อผงละเอียดโดยใช้ห้องปฏิบัติการ โรงงาน และ ผ่านตะแกรงขนาด
0.4 มม. สัดส่วนกับขนาดอนุภาคน้อยกว่า 0.4 mm
ถูกใช้ในการทดลอง 10 กรัม
ผงเมล็ดถูกระงับใน 1 ลิตรของน้ำ ( สารละลาย NaCl 0.5 mol / L )
ถูกระงับการใช้แม่เหล็ก stirrer กวน 10 นาที

สำเร็จการสกัดแล้วกรองผ่านกระดาษกรอง
ขรุขระ ( macherey นาเกล , MN 651 / 120 ) เพื่อให้ได้สารสกัดหยาบของส่วนประกอบที่ใช้งาน )
.

. . การเตรียมการของเศษส่วนสารธรรมชาติ

ผสมด้วยสารสกัดจากถั่ว
ส่วนประกอบที่ใช้งานทั่วไปได้ประมวลผล โดยผสมใน amicon กวนเซลล์
( นางแบบ ) milliporetm , ) +
( biomax โพลี เทอร์ซัลโฟน , ตัด milliporetm ) มี 10 , 000 000 ดา . กรอง
แสดงภายใต้ความดันคงที่ของ
ก๊าซเฉื่อย ( 2.5 บาร์ ) และอ่อนโยนแม่เหล็กกวน ( 30 รอบต่อนาทีที่อุณหภูมิห้อง
คงที่ ( 21 ◦ C ) อัตราการไหลผ่านเมมเบรนที่มี 10 , 000
และ 30 ,000 ดาตัดเป็น 13.5 / H 35 มิลลิลิตร .
( ส่วนประกอบของดำเนินการโดยใช้เมมเบรน
ในลักษณะกรองผ่านเมมเบรนติดต่อกันและตัดลด
ตามด้วยหนึ่งผ่านเมมเบรนมีสูง
ใช้ตัด ทั้งในขั้นตอนกรองวิ่งจนกว่าปริมาณ
ของ retentates ถึง 10% ของปริมาณเริ่มต้น . หลังจากที่แต่ละ Ultrafiltration
ขั้นตอนปริมาณของ retentates ทำการปรับค่าของปริมาณที่มีเกลือโซเดียมคลอไรด์ 0.5 โมลเริ่มต้น
/ L แผ่ซ่านได้โดยผสมกับเยื่อ
ตัด 10000 มอบหมายให้เป็นเศษส่วนเศษส่วนที่มี 1 , ส่วนประกอบโมเลกุล

มีน้ำหนักประมาณระหว่าง 10 และ 30 , 000 ดาถูกมอบหมายให้เป็นเศษส่วน 2
, และรีเทนเททจากผสมกับ 30000
ตัดเป็น ส่วนที่ 3 .
2.3การเตรียมน้ำ
ขุ่นขุ่นน้ำสำหรับการทดสอบการแข็งตัวของถูกเตรียมโดยการเพิ่ม 1 g
ดินขาวเพื่อน้ำ 1 . ช่วงล่างถูกกวนเป็นเวลา 1 ชั่วโมง เพื่อให้เกิดการกระจายของอนุภาคดินขาว
ชุดแล้วก็อนุญาตให้
ยังคงอยู่ 24 ชั่วโมงสำหรับการให้ความชุ่มชื้นของอนุภาค นี้ระงับ
ถูกใช้เป็นหุ้นระบบ น้ำที่ขุ่น