A reliable monoclonal antibody (MoA

A reliable monoclonal antibody (MoAb)-based sandwich enzyme-linked immunosorbent assay (sandwich ELISA) was developed for the detection of circulating cathepsin B3 protease (CatB3) in the sera from mice experimentally infected with Fasciola gigantica and cattle naturally infected with the same parasite. The MoAb 2F9 and biotinylated rabbit polyclonal anti-recombinant CatB3 antibody were selected due to their high reactivities and specificities to F. gigantica CatB3 antigen based on indirect ELISA and immunoblotting. The lower detection limit of the sandwich ELISA assay was 10, 100 and 400 pg/ml, when applied for the detection of rCatB3 antigen and CatB3 in whole body (WB) of newly excysted juveniles (NEJ) and metacercariae (Met) of F. gigantica, respectively. This sandwich ELISA assay could detect F. gigantica infection from day 1 to 35 post infection and revealed that circulating level of CatB3 peaked at day 1 post infection. In contrast, the antibody detection by indirect ELISA could only demonstrate the antibody level from 35 days post infection. The reliability of the assay method was evaluated using serum samples from mice infected with F. gigantica or Schistosoma mansoni, and hamsters infected with Opisthorchis viverrini, as well as normal mice and hamsters. In addition, sera from cattle infected with Paramphistomum cervi, Strongylid, Trichuris sp. and Strongyloides sp., as well as sera from normal cattle were also assessed. In experimental mice, the diagnostic sensitivity, specificity, positive predictive value, negative predictive value, false positive rate, false negative rate and accuracy of ELISA were 95%, 100%, 100%, 97.9%, 0%, 5.3% and 98.5%, while in natural cattle they were 96.7%, 100%, 100%, 98.5%, 0%, 3.4% and 98.9%, respectively. Hence, this assay method showed high efficient and precision for early diagnosis of fasciolosis by F. gigantica.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แอนติบอดี monoclonal เชื่อถือได้มากที่สุด (MoAb) -แซนวิชตามลิงค์เอนไซม์ immunosorbent ทดสอบ (แซนวิ ELISA) พัฒนาขึ้นสำหรับการตรวจจับของ cathepsin B3 รติเอส (CatB3) เป็นหนูที่ติดเชื้อราที่ก่อ gigantica สมมติฐานและวัวที่ติดเชื้อปรสิตเดียวกันตามธรรมชาติ การอับ 2F9 และ biotinylated กระต่าย polyclonal ควบรวมกัน CatB3 แอนติบอดีถูกเลือกเนื่องจาก reactivities สูงและจำเพาะกับ antigen CatB3 gigantica F. ELISA และ immunoblotting ทางอ้อม ตรวจจับต่ำของแซนวิทดสอบ ELISA เป็น 10, 100 และ 400 pg/ml เมื่อใช้สำหรับการตรวจหา rCatB3 antigen และ CatB3 ในร่างกาย (WB) ของใหม่ excysted สัตว์ (NEJ) และ metacercariae (Met) ของ F. gigantica ตามลำดับ แซนด์วิชนี้ทดสอบ ELISA สามารถตรวจพบเชื้อ gigantica F. จากโพสต์ 1 ถึง 35 วัน และเปิดเผยว่า หมุนเวียนระดับของ CatB3 peaked ที่ติดเชื้อลง 1 วัน เปรียบ การตรวจหาแอนติบอดี โดย ELISA อ้อมอาจเพียงแสดงระดับแอนติบอดีจาก 35 วันโพสต์ ความน่าเชื่อถือของวิธีการทดสอบเป็นประเมินโดยใช้ตัวอย่างซีรั่มจากติด F. gigantica หรือ Schistosoma mansoni หนูแฮมสเตอร์ที่ติดเชื้อ Opisthorchis viverrini เป็นปกติหนู และแฮมสเตอร์ นอกจากนี้ เป็นกระบือที่ติดเอสพี Trichuris cervi, Strongylid, Paramphistomum และเอสพี Strongyloides ตลอดจนเป็นกระบือปกติถูกยังประเมิน ในหนูทดลอง การวินิจฉัยความไว ความ ทำนายค่าบวก ทำนายค่าลบ อัตราค่าบวกเท็จ เท็จลบราคาและความถูกต้องของ ELISA ได้ 95%, 100%, 100%, 97.9%, 0%, 5.3% และ 98.5% ในระหว่างในธรรมชาติวัว 96.7%, 100%, 100%, 98.5%, 0%, 3.4% และ 98.9% ตามลำดับ ด้วยเหตุนี้ วิธีการทดสอบนี้แสดงให้เห็นที่สูงอย่างมีประสิทธิภาพ และความแม่นยำในการวินิจฉัยการ fasciolosis โดย F. gigantica

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

โมโนโคลนอลแอนติบอดีที่เชื่อถือได้ (โมอับ) -based เอนไซม์ที่เชื่อมโยงการทดสอบอิมมูโนแซนวิช (เอลิซาแซนวิช) ได้รับการพัฒนาสำหรับการตรวจสอบการไหลเวียนของ cathepsin น้ำย่อย B3 (ที่ CatB3) ในซีรั่มจากหนูที่ติดเชื้อทดลองกับ Fasciola gigantica และวัวที่ติดเชื้อตามธรรมชาติที่มีปรสิตเดียวกัน . โมอับ 2F9 และกระต่าย biotinylated โพลี CatB3 แอนติบอดีต่อต้าน recombinant ได้รับการคัดเลือกเนื่องจากการปฏิกิริยาสูงของพวกเขาและไม่เฉพาะเจาะจงที่จะแอนติเจนเอฟ gigantica CatB3 ขึ้นอยู่กับวิธี ELISA ทางอ้อมและ immunoblotting ขีด จำกัด การตรวจสอบการลดลงของการทดสอบ ELISA แซนวิชเป็น 10, 100 และ 400 pg / ml เมื่อนำไปใช้ในการตรวจหาแอนติเจน rCatB3 และ CatB3 ในร่างกาย (WB) ของหนุ่มสาว excysted ใหม่ (nej) และ metacercariae (Met) ของเอฟ gigantica ตามลำดับ ทดสอบ ELISA แซนวิชนี้สามารถตรวจพบการติดเชื้อเอฟ gigantica ตั้งแต่วันที่ 1-35 การติดเชื้อและการโพสต์แสดงให้เห็นว่าระดับการไหลเวียนของ CatB3 แหลมที่วันที่ 1 การติดเชื้อโพสต์ ในทางตรงกันข้ามการตรวจสอบแอนติบอดีโดยวิธี ELISA ทางอ้อมเท่านั้นที่สามารถแสดงให้เห็นถึงระดับแอนติบอดีจากการติดเชื้อ 35 วันที่โพสต์ ความน่าเชื่อถือของวิธีการทดสอบได้รับการประเมินโดยใช้ตัวอย่างซีรั่มจากหนูที่ติดเชื้อเอฟ gigantica หรือ Schistosoma mansoni และหนูแฮมสเตอร์ที่ติดเชื้อ Opisthorchis viverrini เช่นเดียวกับหนูแฮมสเตอร์ปกติและ นอกจากนี้ซีรั่มจากวัวที่ติดเชื้อ Paramphistomum Cervi, strongylids ที่, Trichuris SP และ Strongyloides sp. เช่นเดียวกับซีรั่มจากวัวปกติยังมีการประเมิน ในหนูทดลองความไวในการวินิจฉัยความจำเพาะค่าพยากรณ์บวกค่าพยากรณ์ลบอัตราบวกเท็จอัตราการลบเท็จและความถูกต้องของวิธี ELISA เป็น 95%, 100%, 100%, 97.9%, 0%, 5.3% และ 98.5% ในขณะที่พวกเขาวัวธรรมชาติ 96.7%, 100%, 100%, 98.5%, 0%, 3.4% และ 98.9% ตามลำดับ ดังนั้นวิธีการทดสอบแสดงให้เห็นว่ามีประสิทธิภาพนี้สูงและความแม่นยำในการวินิจฉัยแรกของ fasciolosis โดยเอฟ gigantica

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เชื่อถือได้ โมโนโคลนอลแอนติบอดี ( โม ) - แซนด์วิช enzyme-linked immunosorbent assay ( ELISA โดยใช้แซนวิช ) ถูกพัฒนาขึ้นเพื่อใช้สำหรับการตรวจหาหมุนเวียนคาเทปซิน B3 โปรติเอส ( catb3 ) ในซีรั่มหนูทดลองติดเชื้อขึ้น และปศุสัตว์ตากธรรมชาติติดเชื้อปรสิตเหมือนกัน โมอับไล 2f9 กระต่ายใช้ anti recombinant catb3 แอนติบอดี และได้รับเลือกจากคุณสมบัติสูงของพวกเขาและเพาะให้ นัล catb3 แอนติเจน ELISA และโดยทางอ้อม ) . ขีดจำกัดล่างของแซนวิช ELISA ( 10 , 100 และ 400 pg / ml เมื่อใช้สำหรับการตรวจหาแอนติเจนและ rcatb3 catb3 ในร่างกายทั้งหมด ( WB ) excysted ใหม่และ nej ) และเมตาเซอร์คาเรีย ( พบ 1 ) F ตามลำดับ นี่แซนด์วิช ELISA assay สามารถตรวจหาเชื้อจาก ฉ . 1 วัน 1 ปีหลังการติดเชื้อ และพบว่าระดับของการติดเชื้อ catb3 หมุนเวียน , โพสต์วันที่ 1 ในทางตรงกันข้าม การตรวจหาแอนติบอดีโดยวิธี indirect ELISA สามารถแสดงให้เห็นถึงระดับแอนติบอดีจาก 35 วันหลังการติดเชื้อ ความน่าเชื่อถือของการทดสอบวิธีการทดสอบโดยใช้ตัวอย่างซีรั่มจากหนูติด F . 1 หรือ schistosoma mansoni และแฮมสเตอร์ที่ติดเชื้อ Opisthorchis viverrini เช่นเดียวกับหนูปกติและแฮมสเตอร์ นอกจากนี้ ซีรั่มโคติดเชื้อ paramphistomum cervi strongylid sp . , , trichuris strongyloides sp . และเช่นเดียวกับซีรั่มโคธรรมดายังประเมิน ในหนูทดลอง วิเคราะห์ความไว ความจำเพาะ ค่าพยากรณ์บวก ลบค่าพยากรณ์อัตราบวกเท็จ เท็จลบคะแนน และความถูกต้องของวิธี ELISA 95% , 100% , 100% , 97.9 % , 0 % , 5.3 และร้อยละ 98.5 % ในขณะที่โคธรรมชาติพวกเขา 96.7 , 100% , 100% ร้อยละ 98.5 % , 0 % , 4 % และ 98.9 ตามลำดับ ดังนั้น โดยวิธีนี้มีความแม่นยำและมีประสิทธิภาพสูงสำหรับการวินิจฉัยของพยาธิใบไม้ตับโดย F . 1 .