RESULTSAntioxidant Activities of ME

RESULTS
Antioxidant Activities of MEOA, EEOA and WEOA. The dry
powders of O. aristatus were extracted using different solvents,
including methanol, ethanol and water. The extract solutions
were filtered, dried and diluted.The yields forMEOA,EEOAand
WEOAwere 9.18, 11.3 and 7.72%, respectively (Table 1). Table 1
also shows the total phenolics and antioxidant activity ofMEOA,
EEOA and WEOA. The amounts of total phenolics in MEOA,
EEOA and WEOA were 386, 227, and 69.0 mg/g extract,
respectively. Antioxidant activities of MEOA, EEOA and
WEOA were evaluated by the ORAC, TEAC and CAA assay.
The data indicated that the TEAC values (Trolox equivalent,
mM/g extract) ofMEOA, EEOAandWEOAwere 1.18, 0.85 and
0.72, respectively. The ORAC values (Trolox equivalent, mM/g
extract) of MEOA, EEOA and WEOA were 17.4, 17.0 and
2.66, respectively. The CAA values (quercetin equivalent, mM/
g extract) of MEOA, EEOA and WEOA were 322, 244 and
244, respectively. These data indicated that MEOA had
the higher ORAC, TEAC and CAA values than both EEOA
and WEOA.
Effects of MEOA, EEOA and WEOA on NO and PGE2
Production. Figure 1 shows the effects of MEOA, EEOA and
WEOA on NO production in LPS-stimulated RAW 264.7 cells.
The NO production, measured as nitrite, increased to 38.5 (
0.8 nM when 1 μg/mL of LPS was added compared to 4.82 (
0.4 nMin the control cells without LPS.MEOA (50 μg/mL) and
EEOA (25 μg/mL) inhibited LPS-stimulated NO production
(32.5 ( 0.3 and 28.7 ( 2.0 nM, respective) with no cytotoxicity
to the RAW 264.7 cells (Figure 1A,B and data not shown).
However, WEOA did not affect the NO production in the LPSstimulated
RAW 264.7 cells (Figure 1C). EEOA had higher
inhibition on LPS-stimulated NO production than MEOA.
Therefore, we decided to follow EEOA activity. Figure 2 shows
the effect of EEOA on PGE2 production in the LPS-stimulated
RAW 264.7 cells. EEOA (25 μg/mL) significantly reduced LPSstimulated
PGE2 production (6.35 ( 0.76 ng/mL) in these cells.
Effect of EEOA on Intracellular ROS Production. Intracellular
ROS determination was measured using the fluorescent probe
DCFH-DA. Figure 3 shows the effect of EEOA on intracellular
ROS production in the LPS-stimulated RAW 264.7 cells. Treatment
of these cells with EEOA significantly inhibited the induction
of intracellular ROS generation by LPS.
Determination of Major Compounds in MEOA, EEOA and
WEOA. In the present study, the quantitative determination of
ursolic acid and oleanolic acid in different solvent extracts from
O. aristatus was performed by HPLC. The analytical plots of
ursolic acid and oleanolic acid inMEOA, EEOA andWEOA are
shown in Figure 4. The peaks corresponded to ursolic acid and
oleanolic acidwith the retention time of ursolic acid and oleanolic
acid at 25.3 and 24.2 min, respectively (Figure 4A,B). The results
from the chromatograms indicated that MEOA and EEOA
contained ursolic acid and oleanolic acid as identified by comparison
of their retention time values and UV spectra with those
of known standards (Figure 4C,D). Using a standard curve
of ursolic acid and oleanolic acid, the amounts of ursolic acid
and oleanolic acid in theMEOAwere calculated to be 9.38(0.03
and 4.58 ( 0.01 mg/g extract, respectively (Figure 5). The levels

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ผลลัพธ์กิจกรรมการต้านอนุมูลอิสระของ MEOA, EEOA และ WEOA การซักแห้งผง aristatus โอที่สกัดโดยใช้หรือสารทำละลายต่าง ๆได้แก่เมทานอล เอทานอล และน้ำ โซลูชั่นสารสกัดจากถูกกรอง แห้ง และแตกออก ผลผลิต forMEOA, EEOAand9.18 WEOAwere, 11.3 และ 7.72% ตามลำดับ (ตารางที่ 1) ตารางที่ 1แสดง phenolics รวมและสารต้านอนุมูลอิสระกิจกรรม ofMEOAEEOA และ WEOA จำนวนรวม phenolics ใน MEOAEEOA และ WEOA ได้ 386, 227 และสารสกัด จาก 69.0 mg/gตามลำดับ กิจกรรมการต้านอนุมูลอิสระของ MEOA, EEOA และWEOA ถูกประเมิน โดยการทดสอบ ORAC, TEAC และซีเอเอโฮข้อมูลที่ระบุว่า ที่ TEAC ค่า (Trolox เทียบเท่ามม./g สารสกัด) ofMEOA, EEOAandWEOAwere 1.18, 0.85 และ0.72 ตามลำดับ ค่า ORAC (Trolox เทียบเท่า mM/gการดึงข้อมูล) MEOA, EEOA และ WEOA ได้ 17.4, 17.0 และ2.66 ตามลำดับ ค่าซีเอเอโฮ (quercetin เท่า mM /สารสกัดจาก g) MEOA, EEOA และ WEOA มี 322, 244 และ244 ตามลำดับ ข้อมูลเหล่านี้บ่งชี้ว่า มี MEOAสูงกว่า ORAC, TEAC และซีเอเอโฮค่ากว่า EEOA ทั้งสองและ WEOAผลของ MEOA, EEOA และ WEOA ไม่มี PGE2 และการผลิต รูปที่ 1 แสดงผลของ MEOA, EEOA และWEOA บนไม่ผลิตในเซลล์ถูกกระตุ้น LPS RAW 264.7การผลิต ไม่มีวัดเป็นไนไตรต์ เพิ่มขึ้น 38.5 (0.8 nM เมื่อ μg 1 mL ของ LPS เพิ่มเมื่อเปรียบเทียบกับ 4.82 (0.4 nMin ตัวควบคุมเซลล์ โดย LPS MEOA (50 μg/mL) และEEOA (25 μg/mL) ห้ามไม่ถูกกระตุ้น LPS ผลิต(32.5 (0.3 และ 28.7 (2.0 nM ตามลำดับ) กับ cytotoxicity ไม่เซลล์ RAW 264.7 (รูปที่ 1A, B และข้อมูลที่ไม่แสดง)อย่างไรก็ตาม WEOA ไม่มีผลต่อการผลิตไม่มีใน LPSstimulatedRAW 264.7 เซลล์ (รูปที่ 1C) EEOA ได้สูงขึ้นยับยั้งการบนไม่ถูกกระตุ้น LPS ผลิตมากกว่า MEOAดังนั้น เราตัดสินใจทำตามกิจกรรม EEOA รูปที่ 2 แสดงผลของ EEOA การผลิต PGE2 ในตัว LPS-ถูกกระตุ้นRAW 264.7 เซลล์ EEOA LPSstimulated ที่ลดลงอย่างมีนัยสำคัญของ (25 μg/mL)ผลิต PGE2 (6.35 (0.76 ng/mL) ในเซลล์เหล่านี้ผลของ EEOA ในการผลิต Intracellular ROS Intracellularกำหนด ROS ถูกวัดโดยใช้โพรบเรืองแสงDCFH-DA. รูปที่ 3 แสดงผลของ EEOA ใน intracellularผลิต ROS ในเซลล์ถูกกระตุ้น LPS RAW 264.7 รักษาเซลล์เหล่านี้กับ EEOA อย่างมีนัยสำคัญห้ามการเหนี่ยวนำของรุ่น ROS intracellular โดย LPSเรื่องของสารสำคัญ MEOA, EEOA และWEOA ในการศึกษาปัจจุบัน กำหนดการเชิงปริมาณกรด ursolic และ oleanolic กรดในสารสกัดจากตัวทำละลายที่แตกต่างจากโอ aristatus ที่ดำเนินการ โดย HPLC โครงการวิเคราะห์ของมี ursolic กรดและ oleanolic กรด inMEOA, EEOA andWEOAแสดงในรูปที่ 4 แห่ง corresponded การ ursolic กรด และacidwith oleanolic เวลารักษากรด ursolic และ oleanolicกรดที่ 25.3 และ 24.2 นาที ตามลำดับ (รูปที่ 4A, B) ผลลัพธ์จาก chromatograms ระบุไว้ที่ MEOA และ EEOAประกอบด้วยกรด ursolic และ oleanolic กรดตามที่ระบุโดยการเปรียบเทียบของแรมสเป็คตรา UV กับค่าเวลาที่เก็บข้อมูลมาตรฐานชื่อดัง (รูปที่ 4C, D) ใช้เส้นโค้งมาตรฐานกรด ursolic และ oleanolic กรด จำนวนกรด ursolicและ oleanolic กรด theMEOAwere ที่คำนวณได้เท่ากับ 9.38 (0.03และ 4.58 (0.01 mg/g แยก ตามลำดับ (รูปที่ 5) ระดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ผล
ของสารต้านอนุมูลอิสระกิจกรรม MEOA, EEOA และ WEOA แห้ง
ผงของ aristatus ทุมถูกสกัดโดยใช้ตัวทำละลายที่แตกต่างกัน
รวมทั้งเอทานอลเมทานอลและน้ำ การแก้ปัญหาสารสกัด
ถูกกรองแห้งและผลตอบแทนถัวเฉลี่ย diluted.The forMEOA, EEOAand
WEOAwere 9.18, 11.3 และ 7.72% ตามลำดับ (ตารางที่ 1) ตารางที่ 1
ยังแสดงให้เห็นฟีนอลรวมและสารต้านอนุมูลอิสระ ofMEOA,
EEOA และ WEOA ปริมาณของฟีนอลรวมใน MEOA,
EEOA และ WEOA เป็น 386, 227 และ 69.0 มิลลิกรัม / กรัมสารสกัด
ตามลำดับ กิจกรรมของสารต้านอนุมูลอิสระ MEOA, EEOA และ
WEOA ได้รับการประเมินโดย ORAC, TEAC และทดสอบ CAA.
ข้อมูลที่ชี้ให้เห็นว่าค่า TEAC (เทียบเท่า Trolox,
มิลลิ / g สารสกัด) ofMEOA, EEOAandWEOAwere 1.18, 0.85 และ
0.72 ตามลำดับ ค่า ORAC (เทียบเท่า Trolox, มิลลิ / g
สารสกัด) ของ MEOA, EEOA และ WEOA เป็น 17.4, 17.0 และ
2.66 ตามลำดับ ค่าซีเอ (เทียบเท่า quercetin, มิลลิ /
กรัมสารสกัด) ของ MEOA, EEOA และ WEOA เป็น 322, 244 และ
244 ตามลำดับ ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า MEOA มี
ORAC สูง, TEAC และค่า CAA กว่าทั้ง EEOA
และ WEOA.
ผลของการ MEOA, EEOA และ WEOA ใน NO PGE2 และ
การผลิต รูปที่ 1 แสดงให้เห็นถึงผลกระทบของการ MEOA, EEOA และ
WEOA ไม่เกี่ยวกับการผลิตใน LPS กระตุ้นเซลล์ RAW 264.7.
การผลิตไม่มีวัดเป็นไนไตรท์เพิ่มขึ้นถึง 38.5 (
0.8 นาโนเมตรเมื่อ 1 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร LPS ถูกเพิ่มเมื่อเทียบกับ 4.82 (
0.4 nMin เซลล์โดยไม่ต้องควบคุม LPS.MEOA (50 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) และ
EEOA (25 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) ยับยั้ง LPS กระตุ้นการผลิต NO
(32.5 (0.3 และ 28.7 (2.0 นาโนเมตรตามลำดับ) โดยมีพิษไม่มี
การ RAW 264.7 เซลล์ (รูปที่ 1A, B และไม่ได้แสดงข้อมูล).
อย่างไรก็ตาม WEOA ไม่ได้ส่งผลกระทบต่อการผลิตใน NO LPSstimulated
RAW 264.7 เซลล์ (รูปที่ 1C). EEOA มีสูง
ในการยับยั้ง LPS กระตุ้นการผลิต NO กว่า MEOA.
ดังนั้นเราจึงตัดสินใจที่จะทำตามกิจกรรม EEOA . รูปที่ 2 แสดงให้เห็นถึง
ผลกระทบของการผลิต EEOA PGE2 ใน LPS กระตุ้น
เซลล์ RAW 264.7. EEOA (25 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) ลดลงอย่างมีนัยสำคัญ LPSstimulated
ผลิต PGE2 (6.35 (0.76 นาโนกรัม / มิลลิลิตร) ในเซลล์เหล่านี้.
ผลของ EEOA ใน ROS ภายในเซลล์ การผลิต. ภายในเซลล์
มุ่งมั่น ROS ถูกวัดโดยใช้หัววัดเรืองแสง
DCFH-DA. รูปที่ 3 แสดงให้เห็นถึงผลกระทบของการ EEOA ในเซลล์
ผลิตอนุมูลอิสระใน LPS กระตุ้น RAW 264.7 เซลล์ การรักษา
ของเซลล์เหล่านี้อย่างมีนัยสำคัญกับ EEOA ยับยั้งการเหนี่ยวนำ
ของคนรุ่น ROS ภายในเซลล์โดย LPS.
การกำหนดเมเจอร์สารประกอบใน MEOA, EEOA และ
WEOA ในการศึกษาปัจจุบันหาปริมาณของ
กรด ursolic และกรด oleanolic ในสารสกัดด้วยตัวทำละลายที่แตกต่างจาก
ทุม aristatus ได้ดำเนินการโดยวิธี HPLC แปลงวิเคราะห์ของ
กรด ursolic และกรด oleanolic inMEOA, EEOA andWEOA จะ
แสดงให้เห็นในรูปที่ 4 ยอดตรงกับ ursolic กรด
oleanolic acidwith เวลาการเก็บรักษาของกรด ursolic oleanolic และ
กรดที่ 25.3 และ 24.2 นาทีตามลำดับ (รูปที่ 4A, B) . ผล
จากการวิจัยพบว่า chromatograms MEOA และ EEOA
มีกรด ursolic และกรด oleanolic ที่ระบุไว้โดยเปรียบเทียบ
ของค่าเวลาการเก็บรักษาของพวกเขาและสเปกตรัมรังสียูวีกับบรรดา
ของมาตรฐานที่รู้จักกัน (รูป 4C, D) การใช้กราฟมาตรฐาน
ของกรด ursolic และกรด oleanolic ปริมาณของกรด ursolic
และกรด oleanolic theMEOAwere ในการคำนวณให้เป็น 9.38 (0.03
และ 4.58 (0.01 มิลลิกรัม / กรัมสารสกัดตามลำดับ (รูปที่ 5). ระดับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ผลลัพธ์
กิจกรรมต้านออกซิเดชันของ meoa หนาเตอะเลือก weoa , และ . ผงแห้งของ O .
aristatus สกัดโดยใช้ตัวทำละลายที่แตกต่างกัน
รวมทั้งเมทานอล , เอทานอลและน้ำ สารสกัดจากโซลูชั่น
เป็นกรองแห้งและเจือจาง ผลผลิต formeoa eeoaand
, R weoawere 9.18 , 11.3 เปอร์เซ็นต์ ตามลำดับ ( ตารางที่ 1 ) ตารางที่ 1 แสดงผล
ยังรวมและฤทธิ์ต้าน ofmeoa
หนาเตอะเลือก weoa , และ .ปริมาณของปริมาณ total phenolics ใน meoa
หนาเตอะเลือก weoa , และจำนวน 386 227 , 69.0 มิลลิกรัม / กรัมและสารสกัด
ตามลำดับ กิจกรรมต้านออกซิเดชันของ meoa หนาเตอะเลือก
weoa , และประเมินโดยวิธี ORAC , Teac และ caa .
ข้อมูลพบว่า Teac ค่า ( สารเทียบเท่า
มม. / กรัมสารสกัด ofmeoa eeoaandweoawere 1.18 ,
, 0.85 และ 0.72 ตามลำดับ ซึ่งค่า ORAC ( เทียบเท่าสารมม. / G
meoa สกัด ) ,และถูกขับไล่ weoa หนาเตอะเลือก ,
2.66 และ 17.0 ตามลำดับ การ caa ค่า ( quercetin เทียบเท่ามิลลิเมตร /
g สารสกัดจาก meoa หนาเตอะเลือก weoa , และจำนวน 322 , 244 และ
244 ) ข้อมูลเหล่านี้ชี้ให้เห็นว่า meoa มี
ที่สูงขึ้นและค่า ORAC , Teac caa กว่า และ weoa หนาเตอะเลือก
.
ผลของ meoa หนาเตอะเลือก weoa , และบนไม่และ pge2
ผลิต รูปที่ 1 แสดงให้เห็นผลกระทบของ meoa หนาเตอะเลือกและ
,weoa ไม่มีการผลิตหล่อลื่นกระตุ้นดิบ
264.7 เซลล์ ไม่มีการผลิต วัดเป็นไนไตรท์ เพิ่มขึ้นเป็น 38.5 (
1 nm เมื่อ 1 μ g / ml สเปรย์เพิ่มเมื่อเทียบกับ 0.4 4.82 (
nmin ควบคุมเซลล์โดยไม่ lps.meoa ( 50 μกรัม / มิลลิลิตร ) และ
หนาเตอะเลือก ( 25 μกรัมต่อลิตร มิลลิลิตร ) ยับยั้ง LPS กระตุ้นไม่มีการผลิต
( 32.5 ( 0.3 และ 28.7 ( 2.0 นาโนเมตรตามลำดับ ) ไม่มีความเป็นพิษต่อเซลล์ 264.7
กับดิบ ( รูปที่ 1A ,B และข้อมูลไม่แสดง ) .
แต่ weoa ไม่มีผลต่อไม่มีการผลิตใน lpsstimulated
ดิบ 264.7 เซลล์ ( รูปที่ 1C ) หนาเตอะเลือกสูงกว่า
ยับยั้ง LPS กระตุ้นในการผลิตกว่าไม่ meoa .
ดังนั้นเราจึงตัดสินใจที่จะติดตามกิจกรรมหนาเตอะเลือก . รูปที่ 2 แสดงผลของ pge2
หนาเตอะเลือกในการผลิตในหล่อลื่นกระตุ้น
ดิบ 264.7 เซลล์ หนาเตอะเลือก ( 25 μ g / ml ) ช่วยลด lpsstimulated
pge2 การผลิต ( 6.35 ( 0.76 ng / ml ) ในเซลล์เหล่านี้ ผลของการผลิต ROS หนาเตอะเลือกเซลล์ การกำหนดผลตอบแทนวัดใช้

dcfh-da โพรบเรืองแสง รูปที่ 3 แสดงให้เห็นถึงผลกระทบของการผลิตเซลล์หนาเตอะเลือกผลตอบแทน
ในสเปรย์ดิบ 264.7 กระตุ้นเซลล์ การรักษา
ของเซลล์เหล่านี้กับหนาเตอะเลือกมีผลในการยับยั้งการสร้างเซลล์ โดยผลตอบแทน
หล่อลื่น .การวิเคราะห์สารประกอบหลักใน meoa

weoa หนาเตอะเลือก , และ . ในการศึกษา , การวิเคราะห์ปริมาณกรดและกรดใน ursolic
oleanolic สกัดตัวทำละลายแตกต่างจาก
O aristatus โดยใช้ HPLC . แปลงวิเคราะห์กรดและกรด inmeoa oleanolic ursolic
,
andweoa หนาเตอะเลือกจะแสดงในรูปที่ 4 ยอดของ ursolic
และกรดoleanolic acidwith ในเวลาของกรดและกรด ursolic oleanolic
ที่ 1 และ 24.2 นาที ตามลำดับ ( รูปที่ 4 , B ) ผลการวิจัยพบว่า meoa
จากกลิ่นและ ursolic หนาเตอะเลือก
มีกรดและกรด oleanolic ระบุการเปรียบเทียบค่าเวลาคงค้างของพวกเขา

และ UV Spectra กับมาตรฐานที่รู้จักกัน ( รูปที่ 4C , D ) ใช้
เส้นโค้งมาตรฐานกรดและกรด ursolic oleanolic ปริมาณกรดและกรดใน oleanolic
ursolic themeoawere คำนวณเป็น 9.38 ( 0.03
และ 4.58 ( 0.01 มิลลิกรัม / กรัม สกัด ตามลำดับ ( รูปที่ 5 ) ระดับ