BioassayOne axenic strain of M. aer

Bioassay
One axenic strain of M. aeruginosa (FACHB 942),
obtained from the Culture Collection of the Freshwater
Algae, Institute of Hydrobiology, Chinese Academy of
Sciences (Wuhan, China), was selected for the bioassay.
The cultures were grown in autoclaved BG11 liquid medi-um [19] under a 12:12 h light: dark cycle with a light intensity
of 2500 lux at 25ºC and were manually shaken twice a
day
during the incubation. The
cells in the exponential
phase
were used for the growth inhibition tests.
The growth inhibition tests were based on ISO standard
8692 method [20], modified as follows. Each compound
(Fig. 1) was dissolved in DMSO and added into 20ml sterilized
BG11
medium, to which circa 1×10
cells/ml of M.
aeruginosa were inoculated. The final concentrations of
phenolic compounds in the test solution were 0, 1, 2.5, 5,
10, and 20 mg/L for PA and CA, respectively, 0, 5, 20, 40,
80, and 160 mg/L for VA, 0, 5, 20, 80, 160, and 320 mg/L
for FA. All the treatments and the control were prepared in
triplicate. The 50% inhibition concentration of the test compounds
(EC
50
6
) was determined after 72 h incubation. The
concentration of DMSO in the test solution was lower than
0.1% (v/v), which had no effect on the growth of M. aeruginosa
in the pre-experiment.
To investigate the joint effects of the four phenolic compounds,
three mixtures with different
proportions were prepared.
The
proportion in the mixture I (Mix I) was calculated
based on the EC
values of the individual compound
obtained in this study. The proportions in mixture II (Mix
50
II) and mixture III (Mix III) were calculated according to
the concentrations of the four phenolic compounds in the
culture solution of H. verticillata and V. spiralis determined
in the study, respectively. Five concentrations were prepared
for each mixture to cover the responses of M.
aeruginosa,
from no effect to total inhibition. The bioassay procedure
of the mixtures was the same as that of the individual
compounds. According
to the EC
50
values of the mix-
tures and the individual allelochemicals, Toxicity Index
(TI) model, a quantitative method for analyzing the joint
effects of multiple mixtures [21] was used to evaluate the
joint effects of the four phenolic compounds. TI values
were calculated by the following equation:

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Bioassayต้องใช้ axenic หนึ่งของม. aeruginosa (FACHB 942),ได้จากการรวบรวมวัฒนธรรม Freshwaterสาหร่าย สถาบัน Hydrobiology จีนสถาบันวิทยาศาสตร์ (ฮั่น จีน), ถูกเลือกสำหรับการ bioassayวัฒนธรรมถูกปลูก autoclaved BG11 เหลว medi อุ่ม [19] ภายใต้ 12:12 ไฟ h: วงจรมืดกับความเข้มแสงของ 2500 lux ที่ 25ºC และถูกด้วยตนเองเขย่าสองตัววันในระหว่างการฟักตัว ที่เซลล์ในการเนนขั้นตอนการใช้สำหรับทดสอบการยับยั้งการเจริญเติบโต การทดสอบการยับยั้งการเจริญเติบโตได้ตามมาตรฐาน ISO8692 วิธี [20], แก้ไขเป็นดังนี้ สารประกอบแต่ละละลายใน DMSO และเพิ่มเป็น 20ml sterilized (fig. 1)BG11กลาง ที่เซอร์กา 1 × 10เซลล์/มิลลิลิตรของ Maeruginosa ได้ inoculated ความเข้มข้นสุดท้ายของม่อฮ่อมโซลูชันทดสอบได้ 0, 1, 2.5, 510 และ 20 mg/L การ PA CA ตามลำดับ 0, 5, 20, 4080 และ 160 mg/L ใน VA, 0, 5, 20, 80, 160, 320 mg/L และสำหรับ FA มีเตรียมการรักษาและการควบคุมในtriplicate ความเข้มข้น 50% ยับยั้งสารทดสอบ(EC506) กำหนดหลังจากบ่ม 72 h ที่ความเข้มข้นของ DMSO ในการแก้ปัญหาการทดสอบไม่ต่ำกว่า0.1% (v/v), ซึ่งก็ไม่มีผลต่อการเจริญเติบโตของ aeruginosa เมตรในทดลองก่อน การตรวจสอบผลกระทบร่วมของสารฟีนอสี่ส่วนผสมสามพร้อมสัดส่วนเตรียมไว้ที่proportion ผสมผม (ผสมผม) ไม่ได้ตาม ECค่าของสารประกอบแต่ละได้รับในการศึกษานี้ สัดส่วนส่วนผสม (ผสม II50II) และมีคำนวณส่วนผสม III (ผสม III) ตามความเข้มข้นของสารฟีนอ 4 ในการแก้ปัญหาวัฒนธรรม ของ H. verticillata และ V. spiralis ที่กำหนดในการศึกษา ตามลำดับ มีเตรียมความเข้มข้น 5สำหรับแต่ละส่วนผสมเพื่อให้ครอบคลุมการตอบสนองของ Maeruginosaจากไม่มีผลต่อการยับยั้งการรวม วิธี bioassayของส่วนผสมไม่เหมือนกับของแต่ละบุคคลสารประกอบ ตามการ EC50ค่าผสม-tures และ allelochemicals ละ ดัชนีความเป็นพิษแบบจำลอง (ตี้) วิธีการร่วมการวิเคราะห์เชิงปริมาณใช้เพื่อประเมินผลของส่วนผสมหลาย [21]ลักษณะร่วม 4 ม่อฮ่อม ตี้ค่าคำนวณได้ โดยสมการต่อไปนี้:

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ชีวภาพ
หนึ่งสายพันธุ์ของ axenic M. aeruginosa (FACHB 942)
ที่ได้รับจากการเก็บวัฒนธรรมของน้ำจืด
สาหร่ายสถาบันชลชีววิทยา, จีน Academy of
Sciences (หวู่ฮั่นประเทศจีน) ได้รับเลือกให้ทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพ.
วัฒนธรรมได้รับการปลูกในอิฐ BG11 ของเหลวเมดิม [19] ภายใต้แสงชั่วโมง 12:12: วงจรมืดกับความเข้มแสง
2,500 ลักซ์ของที่ 25 องศาเซลเซียสและถูกเขย่าด้วยตนเองเป็นครั้งที่สอง
วัน
ในระหว่างการบ่ม
เซลล์ในการชี้แจง
ขั้นตอนการ
ถูกนำมาใช้สำหรับการทดสอบการยับยั้งการเจริญเติบโต.
การทดสอบการยับยั้งการเจริญเติบโตอยู่บนพื้นฐานของมาตรฐาน ISO
8692 วิธีการ [20] แก้ไขดังต่อไปนี้ แต่ละสารประกอบ
(รูปที่ 1). ถูกละลายใน DMSO และเพิ่มเข้าไปใน 20ml ฆ่าเชื้อ
BG11
กลางที่ประมาณ 1 × 10
เซลล์ / มิลลิลิตร M.
aeruginosa ถูกเชื้อ ความเข้มข้นสุดท้ายของ
สารประกอบฟีนอลในการแก้ปัญหาการทดสอบคือ 0, 1, 2.5, 5,
10 และ 20 มิลลิกรัม / ลิตรสำหรับ PA และ CA, ตามลำดับ, 0, 5, 20, 40,
80 และ 160 มิลลิกรัม / ลิตรสำหรับ VA , 0, 5, 20, 80, 160, และ 320 มิลลิกรัม / ลิตร
สำหรับเอฟเอ การรักษาทั้งหมดและการควบคุมที่ถูกจัดทำขึ้น
เพิ่มขึ้นสามเท่า ยับยั้งความเข้มข้น 50% ของสารทดสอบ
(EC
50
6
) ถูกกำหนดหลังจากการบ่ม 72 ชั่วโมง
ความเข้มข้นของ DMSO ในการแก้ปัญหาการทดสอบต่ำกว่า
0.1% (v / v) ซึ่งมีผลต่อการเจริญเติบโตของ aeruginosa เอ็ม
ในการทดสอบก่อน.
เพื่อศึกษาผลกระทบร่วมกันของสี่สารประกอบฟีนอล
ผสมกับสาม ที่แตกต่างกัน
ในสัดส่วนที่ถูกเตรียม. สัดส่วนในส่วนผสมที่ผม (Mix I) ได้รับการคำนวณบนพื้นฐานของ EC ค่าของสารแต่ละบุคคลที่ได้รับในการศึกษาครั้งนี้ สัดส่วนในส่วนผสม II (Mix 50 II) และมีส่วนผสม iii (Mix III) จะถูกคำนวณตามความเข้มข้นของสารประกอบฟีนอสี่ในการแก้ปัญหาวัฒนธรรมของเอช verticillata โวลต์และ spiralis กำหนดในการศึกษาตามลำดับ ห้าระดับความเข้มข้นที่เตรียมส่วนผสมแต่ละเพื่อให้ครอบคลุมการตอบสนองของ M. aeruginosa, จากผลกระทบต่อการยับยั้งการรวมไม่มี ขั้นตอนการทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพของสารผสมเป็นเช่นเดียวกับที่ของแต่ละบุคคลสารประกอบ ตามที่จะ EC 50 ค่า mix- Tures และ allelochemicals แต่ละดัชนีความเป็นพิษ(TI) รุ่นวิธีการเชิงปริมาณในการวิเคราะห์ร่วมกันผลของการผสมหลาย [21] ถูกนำมาใช้ในการประเมินผลกระทบร่วมกันของสี่สารประกอบฟีนอ ค่า TI ถูกคำนวณจากสมการดังต่อไปนี้:

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีหนึ่ง axenic
สายพันธุ์ของ M . aeruginosa ( fachb 942 )
) จากวัฒนธรรมคอลเลกชันของสาหร่ายน้ำจืด
สถาบันชลชีววิทยา , จีน Academy of Sciences
( ประเทศจีน ) ได้รับเลือกให้ทดสอบ .
วัฒนธรรมปลูกใน bg11 สังเคราะห์ของเหลวเมดิ . [ 19 ] ภายใต้แสง 12 : 12 H : ความมืดรอบกับความเข้มแสง
2 , 500 ลักซ์ ที่ 25 º C และตนเองสั่นสองวัน

ในระหว่างการบ่ม


เซลล์ระยะ exponential ถูกใช้เพื่อยับยั้งการเจริญเติบโตการทดสอบ
ยับยั้งการเจริญเติบโตการทดสอบตามมาตรฐาน ISO
8692 [ 20 ] วิธีแก้ไขดังนี้ สารแต่ละ
( รูปที่ 1 ) ละลายใน DMSO และเพิ่มลงในหลอดฆ่าเชื้อ

bg11 ขนาดกลาง ซึ่งประมาณ 1 × 10
เซลล์ / มล. ของ M . aeruginosa
ปลูกเชื้อ . ส่วนสุดท้ายของ
สารประกอบฟีนอลในสารละลายทดสอบคือ 0 , 1 , 2 , 5 ,
10 และ 20 มก. / ล. และ PA CA , ตามลำดับ , 0 , 5 , 20 , 40 ,
80 และ 160 มก. / ล. และ , 0 , 5 , 20 , 80 , 160 และ 320 มิลลิกรัมต่อลิตร
สำหรับเอฟเอ ทั้งหมดการรักษาและการควบคุมที่ถูกเตรียมไว้ใน
ทำสำเนาสามฉบับ . 50 % ความเข้มข้นของสารทดสอบสาร
( EC
50
6
) คือการพิจารณาหลังจาก 72 ชั่วโมงการบ่ม
ความเข้มข้นของ DMSO ในการทดสอบโซลูชั่นต่ำกว่า 0.1 %
( v / v ) ซึ่งไม่มีผลต่อการเจริญเติบโตของ M . aeruginosa
ในการทดลองก่อน
เพื่อศึกษาอิทธิพลร่วมของสารประกอบฟีนอลทั้งสี่ , สามส่วนผสมที่มีสัดส่วนแตกต่างกัน

เตรียม .

แบ่งสัดส่วนผสม ( ผสม ) ได้คำนวณตามค่า EC


ได้รับสารประกอบของแต่ละบุคคลในการศึกษานี้สัดส่วนในส่วนผสมที่ 2 ( ผสม 50

2 ) และส่วนผสมที่ 3 ( ผสม 3 ) คำนวณตาม
ความเข้มข้น 4 สารประกอบฟีนอลในสารละลาย
วัฒนธรรม . verticillata และ V . spiralis มุ่งมั่น
ในการศึกษา ตามลำดับ 5 ) เตรียม
สำหรับแต่ละส่วนผสมเพื่อให้ครอบคลุมการตอบสนองของ M .

จากดอกไม่มีผลต่อการยับยั้งทั้งหมด ไม่กระบวนการ
ของผสมเป็นเช่นเดียวกับที่ของสารประกอบแต่ละคน

ตามกับ EC 50


ค่าผสม -

และ บุคคล allelochemicals ตูเรส , ดัชนีความเป็นพิษ ( Ti ) รูปแบบวิธีเชิงปริมาณเพื่อศึกษาผลร่วมกัน
หลายผสม [ 21 ] ถูกใช้เพื่อประเมินผลร่วมของ 4 สารประกอบฟีนอล . Ti ค่า
คำนวณด้วยสมการดังต่อไปนี้