Biofilm formation was measured usin

Biofilm formation was measured using a rapid microtiter plate
assay as previously described (Rich et al., 2011). Isolates stored
in 96-well microtiter plates were replicated onto Omnitray plates
with MRS (Thermo Scientific, Rochester, NY) using a sterile
96-pin replicator lid (Nunc, Denmark, oxidized polystyrene).
Omnitray plates were incubated for 48 h under anaerobic conditions
at 37 C, and colonies were transferred to fresh Omnitray
plates and grown for an additional 48 h. A 96 well master microtiter
plate (Nunc) was prepared containing 150 lL of MRS in each
well. The master plate was inoculated with colonies from the
Omnitray using a replicator lid and the plate was incubated for
48 h under anaerobic conditions at 37 C. After 48 h, cells were agitated
and a new lid was dipped into the cells and transferred to a
new plate which was incubated for 48 h, corresponding to the static
attachment phase of a conventional biofilm reactor. Lids were
transferred to fresh plates (time point zero) and subsequently
transferred every 48 h until the assay endpoint at 144 h. Analysis
of the biofilm formation was performed as previously described
(Rich et al., 2011). Replicator lid pins were stained with a 0.1% crystal
violet solution for 30 min at room temperature, and destained
with 95% ethanol. The amount of crystal violet staining, representing
biofilm growth, was measured at 600 nm using a SpectraMax
M5 microtiter plate reader (Molecular Devices, Sunnyvale, CA).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผู้แต่ง Biofilm ถูกวัดโดยใช้จาน microtiter อย่างรวดเร็วassay เป็นก่อนหน้านี้อธิบาย (Rich et al., 2011) แยกเก็บไว้ใน microtiter ดี 96 แผ่นถูกจำลองลงบนแผ่น Omnitrayมีนาง (เทอร์โมวิทยาศาสตร์ โรเชสเตอร์ NY) ใช้การฆ่าเชื้อฝาตัวทำซ้ำ 96-pin (Nunc เดนมาร์ก ออกซิไดซ์โฟม)แผ่น Omnitray ได้ incubated สำหรับ h 48 ภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจนที่ 37 C และอาณานิคมถูกโอนย้ายไป Omnitray สดแผ่น และ h 48 เพิ่มเติมโต 96 ดีหลัก microtiterแผ่น (Nunc) ถูกเตรียมไว้ประกอบด้วย 150 จะของนางในแต่ละดี จานหลักเป็น inoculated กับอาณานิคมจากการOmnitray ที่ใช้ฝาตัวทำซ้ำและแผ่นถูก incubated สำหรับh 48 ภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจนที่ 37 เซลเซียส หลังจาก 48 h เซลล์ถูกนั้นกระตุ้นทำและฝาใหม่ถูกสอดเข้าไปในเซลล์ และถูกโอนย้ายไปจานใหม่ที่ถูก incubated สำหรับ h 48 จะคงขั้นตอนการแนบของเครื่องปฏิกรณ์แบบธรรมดา biofilm มีฝาโอนย้ายแผ่นสด (เวลาจุดศูนย์) และในเวลาต่อมาโอนย้ายทุก h 48 จนถึงปลายทางวิเคราะห์ที่ 144 h. วิเคราะห์ของ biofilm ผู้แต่งทำการอธิบายไว้ก่อนหน้านี้เป็น(รวย et al., 2011) ตัวแทนทำสำเนาฝาหมุดมีสี ด้วยคริสตัล 0.1%โซลูชั่นไวโอเลท 30 นาทีที่อุณหภูมิห้อง และ destainedมีเอทานอล 95% จำนวนคริสตัลไวโอเลตย้อมสี การแสดงมีที่วัดเติบโต biofilm, 600 nm โดยใช้การ SpectraMaxM5 microtiter แผ่นอ่าน (อุปกรณ์โมเลกุล Sunnyvale, CA)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การสร้างไบโอฟิล์มได้รับการวัดโดยใช้แผ่นไมโครอย่างรวดเร็วการทดสอบตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ (รวย et al., 2011)
แยกเก็บไว้ใน 96 หลุมแผ่นไมโครถูกจำลองแบบลงบนแผ่น Omnitray กับนาง (เทอร์โมวิทยาศาสตร์โรเชสเตอร์, นิวยอร์ก) โดยใช้การฆ่าเชื้อฝาจำลอง96 ขา (Nunc, เดนมาร์ก, สไตรีนออกซิไดซ์). แผ่น Omnitray ถูกบ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมงภายใต้เงื่อนไขที่ไม่ใช้ออกซิเจนที่ 37 องศาเซลเซียสและอาณานิคมถูกย้ายไป Omnitray สดจานและปลูกเพิ่มอีก48 ชั่วโมง 96 ดีต้นแบบไมโครแผ่น(Nunc) ถูกจัดทำขึ้นมี 150 LL ของนางในแต่ละดี จานหลักได้รับเชื้อด้วยอาณานิคมจากOmnitray ใช้ฝาจำลองและแผ่นที่ถูกบ่มเป็นเวลา48 ชั่วโมงภายใต้เงื่อนไขการใช้ออกซิเจนที่ 37 องศาเซลเซียส 48 ชั่วโมงหลังจากที่เซลล์ถูกตื่นเต้นและมีฝาปิดใหม่ที่ถูกจุ่มลงไปในเซลล์และย้ายไปที่ใหม่แผ่นซึ่งได้รับการบ่มเป็นเวลา 48 ชั่วโมงซึ่งสอดคล้องกับแบบคงที่ขั้นตอนสิ่งที่แนบมาของไบโอฟิล์มเครื่องปฏิกรณ์แบบเดิม ฝาถูกถ่ายโอนไปยังแผ่นสด (จุดเวลาศูนย์) และต่อมาได้โอนทุก48 ชั่วโมงจนกว่าจะถึงจุดสิ้นสุดของการทดสอบที่ 144 ชั่วโมง การวิเคราะห์ของการสร้างไบโอฟิล์มได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้(รวย et al., 2011) หมุดฝาซ้ำถูกย้อมด้วยสีคริสตัล 0.1% วิธีการแก้ปัญหาสีม่วงเป็นเวลา 30 นาทีที่อุณหภูมิห้องและ destained กับเอทานอล 95% ปริมาณของการย้อมสีม่วงคริสตัลที่เป็นตัวแทนของการเจริญเติบโตของไบโอฟิล์มได้รับการวัดที่ 600 นาโนเมตรโดยใช้ SpectraMax M5 ไมโครอ่านแผ่น (โมเลกุลอุปกรณ์ซันนีเวล, แคลิฟอร์เนีย)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การสร้างไบโอฟิล์มถูกวัดโดยใช้วิธีไมโครเพลท
อย่างรวดเร็วตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ( รวย et al . , 2011 ) แยกเก็บไว้ในแผ่นมีไมโคร 96 ดี

แบบลงบนแผ่น omnitray กับคุณนาย ( เทอร์โมวิทยาศาสตร์ Rochester , NY ) ใช้ฆ่าเชื้อ
96 พิน Replicator ฝา ( ขณะนี้ เดนมาร์ก จากพอลิสไตรีน )
omnitray แผ่นถูกบ่ม 48 ชั่วโมง ภายใต้สภาวะไร้อากาศ
ที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสและอาณานิคมที่ถูกโอนไปยังจาน omnitray
สดและปลูกเพื่อเพิ่มอีก 48 ชั่วโมง เป็น 96 ดีอาจารย์ไมโคร
จาน ( ขณะนี้ ) เตรียมบรรจุ 150 จะของคุณในแต่ละ
ดี นายจานเป็นเชื้อที่มีอาณานิคมจาก
omnitray โดยใช้ฝา Replicator และจานถูกบ่มสำหรับ
48 H ภายใต้เงื่อนไขแบบที่ 37 องศาเซลเซียส หลังจาก 48 ชม. เซลล์ก็ปั่นป่วน
และฝาใหม่ถูกจุ่มลงไปในเซลล์ และโอนไปยังจานใหม่ซึ่งถูกบ่ม
48 ชั่วโมง สอดคล้องกับ Static
แนบเฟสของเครื่องปฏิกรณ์ฟิล์มธรรมดา ฝามี
ย้ายจาน สด ( จุดเวลาศูนย์ ) และต่อมา
โอนทุกชั่วโมง 48 จนถึงปลายทางที่ต่อ 144 การวิเคราะห์ H .
ของฟิล์มการกระทำตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้
( รวย et al . ,2011 ) จำลองฝาหมุดถูกย้อมด้วย 0.1% คริสตัล
ม่วงโซลูชั่นสำหรับ 30 นาที ที่อุณหภูมิห้อง และ destained
ด้วยเอทานอล 95% ปริมาณของผลึกสีม่วง staining แทน
การเจริญเติบโตไบโอฟิล์ม , วัดที่ 600 nm ใช้ spectramax
M5 ไมโครอ่านแผ่น ( อุปกรณ์โมเลกุล , Sunnyvale , CA ) .