Effect of culture conditions and hydrocarbons on
bioemulsifier production
MSS medium was used to study the bioemulsifier production.
The composition of MSS medium was (g/l):
NaCl 10.0; sucrose 10.0; Na2HPO4 5.0; NH4NO3 2.0;
KH2PO4 2.0; MgSO4 · 7H2O 0.2. Flasks containing 50 ml
of MSS medium were inoculated with a single colony
from an agar plate. The effect of aeration on the bioemulsifier
production was studied by incubating the
cultures at 40°C under aerobic and anaerobic conditions
at 120 rpm. Anaerobic cultures were prepared removing
oxygen by aseptically bubbling oxygen-free nitrogen into
the flasks, which were sealed with rubber stoppers. The
ability of the strain to use hydrocarbons as the sole
carbon source and the inductive effect of their presence
on the bioemulsifier production were tested by growing
the isolate in MSS medium with and without sucrose
containing 5% (w/v) of paraffin or crude oil. The paraffin
used was viscous paraffin, purchased from Merck (Merck,
Darmstadt, Germany). Crude oil was obtained from a
Brazilian oil field [42].
Samples were taken at different time points during the
fermentation to determine the biomass concentration
and bioemulsifier production. Bacterial growth was
determined by measuring the optical density at 600 nm.
Afterwards, the samples were centrifuged (10,000 × g, 20
min, 20°C) and cell-free supernatants were used to
measure the surface tension and to determine the emulsifying
activity, as described below. At the end of the
fermentation, cells were harvested by centrifugation and
the cell dry weight (g/l) was determined (48 h at 105°C).
To recover the bioemulsifier, the cell-free supernatants
were mixed with three volumes of cold ethanol and
incubated at −20°C overnight. Afterwards, the precipitate
was collected by centrifugation (10,000 × g, 20 min,
4°C). The crude bioemulsifier was dissolved in a minimal
amount of demineralized water and freeze dried. The
product obtained was weighed and stored at −20°C for
further use.
Effect of culture conditions and hydrocarbons onbioemulsifier productionMSS medium was used to study the bioemulsifier production.The composition of MSS medium was (g/l):NaCl 10.0; sucrose 10.0; Na2HPO4 5.0; NH4NO3 2.0;KH2PO4 2.0; MgSO4 · 7H2O 0.2. Flasks containing 50 mlof MSS medium were inoculated with a single colonyfrom an agar plate. The effect of aeration on the bioemulsifierproduction was studied by incubating thecultures at 40°C under aerobic and anaerobic conditionsat 120 rpm. Anaerobic cultures were prepared removingoxygen by aseptically bubbling oxygen-free nitrogen intothe flasks, which were sealed with rubber stoppers. Theability of the strain to use hydrocarbons as the solecarbon source and the inductive effect of their presenceon the bioemulsifier production were tested by growingthe isolate in MSS medium with and without sucrosecontaining 5% (w/v) of paraffin or crude oil. The paraffinused was viscous paraffin, purchased from Merck (Merck,Darmstadt, Germany). Crude oil was obtained from aBrazilian oil field [42].Samples were taken at different time points during thefermentation to determine the biomass concentrationand bioemulsifier production. Bacterial growth wasdetermined by measuring the optical density at 600 nm.Afterwards, the samples were centrifuged (10,000 × g, 20min, 20°C) and cell-free supernatants were used tomeasure the surface tension and to determine the emulsifyingactivity, as described below. At the end of thefermentation, cells were harvested by centrifugation andthe cell dry weight (g/l) was determined (48 h at 105°C).To recover the bioemulsifier, the cell-free supernatantswere mixed with three volumes of cold ethanol andincubated at −20°C overnight. Afterwards, the precipitatewas collected by centrifugation (10,000 × g, 20 min,4°C). The crude bioemulsifier was dissolved in a minimalamount of demineralized water and freeze dried. Theproduct obtained was weighed and stored at −20°C forfurther use.
การแปล กรุณารอสักครู่..

ผลกระทบของภาวะวัฒนธรรมและไฮโดรคาร์บอนในการผลิต bioemulsifier กลาง MSS ถูกใช้ในการศึกษาการผลิต bioemulsifier ได้. องค์ประกอบของกลางเป็น MSS (g / l): โซเดียมคลอไรด์ 10.0; น้ำตาลซูโครส 10.0; Na2HPO4 5.0; NH4NO3 2.0 KH2PO4 2.0 MgSO4 · 7H2O 0.2 ขวดที่มี 50 มล. ของกลาง MSS ถูกเชื้อกับอาณานิคมเดียวจากจานเลี้ยงเชื้อ ผลของการเติมอากาศใน bioemulsifier ผลิตการศึกษาโดยบ่มวัฒนธรรมที่ 40 ° C ภายใต้เงื่อนไขและแอโรบิกแบบไม่ใช้ออกซิเจนที่ 120 รอบต่อนาที วัฒนธรรม Anaerobic ถูกเตรียมเอาออกซิเจนโดยปลอดเชื้อฟองไนโตรเจนที่ปราศจากออกซิเจนลงไปในขวดซึ่งถูกปิดผนึกด้วยจุกยาง สามารถของสายพันธุ์ที่จะใช้สารไฮโดรคาร์บอนเป็น แต่เพียงผู้เดียวแหล่งคาร์บอนและผลอุปนัยของการแสดงตนของพวกเขาในการผลิตbioemulsifier ได้รับการทดสอบโดยการปลูกแยกในสื่อMSS ที่มีและไม่มีน้ำตาลซูโครสที่มี5% (w / v) พาราฟินหรือน้ำมันดิบ . พาราฟินใช้เป็นพาราฟินหนืดที่ซื้อมาจากเมอร์ค (เมอร์ค, ดาร์มสตัด, เยอรมนี) น้ำมันดิบที่ได้รับจากแหล่งน้ำมันบราซิล [42]. ตัวอย่างที่ถูกนำมาที่จุดเวลาที่แตกต่างกันในระหว่างการหมักเพื่อตรวจสอบความเข้มข้นของชีวมวลและการผลิตbioemulsifier การเจริญเติบโตของแบคทีเรียที่ถูกกำหนดโดยการวัดความหนาแน่นของแสงที่ 600 นาโนเมตร. หลังจากนั้นกลุ่มตัวอย่างที่ถูกหมุนเหวี่ยง (10,000 ×กรัม, 20 นาที, 20 ° C) และ supernatants มือถือฟรีถูกนำมาใช้ในการวัดแรงตึงผิวและกำหนดผสมกิจกรรมตามที่อธิบายไว้ด้านล่าง ในตอนท้ายของการหมักเซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยงและน้ำหนักเซลล์แห้ง(g / l) ถูกกำหนด (48 ชั่วโมงที่ 105 ° C). การกู้คืน bioemulsifier ที่ supernatants มือถือฟรีได้รับการผสมกับสามเล่มของความหนาวเย็นเอทานอลและบ่มที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสในชั่วข้ามคืน หลังจากนั้นตะกอนที่ถูกเก็บรวบรวมโดยการหมุนเหวี่ยง (10,000 ×กรัม, 20 นาที, 4 ° C) bioemulsifier น้ำมันดิบถูกละลายในน้อยที่สุดปริมาณน้ำปราศจากแร่ธาตุและแช่แข็งแห้ง ผลิตภัณฑ์ที่ได้รับการชั่งน้ำหนักและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียสสำหรับใช้งานต่อไป
การแปล กรุณารอสักครู่..
