2.3. Total phenolic content
Determination of total phenolic content (TPC) was conducted
according to the previous method (Singleton & Rossi, 1965). An aliquot
of sample (20 lL) was mixed with 1580 lL of distilled water,
100 lL of Folin–Ciocalteu reagent and 300 lL of 20% Na2CO3, followed
by incubation for 2 h at room temperature. After incubation
the absorbance was recorded at 765 nm. The content of total phenolics
was calculated using standard curve for gallic acid and
expressed as milligrams of gallic acid equivalents per 1 mL of sample
(mg GAE/mL).
2.4. Total proanthocyanidin content
The content of total proanthocyanidin compounds (PAC) in
samples was determined spectrophotometrically using the p-
DMACA (p-dimethylaminocinnamaldehyde) method with slight
modifications (Li, Tanner, & Larkin, 1996). Digested fractions or
juice samples (100 and 500 lL, respectively) were mixed with
80 lL of p-DMACA reagent, methanol (2 and 25 mL, respectively),
and a drop of glycerol. After 7 min, the absorbance at 640 nm
was measured. The contents of proanthocyanidins in samples were
expressed as milligrams of catechin equivalents per 100 mL of
sample (mg CE/100 mL).
2.5. DPPH scavenging assay
DPPH scavenging assay was carried out according to the previously
published method (Pownall, Udenigwe, & Aluko, 2010).
Briefly, 500 lL of 100 lM DPPH solution in methanol was mixed
with 100 lL of sample dilutions and 400 lL of 50 mM phosphate
buffer, pH 7.0. Blank consisted of 400 lL buffer, 100 lL of sample
dilutions and 500 lL of methanol. Control was prepared by mixing
500 lL of phosphate buffer and 500 lL of DPPH solution. Mixture
was incubated at room temperature in darkness for 30 min, and
absorbance was measured at 517 nm. DPPH radical scavenging
activity (%) was calculated as {(A517c A517s)/A517c} 100, where
c and s represent control DPPH and sample, respectively. Results
were expressed as IC50 values, which represent concentration
required to scavenge 50% of DPPH free radicals.
2.3 ฟีนอเนื้อหารวมวิธีการกำหนดเนื้อหาฟีนอรวม (สิ่งทอ)ตามวิธีก่อนหน้านี้ (เดี่ยว & Rossi, 1965) ส่วนลงตัวของตัวอย่าง (20 lL) ถูกผสมกับ 1580 จะน้ำกลั่น100 จะรีเอเจนต์ Folin – Ciocalteu และ 300 จะ 20% Na2CO3 ตามโดยคณะทันตแพทยศาสตร์สำหรับ h 2 ที่อุณหภูมิห้อง หลังจากบ่มabsorbance ที่เป็นบันทึกที่ 765 nm เนื้อหาของ phenolics รวมมีคำนวณโดยใช้เส้นโค้งมาตรฐานสำหรับกรด gallic และแสดงเป็น milligrams เทียบเท่ากรด gallic ต่อ 1 มิลลิลิตรของตัวอย่าง(mg GAE/mL)2.4 การ proanthocyanidin รวมเนื้อหาเนื้อหาของสาร proanthocyanidin รวม (PAC) ในตัวอย่างกำหนดโดยใช้ p - spectrophotometricallyวิธี DMACA (p dimethylaminocinnamaldehyde) ด้วยเล็กน้อยแก้ไข (Li แทนเนอร์ชำรุด และลาร์ คิน 1996) เศษส่วนย่อย หรือน้ำตัวอย่าง (100 และ 500 จะ ตามลำดับ) รวมกับ80 จะของรีเอเจนต์ p DMACA เมทานอล (2 และ 25 mL ตามลำดับ),และหยดกลีเซอร หลัง 7 นาที absorbance ที่ 640 nmที่วัด เนื้อหาของ proanthocyanidins ในตัวอย่างได้แสดงเป็น milligrams เทียบเท่าสารสกัดจากต่อ 100 mL ของตัวอย่าง (mg CE/100 mL)2.5. DPPH scavenging assayDPPH scavenging assay ถูกดำเนินการตามก่อนหน้านี้วิธีเผยแพร่ (Pownall, Udenigwe, & Aluko, 2010)สั้น ๆ 500 จะ 100 lM DPPH โซลูชันในเมทานอลถูกผสม100 lL ตัวอย่าง dilutions และ 400 จะของฟอสเฟต 50 มม.บัฟเฟอร์ ค่า pH 7.0 เปล่าประกอบด้วยบัฟเฟอร์จะ 400, 100 lL ตัวอย่างdilutions และ 500 ของเมทานอลจะ ตัวควบคุมถูกเตรียม โดยผสม500 จะบัฟเฟอร์ฟอสเฟตและ 500 จะของ DPPH ส่วนผสมincubated ที่อุณหภูมิห้องในที่มืดใน 30 นาที และมีวัด absorbance ที่ 517 nm Scavenging รุนแรง DPPHกิจกรรม (%) คำนวณเป็น {(A517c A517s)/A517c } 100 ที่c และ s แทนควบคุม DPPH และตัวอย่าง ตามลำดับ ผลลัพธ์ได้แสดงเป็นค่า IC50 ซึ่งแสดงถึงความเข้มข้นต้อง scavenge 50 ของอนุมูลอิสระ DPPH
การแปล กรุณารอสักครู่..

2.3 การกำหนดปริมาณสารฟีนอลิกรวมรวมเนื้อหา
( TPC ) ดำเนินการตามวิธีการเดิม ( ฌอน แอสติน&รอสซี่ , 1965 ) เป็นส่วนลงตัวของตัวอย่าง ( 20
ll ) ผสมกับ 580 จะกลั่นน้ำ ,
100 จะ folin – ciocalteu รีเอเจนต์และ 300 จะ 20% Na2CO3 , ตาม
โดยบ่มเป็นเวลา 2 ชั่วโมงที่อุณหภูมิห้อง หลังจากบ่ม
นเป็นบันทึกที่ 765 nm .เนื้อหาของปริมาณ total phenolics
ถูกคำนวณโดยใช้เส้นโค้งมาตรฐานเพิ่มขึ้นและ
แสดงเป็นมิลลิกรัมต่อ 1 มิลลิลิตรของกรดแกลลิค > ตัวอย่าง
( mg เก / ml ) .
2.4 . รวมโปรแ โธไซยานิดินเนื้อหา
เนื้อหาสารประกอบโปรแ โธไซยานิดิน ( PAC ) ในตัวอย่างนี้
ตั้งใจใช้ P -
dmaca ( p-dimethylaminocinnamaldehyde ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย
( หลี่แทนเนอร์ & Larkin , 1996 )
ตัวอย่างย่อยเศษส่วนหรือน้ำผลไม้ 100 และ 500 จะตามลำดับ ) ผสมกับ
80 จะ p-dmaca รีเอเจนต์ , เมทานอล ( 2 และ 25 มิลลิลิตร ) ,
และหยดของกลีเซอรอล . หลังจากผ่านไป 7 นาที , การดูดกลืนแสงที่ 640 nm
เป็นวัด เนื้อหาของ proanthocyanidins ในกลุ่มตัวอย่าง
แสดงเป็นมิลลิกรัมต่อ 100 มิลลิลิตร เทียบเท่า Catechin
ตัวอย่าง ( มิลลิกรัม / 100 มิลลิลิตร CE )
2.5dpph scavenging assay
dpph scavenging assay พบว่าตามไปก่อนหน้านี้
วิธีการเผยแพร่ ( เพาเนิล udenigwe & Aluko , , , 2010 ) .
สั้น 500 จะ 100 LM dpph สารละลายเมทานอลผสม
100 จะเจือจางตัวอย่างและ 400 จะ 50 mm
ฟอสเฟตบัฟเฟอร์ พีเอช 7.0 . ว่างจำนวน 400 จะบัฟเฟอร์ 100 จะเจือจางตัวอย่าง
และ 500 จะของเมทานอล การควบคุมถูกเตรียมโดยการผสม
500 จะของฟอสเฟตบัฟเฟอร์และ 500 จะ dpph โซลูชั่น ส่วนผสม
ถูกบ่มที่อุณหภูมิห้องในที่มืดเป็นเวลา 30 นาทีและค่า
ถูกวัดที่ 517 nm . dpph เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา
กิจกรรม ( % ) คือคำนวณเป็น { ( a517c a517s ) / a517c } 100 ที่
c และ s แทนการควบคุม dpph และตัวอย่าง ตามลำดับ ผลลัพธ์ที่ได้แสดงเป็น ic50
ซึ่งเป็นตัวแทนของค่านิยมต้องการค้นหาพลัง 50% ของ dpph อนุมูลอิสระ
การแปล กรุณารอสักครู่..
