Lipid extraction from bacterial pel

Lipid extraction from bacterial pellet
The CLA analysis for bacterial pellet samples was modified from
Coakley and others (2003), where 60 μL of internal standard (6.49
mg/mL heptadecanoic acid in hexane)were added to the pellet suspended
in 1 mL buffered saline solution (0.137 mol/L NaCl, 7.0
mmol/L K2HPO4, and 2.5 mmol/L KH2PO4). Then 2 mL of isopropanol
were added and vortexed 60 s followed by the incorporation
of 1.5 mL of hexane. The mixture was shaken vigorously for 3
min and centrifuged 5 min at 2000 × g at 2 to 4 ◦C. The upper layer
was recovered and dried under nitrogen gas at 70 ◦C for 10 min in
the Zymark evaporator. The sample was dissolved in 500 μL hexane,
transferred to a microtube, and 100 μL 1N methanolic sodium hydroxidewere
added and vortexed for 1 min. The mixture was held 15
min in a 70 ◦C bath. Then, fatty acid methyl esters were prepared.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ไขมันสกัดจากเม็ดแบคทีเรียวิเคราะห์ CLA ในเม็ดแบคทีเรียตัวอย่างล่าสุดจากCoakley และอื่น ๆ (2003), 60 μL ภายในมาตรฐาน (6.49กรด heptadecanoic mg/mL ในเฮกเซน) ได้เพิ่มเม็ดหยุดชั่วคราวใน 1 มล. buffered เกลือ (0.137 โมล/L NaCl, 7.0mmol/L K2HPO4 ก 2.5 mmol/L KH2PO4) Isopropanol แล้ว 2 mLเพิ่มและ vortexed 60 ตามที่จดทะเบียนของมล 1.5 ของเฮกเซน ส่วนผสมถูกเขย่าโยคะสำหรับ 3นาทีและ 5 นาที centrifuged ที่ 2000 × g ที่ 2 ถึง 4 ◦C ชั้นบนการกู้คืน และแห้งภายใต้ก๊าซไนโตรเจนที่ 70 ◦C สำหรับ 10 นาทีในZymark evaporator ตัวอย่างไม่ละลายในเฮกเซน μL 500โอนย้ายไป microtube และ 100 μL 1N โซเดียม methanolic hydroxidewereเพิ่ม และ vortexed ใน 1 นาที ส่วนผสมจัดขึ้น 15นาทีในน้ำ 70 ◦C แล้ว กรดไขมัน methyl esters เตรียมไว้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสกัดไขมันจากเม็ดแบคทีเรียการวิเคราะห์ CLA สำหรับตัวอย่างเม็ดแบคทีเรียมีการปรับเปลี่ยนจาก Coakley และอื่น ๆ (2003) ที่ 60 ไมโครลิตรมาตรฐานภายใน (6.49 มิลลิกรัม / มิลลิลิตรกรด heptadecanoic ในเฮกเซน) ถูกเพิ่มเข้าไปในเม็ดที่ถูกระงับใน1 มิลลิลิตรบัฟเฟอร์น้ำเกลือ (0.137 โมล / ลิตรโซเดียมคลอไรด์ 7.0 มิลลิโมล / ลิตร K2HPO4 และ 2.5 มิลลิโมล / ลิตร KH2PO4) จากนั้น 2 มิลลิลิตร isopropanol มีการเพิ่มและการ vortex 60 วินาทีตามมาด้วยการรวมตัวกันของ1.5 ml ของเฮกเซน ส่วนผสมเขย่าแรง ๆ เป็นเวลา 3 นาทีและ 5 นาทีหมุนเหวี่ยงที่ 2000 ×กรัมที่ 2-4 ◦C ชั้นบนก็หายและแห้งภายใต้ก๊าซไนโตรเจนที่ 70 ◦Cเป็นเวลา 10 นาทีในการระเหย Zymark กลุ่มตัวอย่างถูกละลายในเฮกเซน 500 ไมโครลิตร, โอนไป Microtube และ 100 ไมโครลิตร 1N โซเดียมเมทานอล hydroxidewere เพิ่มและการ vortex เวลา 1 นาที ส่วนผสมที่ถูกจัดขึ้นใน 15 นาทีในห้องอาบน้ำ 70 ◦C จากนั้นเมทิลเอสเตอร์ของกรดไขมันได้จัดทำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสกัดไขมันจากแบคทีเรีย เม็ด
CLA การวิเคราะห์ตัวอย่างเม็ดแบคทีเรียดัดแปลงจาก
โคกลีย์และผู้อื่น ( 2003 ) ที่ 60 μ L มาตรฐานภายใน ( 6.49
มก. / มล. heptadecanoic กรดในน้ำ ) มีการเพิ่มเม็ดระงับ
1 มล. ในน้ำเกลือ ( 0.137 mol / L NaCl 7.0
k2hpo4 มิลลิโมล / ลิตรและ 2.5 mmol / L kh2po4 ) แล้ว 2 ml ของไอโซโพรพานอล
เพิ่ม vortexed 60 s ตามด้วยประสาน
1.5 มิลลิลิตร เฮกเซน . ส่วนผสมที่ถูกเขย่าอย่างแรง 3
มินไฟฟ้า 5 นาที 2000 × G ที่ 2 ถึง 4 ◦ C ชั้นบน
ถูกกู้คืนและทำแห้งภายใต้แก๊สไนโตรเจนที่อุณหภูมิ 70 องศาเซลเซียส เป็นเวลา 10 นาที◦
zymark ระเหย จำนวน 500 μฉันละลายในเฮกเซน
ย้ายไป microtube และ 100 μ L กับเมทานอล hydroxidewere
โซเดียมเพิ่มและ vortexed เป็นเวลา 1 นาที ส่วนผสมจะถูกจัดขึ้น 15
มินใน◦ C 70 บาท จากนั้น , กรดไขมันเมทิลเอสเทอร์ เตรียมไว้