Cloning of Ogataea siamensis N22 xy

Cloning of Ogataea siamensis N22 xylose
reductase gene
Genomic DNA of O. siamensis N22 was
prepared and partial digested by Bsp143I. The
digested DNA fragments appeared about 1-3 kb in
size were collected and purified using QIAquick
Gel Extraction Kit (QIAGEN, USA) and
subsequently cloned into the pJET1.2/ blunting
vector (CloneJETPCR cloning kit, Fermentas,
USA), and were then introduced into Escherichia
coli XL1-Blue competent cells prepared as
described by Chung et al. (1989). Recombinant
colonies appeared on LB agar medium containing
100 µg/ml ampicillin after incubation at 37°C
were collected and subjected to plasmid DNA
preparation using the alkaline lysis method

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ของดอยอินทนนท์ Ogataea N22 xyloseยีน reductaseมี genomic DNA โอดอยอินทนนท์ N22เตรียมพร้อม และบางส่วนที่ย่อย โดย Bsp143I ที่ต้องการชิ้นส่วนดีเอ็นเอปรากฏ ประมาณ 1-3 kbขนาดถูกเก็บรวบรวม และบริสุทธิ์ที่ใช้ QIAquickเจแยกชุด (QIAGEN สหรัฐอเมริกา) และโคลนในการ pJET1.2 ต่อ / bluntingเวกเตอร์ (โคลนชุด Fermentas, CloneJETPCRสหรัฐอเมริกา), และจากนั้นได้ถูกนำเข้าสู่ Escherichiacoli XL1 บลูเซลล์เชี่ยวชาญเตรียมไว้เป็นอธิบายโดย Chung et al. (1989) วททชอาณานิคมปรากฏในปอนด์ agar ปานกลางประกอบด้วยแอมพิซิลลินไมโครกรัมเป็นเครื่อง 100 ml หลังจากบ่มที่ 37° Cมีดีเอ็นเอของ plasmid ที่รวบรวม และการเตรียมโดยใช้วิธีการ lysis ด่าง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โคลน Ogataea siamensis N22
ไซโลยีนreductase
ดีเอ็นเอจีโนมของโอ siamensis N22
เป็นเตรียมความพร้อมและบางส่วนย่อยโดยBsp143I
ดีเอ็นเอย่อยปรากฏเกี่ยวกับ 1-3
กิโลไบต์ในขนาดถูกเก็บรวบรวมและบริสุทธิ์ใช้QIAquick
เจลสกัด Kit (QIAGEN สหรัฐอเมริกา)
และโคลนไปในpJET1.2 /
การลดทอนเวกเตอร์(CloneJETPCRชุดโคลน Fermentas,
USA) และ ถูกนำมาใช้แล้วเป็น Escherichia
coli XL1
ฟ้าเซลล์อำนาจเตรียมการอธิบายโดยChung et al, (1989) Recombinant
อาณานิคมปรากฏในสื่อที่มีอาหารเลี้ยงเชื้อ LB
100 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร ampicillin หลังจากบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสถูกเก็บรวบรวมและภายใต้พลาสมิดดีเอ็นเอเตรียมใช้วิธีการสลายอัลคาไลน์

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การโคลนยีนของเอนไซม์ไซโล ogataea siamensis n22
O
genomic DNA ของพืช n22 ถูกเตรียมและบางส่วนย่อยโดย bsp143i
.
ย่อยชิ้นส่วนดีเอ็นเอปรากฏประมาณ 1-3 กิโลใน
ขนาดการเก็บรวบรวมและบริสุทธิ์ใช้ชุดสกัดเจล qiaquick
( เพิ่ม , USA ) และต่อมาใน pjet1.2/ กระทือโคลน

( clonejet เวกเตอร์ ดีเอ็นเอโคลนนิ่งชุด fermentas
, USA )และ Escherichia coli จากนั้นเข้าไป
xl1 สีฟ้าที่มีเซลล์เตรียมเป็น
อธิบายโดยชอง et al . ( 1989 ) รีคอมบิแนนท์
อาณานิคมปรากฏบนอาหารวุ้นที่มี
100 ปอนด์µ g / ml หลังจากบ่มที่ 37 ° C ampicillin
ครั้งนี้ และต้องเตรียมพลาสมิดดีเอ็นเอ
ใช้วิธีการผลิตอัลคาไลน์