Seronegative pregnant sows and 26-d

Seronegative pregnant sows and 26-day-old, PEDV-
seronegative weaned, Large White × Duroc crossbred pigs were

obtained from a PEDV-free specific pathogen free (SPF) (confirmed

by history, lack of qRT-PCR-PEDV positive fecal samples and

PEDV antibodies) swine herd of The Ohio State University. The

SPF OSU herd was also seronegative for antibodies to porcine

respiratory and reproductive syndrome virus, PRCV, TGEV and

porcine circovirus type 2. The sows farrowed naturally and nursed

their piglets until the end of the study. The four experimental

groups in the study were as follows. Group 1: PEDV inoculated

9-day-old suckling pigs (n = 9); Group 2: MEM only inoculated

9-day-old suckling pigs (n = 11); Group 3: PEDV inoculated 26-

day-old weaned pigs (n = 11); Group 4: MEM only inoculated

26-day-old weaned pigs (n = 9). All experimental procedures on

animals were approved by the Institutional Animal Care and Use

Committee of The Ohio State University. Pigs in PEDV groups

were inoculated orally with PEDV inoculum [8.9 log10 GE (genomic

equivalents) (≈2.9 log10 plaque forming unit)/pig] and pigs in

MEM only inoculated groups received MEM. The inoculation dose

was based on a previous pathogenicity study in our lab (Jung

et al., 2014). Following PEDV inoculation, pigs were monitored for

clinical signs daily until necropsy. Diarrhea was assessed by sco-
ring fecal consistency. Fecal consistency was scored as, 0 = solid;

1 = pasty; 2 = semi-liquid; 3 = liquid, with scores of 2 or more

considered diarrheic. Inoculated and mock pigs (n = 3-4/group at

each time-point) were euthanized for immunological studies at an

acute stage on post inoculation day (PID) 1 and at a later stage (PID

5) of infection. Blood samples were taken at PID 1 (n = 6-8 pigs per

group), PID 3 (n = 4-8 pigs per group) and PID 5 (from euthanized

pigs, n = 3-4 per group) and separate serum aliquots were prepared

for cytokine analysis and viral RNA quantification.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ลักษณะท้องน้ำและ 26-วันเก่า PEDV-หย่านมน้ำ สีขาวขนาดใหญ่× Duroc แก่สุกรได้ได้จากการ PEDV ฟรีเฉพาะเชื้อฟรี (SPF) (ยืนยันโดยประวัติ ขาด qRT-PCR-PEDV บวกตัวอย่างอุจจาระ และฝูงสุกรแอนตี้ PEDV) ของมหาวิทยาลัยแห่งรัฐโอไฮโอ การโอสุ SPF ฝูงก็น้ำสำหรับแอนตี้ให้ porcineไวรัสโรคทางเดินหายใจ และการสืบพันธุ์ PRCV, TGEV และporcine circovirus พิมพ์ 2 ลักษณะ farrowed ตามธรรมชาติ และ nursedของทรูดจนจบการศึกษา 4 ทดลองกลุ่มในการศึกษามีดังนี้ กลุ่มที่ 1: PEDV inoculatedสุกรดูดนม 9 วันเก่า (n = 9); กลุ่มที่ 2: หน่วยความจำ inoculated เท่านั้นสุกรดูดนม 9 วันเก่า (n = 11); กลุ่มที่ 3: PEDV inoculated 26-สุกรหย่านมวันเก่า (n = 11); กลุ่มที่ 4: แหม่ม inoculated เท่านั้นสุกรหย่านมอายุ 26 วัน (n = 9) กระบวนการทดลองทั้งหมดในสัตว์ได้รับอนุมัติจากสถาบันการดูแลสัตว์และการใช้คณะกรรมการของมหาวิทยาลัยโอไฮโอ สุกรในกลุ่ม PEDVมี inoculated รับประทานกับ PEDV inoculum [8.9 log10 GE (จีโนมของเทียบเท่า) (≈2.9 log10 ปูนขึ้นรูปหน่วย) / หมู] และสุกรในหน่วยความจำเฉพาะกลุ่ม inoculated ได้รับหน่วยความจำ ยา inoculationตามการศึกษา pathogenicity อยู่ก่อนหน้าในห้องแล็บของเรา (Junget al. 2014) ต่อไปนี้ PEDV inoculation สุกรถูกตรวจสอบสำหรับอาการทางคลินิกทุกวันจน necropsy โรคท้องร่วงได้รับการประเมิน โดย sco-แหวนอุจจาระสม่ำเสมอ ความสอดคล้องของอุจจาระถูกทำเป็น 0 =ไม้1 =ลักษณะ 2 =ของเหลวกึ่ง 3 =ของเหลว มีคะแนนของ 2 หรือมากกว่าพิจารณา diarrheic หมู inoculated และจำลอง (n = 3-4/กลุ่ม ที่แต่ละเวลาจุด) ที่ euthanized ศึกษาปรับภูมิคุ้มกันที่มีระยะเฉียบพลัน ในโพสต์ inoculation วัน (PID) 1 และ ในระยะหลัง (PID5) ของการติดเชื้อ ตัวอย่างเลือดที่ถ่ายที่ PID 1 (n = 6-8 หมูต่อกลุ่ม), PID 3 (n = 4-8 สุกรต่อกลุ่ม) และ PID 5 (จาก euthanizedสุกร n = 3-4 ต่อกลุ่ม) และแยกซีรั่ม aliquots มีเตรียมสำหรับการวิเคราะห์ cytokine และนับ RNA ไวรัส

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แม่สุกรตั้งครรภ์น้ำเหลืองและ 26 วันเก่า PEDV-
น้ำเหลืองหย่านมขาว× Duroc สุกรขนาดใหญ่ที่ได้รับจาก PEDV ฟรีปราศจากเชื้อโรคบางชนิด (SPF) (ได้รับการยืนยันจากประวัติศาสตร์ขาด qRT-PCR-PEDV อุจจาระบวกและแอนติบอดี PEDV) ฝูงสุกรของมหาวิทยาลัยแห่งรัฐโอไฮโอ SPF OSU ฝูงยังเป็นน้ำเหลืองการตรวจหาแอนติบอดีสุกรทางเดินหายใจและระบบสืบพันธุ์กลุ่มอาการของโรคไวรัส PRCV, TGEV และcircovirus สุกรชนิด 2. สุกร farrowed ตามธรรมชาติและอนุบาลลูกสุกรของพวกเขาจนกว่าจะสิ้นสุดของการศึกษา สี่การทดลองกลุ่มในการศึกษามีดังนี้ กลุ่มที่ 1: PEDV เชื้อสุกรดูดนม 9 วันเก่า (n = 9); กลุ่มที่ 2: MEM เพียงเชื้อสุกรดูดนม 9 วันเก่า (n = 11); กลุ่มที่ 3: PEDV เชื้อ 26 วันเก่าลูกสุกรหย่านม (n = 11); กลุ่มที่ 4: MEM เพียงเชื้อ26 วันเก่าลูกสุกรหย่านม (n = 9) ขั้นตอนการทดลองทั้งหมดในสัตว์ได้รับการอนุมัติโดยดูแลและการใช้สัตว์สถาบันคณะกรรมการของมหาวิทยาลัยแห่งรัฐโอไฮโอ สุกรในกลุ่ม PEDV ถูกเชื้อปากเปล่ากับ PEDV เชื้อ [8.9 log10 GE (จีโนมเทียบเท่า) (≈2.9 log10 แผ่นโลหะขึ้นรูปหน่วย) / หมู] และสุกรในMEM เฉพาะกลุ่มที่ได้รับเชื้อ MEM ปริมาณการฉีดวัคซีนก็ขึ้นอยู่กับการศึกษาก่อนหน้านี้ก่อให้เกิดโรคในห้องปฏิบัติการของเรา (Jung et al., 2014) ต่อไปนี้ PEDV ฉีดวัคซีนสุกรได้รับการตรวจสอบอาการทางคลินิกทุกวันจนถึงการชันสูตรศพ โรคอุจจาระร่วงได้รับการประเมินโดย sco- แหวนสอดคล้องอุจจาระ สอดคล้องอุจจาระได้รับคะแนนเป็น 0 = ของแข็ง1 = ซีดขาว; 2 = กึ่งเหลว 3 = ของเหลวด้วยคะแนน 2 หรือมากกว่าdiarrheic พิจารณา เชื้อและจำลองสุกร (n = 3-4 / กลุ่มในแต่ละครั้งที่จุด) ถูก euthanized สำหรับการศึกษาภูมิคุ้มกันในระยะเฉียบพลันในวันที่โพสต์การฉีดวัคซีน (PID) ที่ 1 และในระยะต่อมา (PID 5) ของการติดเชื้อ ตัวอย่างเลือดถ่ายที่ PID 1 (n = 6-8 สุกรต่อกลุ่ม), PID 3 (n = 4-8 สุกรต่อกลุ่ม) และ PID 5 (จาก euthanized หมู n = 3-4 ต่อกลุ่ม) และ aliquots ซีรั่มที่แยกต่างหาก ได้ถูกเตรียมไว้สำหรับการวิเคราะห์ไซโตไคน์และการหาปริมาณไวรัสอาร์เอ็นเอ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แม่สุกรท้อง seronegative 26 วัน pedv - เก่าseronegative หย่านมสุกรลูกผสมดูร็อคสีขาวขนาดใหญ่ ×ที่ได้จาก pedv ฟรีเฉพาะปลอดโรค ( SPF ) ( ยืนยันโดยประวัติขาดข้าพเจ้า PCR pedv ตัวอย่างอุจจาระบวก และpedv antibodies ) ในสุกรของรัฐโอไฮโอมหาวิทยาลัย ที่SPF โอสฝูงก็ seronegative สำหรับแอนติบอดีเพื่อเปลี่ยนแปลงทางเดินหายใจและโรคระบบสืบพันธุ์และ prcv tgev , ไวรัสเซอร์โคไวรัสสุกรประเภท 2 แม่พันธุ์สุกร farrowed ตามธรรมชาติและพยาบาลลูกของพวกเขาจนจบการศึกษา 4 ทดลองกลุ่มในการศึกษามีดังนี้ กลุ่มที่ 1 : pedv เชื้อ9-day-old หมูดูดนม ( n = 9 ) , กลุ่มที่ 2 : แหม่มปลูกเท่านั้น9-day-old หมูดูดนม ( n = 11 ) กลุ่ม 3 : 26 - pedv เชื้อวันแก่ลูกสุกรหย่านม ( n = 11 ) ; กลุ่มที่ 4 เท่านั้น แต่แหม่ม26 วันแก่ลูกสุกรหย่านม ( n = 9 ) ทุกขั้นตอนในการทดลองสัตว์ที่ถูกรับรองโดย สถาบัน การดูแลและการใช้สัตว์คณะกรรมการรัฐโอไฮโอมหาวิทยาลัย สุกรในกลุ่ม pedvปลูกเชื้อด้วยวาจากับ pedv เชื้อ [ 8.9 LN GE ( จีโนมเทียบเท่า ) ( ≈ 2.9 LN จุลินทรีย์สร้างหน่วย ) / หมูและหมูแหม่ม เพียงแต่กลุ่มที่ได้รับ แหม่ม วัคซีนโดสบนพื้นฐานของการศึกษาการก่อนหน้านี้ในแล็บของเรา ( จองet al . , 2010 ) ต่อไปนี้ pedv เชื้อสุกร การติดตามสำหรับคลินิกป้ายทุกวันจนกว่าสาเหตุ . ได้รับการประเมินโดย SCO - ท้องเสียแหวนอุจจาระสม่ำเสมอ ความสอดคล้องอุจจาระได้คะแนนเป็น 0 = ของแข็ง1 = แป้งเปียก ; 2 = 3 = กึ่งของเหลว ของเหลว ด้วยคะแนนของ 2 หรือมากกว่าถือว่า diarrheic . ใส่หมูและเยาะเย้ย ( n = 3-4 กลุ่ม ที่แต่ละจุดเวลา ) euthanized เพื่อการศึกษาที่ระยะเฉียบพลันในการโพสต์ ( PID ) 1 และในขั้นตอนภายหลัง ( ผิด5 ) ของการติดเชื้อ ตัวอย่างเลือดที่ถ่ายในแบบที่ 1 ( n = 6-8 หมูต่อกลุ่ม ) แบบที่ 3 ( n = 4-8 สุกรแต่ละกลุ่ม ) และแบบที่ 5 ( จาก euthanizedสุกร , n = 3-4 / กลุ่ม ) และเตรียมแยกเฉยๆ เซรั่มสำหรับการวิเคราะห์ปริมาณไวรัส RNA ไค .