2.5. Detection of hydroxyl radicals

2.5. Detection of hydroxyl radicals by deoxyribose assay

The assay was performed as described by Halliwell, Gutteridge, and Aruoma (1987) with minor changes. All solutions were freshly prepared. One millimetre of the reaction mixture contained 100 μl of 28 mM 2-deoxy-d-ribose (dissolved in KH2PO4–K2HPO4 buffer, pH 7.4), 500 μl solution of various concentrations of the ginger extract, 200 μl of 200 μM FeCl3 and 1.04 mM EDTA (1:1 v/v), 100 μl H2O2 (1.0 mM) and 100 μl ascorbic acid (1.0 mM). After an incubation period of 1 h at 37 and 80 °C the extent of deoxyribose degradation was measured by the TBA reaction. 1.0 ml of TBA (1% in 50 mM NaOH) and 1.0 ml of TCA were added to the reaction mixture and the tubes were heated at 100 °C for 20 min. After cooling, the absorbance was read at 532 nm against a blank (containing only buffer and deoxyribose). The percentage inhibition was calculated by the formula:
I(%)=100-(Abs.sample/Abs.control)×100.I(%)=100-(Abs.sample/Abs.control)×100.
Turn MathJax on

The IC50 value represented the concentration of the compounds that caused 50% inhibition of radical formation. Quercetin was used as a positive control.

The data obtained at each point were the average of three measurements.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.5 การตรวจอนุมูลไฮดรอกซิลโดยวิเคราะห์ deoxyriboseการทดสอบที่ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ โดย Halliwell, Gutteridge, Aruoma (1987) มีการเปลี่ยนแปลงเล็กน้อย สดได้เตรียมแก้ปัญหาทั้งหมด มิลลิเมตรหนึ่งของปฏิกิริยาผสมอยู่ 100 μl ของ 28 มม. 2-deoxy-d-ribose (ละลายในบัฟเฟอร์ KH2PO4 – K2HPO4, pH 7.4), โซลูชั่น μl 500 ของความเข้มข้นต่าง ๆ ของขิงสกัด 200 μl 200 μM FeCl3 และ 1.04 mM EDTA (1:1 v/v), 100 μl H2O2 (1.0 mM) และกรดแอสคอร์บิค 100 μl (1.0 mM) หลังจากระยะการฟักตัวของ h 1 ที่ 37 และ 80 ° C ถูกวัดขอบเขตของการย่อยสลาย deoxyribose โดยปฏิกิริยา TBA 1.0 ml TBA (1% NaOH 50 มม.) และ 1.0 ml ของ TCA ได้เพิ่มส่วนผสมของปฏิกิริยา และหลอดมีความร้อนที่ 100 ° C สำหรับ 20 นาที หลังจากทำความเย็น absorbance ที่ถูกอ่านที่ 532 nm กับช่องว่าง (ประกอบด้วยเฉพาะบัฟเฟอร์และ deoxyribose) ยับยั้งการเปอร์เซ็นต์คำนวณตามสูตร:I(%)=100-(Abs.sample/Abs.control)×100.I(%)=100-(Abs.sample/Abs.control)×100เปิด MathJaxค่า IC50 แสดงความเข้มข้นของสารที่ทำให้เกิด 50% ยับยั้งการก่อตัวรุนแรง Quercetin ถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวกข้อมูลที่ได้ในแต่ละจุดมีค่าเฉลี่ยของการวัด 3

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.5 การตรวจหาสารอนุมูลไฮดรอกซิ Deoxyribose ด้วยวิธีการทดสอบที่ได้รับการดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดยฮอล์ลิ, Gutteridge และ Aruoma (1987) ที่มีการเปลี่ยนแปลงเล็กน้อย การแก้ปัญหาทั้งหมดได้รับการปรุงสดใหม่ หนึ่งมิลลิเมตรของผสมปฏิกิริยาที่มีอยู่ 100 ไมโครลิตร 28 มิลลิ 2 Deoxy-D-น้ำตาล (ละลายในบัฟเฟอร์ KH2PO4-K2HPO4 ค่า pH 7.4), การแก้ปัญหา 500 ไมโครลิตรของความเข้มข้นต่างๆของสารสกัดจากขิง 200 ไมโครลิตร 200 ไมครอน FeCl3 และ 1.04 EDTA มิลลิ (1: 1 v / v) 100 ไมโครลิตร H2O2 (1.0 มิลลิเมตร) และ 100 ไมโครลิตรวิตามินซี (1.0 มิลลิเมตร) หลังจากระยะฟักตัวประมาณ 1 ชั่วโมงที่ 37 และ 80 องศาเซลเซียสขอบเขตของการย่อยสลาย Deoxyribose วัดจากปฏิกิริยา TBA 1.0 มิลลิลิตร TBA (1% ในปี 50 มิลลิ NaOH) และ 1.0 มิลลิลิตร TCA ถูกเพิ่มเข้าไปผสมปฏิกิริยาและหลอดถูกความร้อนที่ 100 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 20 นาที หลังจากที่ระบายความร้อน, การดูดกลืนแสงได้อ่านที่ 532 นาโนเมตรกับว่างเปล่า (ที่มีเพียง buffer และ Deoxyribose) ยับยั้งร้อยละที่คำนวณได้จากสูตร:. ฉัน (%) = 100 (Abs.sample / Abs.control) × 100.I (%) = 100 (Abs.sample / Abs.control) × 100 เปิด MathJax บนค่า IC50 เป็นตัวแทนของความเข้มข้นของสารที่ทำให้เกิดการยับยั้ง 50% ของการก่อตัวรุนแรง Quercetin ถูกนำมาใช้เป็นตัวควบคุมบวก. ข้อมูลที่ได้ในแต่ละจุดได้เฉลี่ยของสามวัด

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.5 การตรวจหาอนุมูลไฮดรอกซิลโดยดีออกซีไรโบส )

( กำลังดำเนินการตามที่อธิบายไว้โดย Halliwell gutteridge , และ aruoma ( 1987 ) มีการเปลี่ยนแปลงเล็กน้อย โซลูชั่นทั้งหมดเตรียมสด ๆ 1 มิลลิเมตรจากปฏิกิริยาของส่วนผสมที่มีอยู่ 100 μ L 28 มม. 2-deoxy-d-ribose ( ละลายใน kh2po4 – k2hpo4 buffer pH 7.4 ) , 500 μ L สารละลายความเข้มข้นต่าง ๆ ของขิงสกัด200 μ L 200 M และμ FeCl3 1.04 mM EDTA ( 1 : 1 v / v ) L 100 μ H2O2 ( มม. ) และ 100 μ l กรดแอสคอร์บิค ( มม. ) ผ่านระยะฟักตัว 1 H ที่ 37 และ 80 ° C ระดับของการย่อยสลายดีออกซีไรโบสวัดโดย TBA ปฏิกิริยา 1.0 มล. TBA ( 1 ใน 50 mm NaOH ) และ 1.0 มิลลิลิตรของ TCA มีการเพิ่มปฏิกิริยาผสมและท่อ คือความร้อนที่ 100 °องศาเซลเซียส 20 นาที หลังเย็นนได้อ่านที่ 532 nm กับว่าง ( ที่มีบัฟเฟอร์เท่านั้น และดีออกซีไรโบส ) เปอร์เซ็นต์การยับยั้งคำนวณได้โดยสูตร :
( % ) = 100 - ( abs . ตัวอย่าง / ABS ควบคุม ) × 100 ( % ) = 100 - ( abs . ตัวอย่าง / ABS ควบคุม ) × 100


เปิด mathjax บน ic50 ค่าที่แสดงความเข้มข้นของสารประกอบที่ ยับยั้งการเกิดอนุมูลอิสระทำให้ 50% . สารเคอร์ซิทิน ถูกใช้เป็นตัวควบคุมบวก

ข้อมูลที่ได้ในแต่ละจุดมีเฉลี่ยสามวัด