In this paper, we report the surface assembly of a functional minicellulosome by using a synthetic yeast
consortium. The basic design of the consortium consisted of four different engineered yeast strains capable of
either displaying a trifunctional scaffoldin, Scaf-ctf (SC), carrying three divergent cohesin domains from
Clostridium thermocellum (t), Clostridium cellulolyticum (c), and Ruminococcus flavefaciens (f), or secreting one of
the three corresponding dockerin-tagged cellulases (endoglucanase [AT], exoglucanase [EC/CB], or -glucosidase
[BF]). The secreted cellulases were docked onto the displayed Scaf-ctf in a highly organized manner
based on the specific interaction of the three cohesin-dockerin pairs employed, resulting in the assembly of a
functional minicellulosome on the yeast surface. By exploiting the modular nature of each population to
provide a unique building block for the minicellulosome structure, the overall cellulosome assembly, cellulose
hydrolysis, and ethanol production were easily fine-tuned by adjusting the ratio of different populations in the
consortium. The optimized consortium consisted of a SC:AT:CB:BF ratio of 7:2:4:2 and produced almost twice
the level of ethanol (1.87 g/liter) as a consortium with an equal ratio of the different populations. The final
ethanol yield of 0.475 g of ethanol/g of cellulose consumed also corresponded to 93% of the theoretical value.
This result confirms the use of a synthetic biology approach for the synergistic saccharification and fermentation
of cellulose to ethanol by using a yeast consortium displaying a functional minicellulosome.
ในเอกสารนี้ เรารายงานประกอบพื้นผิวของ minicellulosome ที่ทำงาน โดยใช้ยีสต์ที่สังเคราะห์กิจการร่วมค้า การออกแบบพื้นฐานของกิจการร่วมค้าประกอบด้วยสี่ต่าง ๆ ออกแบบยีสต์สามารถแสดงโดย trifunctional scaffoldin, Scaf-ctf (SC), ขันติธรรม cohesin โดเมนที่สามจากการถือครองเชื้อ clostridium thermocellum (t), เชื้อ Clostridium cellulolyticum (c), และ Ruminococcus flavefaciens (f), หรือหนึ่ง secretingสามตรงแท็ก dockerin cellulases (endoglucanase [AT], exoglucanase [EC CB], หรือ - glucosidase[เอฟ]) Secreted cellulases ถูกย้ายไปแสดง Scaf ctf ในลักษณะที่เป็นระเบียบสูงขึ้นอยู่กับการโต้ตอบเฉพาะของสาม cohesin dockerin คู่จ้าง ในแอสเซมบลีของตัวminicellulosome ทำงานบนพื้นผิวของยีสต์ โดย exploiting ลักษณะโมดุลของประชากรแต่ละให้กลุ่มอาคารเฉพาะโครงสร้าง minicellulosome แอสเซมบลี cellulosome โดยรวม เซลลูโลสไฮโตรไลซ์ และการผลิตเอทานอลได้ง่าย ๆ ปรับแต่ง โดยการปรับอัตราส่วนของประชากรแตกต่างกันในการกิจการร่วมค้า กิจการร่วมค้าเพิ่มประสิทธิภาพประกอบด้วย SC:AT:CB:BF อัตราส่วนของ 7:2:4:2 และผลิตเกือบสองระดับของเอทานอล (1.87 กรัม/ลิตร) เป็นองค์กร ด้วยอัตราส่วนเท่ากันของประชากรแตกต่างกัน สุดท้ายผลผลิตเอทานอลของ 0.475 ของเอทานอ ล/g ของเซลลูโลสที่ใช้ยัง corresponded 93% ของมูลค่าตามทฤษฎีผลลัพธ์นี้ยืนยันใช้วิธีชีววิทยาสังเคราะห์ saccharification พลังและหมักของเซลลูโลสเพื่อเอทานอลโดยใช้ยีสต์องค์กรแสดง minicellulosome ทำงาน
การแปล กรุณารอสักครู่..
