2.6. Measurement of total phenol, H

2.6. Measurement of total phenol, H2O2 content and DPPH radicalscavenging
activity
Total phenolic content was determined using the modified Folin–
Ciocalteu procedure described by Slinkard and Singleton (1977).
Samples (1 g) were homogenized in 5 ml of 80% cold acetone and
centrifuged at 10,000 g for 20 min; the supernatant was used for analysis.
The result was expressed as milligrams of gallic acid equivalent
(GAE) per 100 g of fresh weight.
H2O2 content was determined using a method based on titanium
oxidation described by Patterson et al. (1984). Frozen tissue (2 g)
was ground and homogenized with 5 mL of chilled 100% acetone
and then centrifuged at 10,000 g for 20 min at 4 °C. Absorbance of
the supernatant was measured at 412 nm. Absorbance values were
calibrated against a standard curve (generated using known concentrations
of H2O2) and expressed as μmol g−1 FW.
DPPH radical-scavenging activity was estimated using the method of
Larrauri et al. (1998). Half a gram of frozen sample was extracted with
50% ethanol and centrifuged at 10,000 g for20 minat 4 °C.Anethanolic
solution of DPPHserved as control. The DPPH radical-scavenging activity
was calculated according to the following formula:
DPPH radical scavenging activity ð%Þ
¼ 1−ðabsorbance of sample=absorbance of control Þ  100%:
2.7. Analysis of defense-related gene expression by RT-PCR
RT-PCR was used to analyze the expression patterns of the defenserelated
gene nonexpresser of PR gene (NPR1-like), pathogenesis-related
(PR-like), chitinase (CHI), β-1,3-glucanase (GNS), Phenylalanine ammonia
lyase (PAL), lipoxygenase (LOX1) and catalase (CAT1) in peach fruit inoculated
only with distilled water (Mock), R. stolonifer or B. subtilis
SM21, and in those both treated with B. subtilis SM21 and inoculated

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.6 การวัดวางรวม H2O2 เนื้อหา และ DPPH radicalscavenging
กิจกรรม
เนื้อหารวมฟีนอกำหนดใช้การปรับเปลี่ยน Folin-
Ciocalteu กระบวนงานที่อธิบายไว้ โดย Slinkard และซิงเกิลตัน (1977) .
ตัวอย่าง (1 g) ถูก homogenized เป็นกลุ่มใน 5 ml ของอะซีโตนเย็น 80% และ
centrifuged ที่ g 10000 สำหรับ 20 นาที supernatant ที่ใช้สำหรับวิเคราะห์
ผลลัพธ์ถูกแสดงเป็น milligrams กรด gallic equivalent
(GAE) ต่อ 100 กรัมของน้ำหนักสด.
H2O2 เนื้อหาถูกกำหนดโดยใช้วิธีตามไทเทเนียม
ออกซิเดชันที่อธิบายโดย Patterson et al. (1984) แช่แข็งเนื้อเยื่อ (2 g)
ถูกพื้น และ homogenized เป็นกลุ่ม ด้วย 5 mL ของอะซีโตน 100% เย็น
แล้ว centrifuged ที่ g 10000 สำหรับ 20 นาทีที่ 4 องศาเซลเซียส Absorbance ของ
supernatant ถูกวัดที่ 412 nm ค่า absorbance ได้
ปรับเทียบกับเส้นโค้งมาตรฐาน (โดยความเข้มข้นรู้จัก
ของ H2O2) และแสดงเป็น μmol g−1 FW.
DPPH scavenging รัศมีกิจกรรมถูกประเมินโดยใช้วิธีการ
Larrauri et al. (1998) ครึ่งกรัมของตัวอย่างน้ำแข็งถูกสกัดด้วย
50% เอทานอล และ centrifuged ที่ 10000 g for20 minat 4 องศาเซลเซียสAnethanolic
ของ DPPHserved เป็นตัวควบคุม กิจกรรม scavenging อนุมูล DPPH
ถูกคำนวณตามสูตรต่อไปนี้:
DPPH รุนแรง scavenging กิจกรรมð%Þ
1−ðabsorbance ¼ของตัวอย่าง = absorbance ควบคุมÞ 100%:
2.7 การวิเคราะห์ที่เกี่ยวข้องกับการป้องกันยีนโดย RT-PCR
RT-PCR ถูกใช้ในการวิเคราะห์รูปแบบนิพจน์ของการ defenserelated
nonexpresser ยีนของ PR ยีน (NPR1-เหมือน), pathogenesis-related
(PR-like) chitinase (ชี), β-1,3-คัด (GNS), แอมโมเนีย Phenylalanine
lyase (PAL), lipoxygenase (LOX1) และ catalase (CAT1) ในผลไม้พีช inoculated
ด้วยกลั่นน้ำ (Mock), R. stolonifer หรือ subtilis เกิด
SM21 และเหล่านั้นทั้งรับ subtilis เกิด SM21 และ inoculated

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.6 วัดฟีนอลรวมเนื้อหา H2O2 และ radicalscavenging DPPH
กิจกรรม
เนื้อหาฟีนอลทั้งหมดถูกกำหนดโดยใช้การแก้ไข Folin-
Ciocalteu ขั้นตอนการอธิบายโดย Slinkard และโทน (1977)
ตัวอย่าง (1 กรัม) ปั่น 5 มล. 80% อะซีโตนเย็นและ
ปั่นที่ 10,000 กรัมเป็นเวลา 20 นาที; สารละลายที่ใช้สำหรับการวิเคราะห์
ผลที่ได้คือการแสดงเป็นมิลลิกรัมเทียบเท่าฝรั่งเศสกรด
(GAE) ต่อ 100 กรัมของน้ำหนักสด
เนื้อหา H2O2 ถูกกำหนดโดยใช้วิธีการขึ้นอยู่กับไทเทเนียม
ออกซิเดชันอธิบายโดยแพตเตอร์สันและอัล (1984) เนื้อเยื่อแช่แข็ง (2 กรัม)
เป็นพื้นดินและหดหาย 5 มิลลิลิตรแช่เย็นอะซิโตน 100%
แล้วหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 กรัมเป็นเวลา 20 นาทีที่ 4 ° C. การดูดกลืนแสงของ
สารละลายวัดที่ 412 นาโนเมตร ค่าการดูดกลืนแสงที่ถูก
สอบเทียบกับกราฟมาตรฐาน (สร้างขึ้นโดยใช้ความเข้มข้นที่รู้จัก
ของ H2O2) และแสดงเป็นไมโครโมลกรัม-1 FW
DPPH กิจกรรมหัวรุนแรงไล่เป็นที่คาดกันโดยใช้วิธีการของ
Larrauri ตอัล (1998) ครึ่งหนึ่งของกลุ่มตัวอย่างกรัมแช่แข็งได้รับการสกัดด้วย
เอทานอล 50% และหมุนเหวี่ยงที่ 10,000 กรัม for20 minat 4 ° C.Anethanolic
แก้ DPPHserved การควบคุม DPPH กิจกรรมหัวรุนแรงไล่
ที่คำนวณตามสูตรต่อไปนี้
DPPH กิจกรรมอนุมูลอิสระð% Þ
¼ 1-ðabsorbanceตัวอย่าง = การดูดกลืนแสงของÞควบคุม 100%:
2.7 การวิเคราะห์ของการป้องกันที่เกี่ยวข้องกับการแสดงออกของยีนโดย RT-PCR
RT-PCR ถูกใช้ในการวิเคราะห์รูปแบบการแสดงออกของ defenserelated
nonexpresser ยีนของยีน PR (NPR1 เหมือน) ทำให้เกิดโรคที่เกี่ยวข้องกับ
(PR เหมือน), ไคติเนส (CHI) β -1,3-glucanase (GNS) Phenylalanine แอมโมเนีย
อร์เมต (PAL) lipoxygenase (LOX1) และ catalase (CAT1) ในผลไม้ลูกพีชเชื้อ
เฉพาะกับน้ำกลั่น (จำลอง), R. stolonifer หรือ B. subtilis
SM21 และในหมู่คน ทั้งสองได้รับการรักษาด้วย B. subtilis SM21 และเชื้อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.6 การวัดของฟีนอลรวม เนื้อหาและกิจกรรม dpph H2O2 radicalscavenging

รวมฟีโนลิก เนื้อหาการพิจารณาแก้ไข folin –
ciocalteu ขั้นตอนและอธิบายโดย slinkard ซิงเกิลตัน ( 1977 ) .
ตัวอย่าง ( 1 กรัม ) เป็นโฮโม 5 ml 80% และไอเย็นที่ระดับ 10 , 000 G
ที่ 20 นาที ; นำ คือ ใช้สำหรับการวิเคราะห์ .
ผลที่ได้แสดงเป็นมิลลิกรัมของกรดแกลลิคเทียบเท่า
( เก ) ต่อน้ำหนักสด 100 กรัม เนื้อหา
H2O2 ใช้วิเคราะห์วิธีการขึ้นอยู่กับไทเทเนียม
ออกซิเดชันที่อธิบายโดยแพต et al . ( 1984 ) เนื้อเยื่อแช่แข็ง ( 2 กรัม )
คือพื้นดิน และโฮโมกับ 5 ml แช่เย็น 100% อะซิโตน
แล้วระดับ 10 , 000 G สำหรับ 20 นาทีที่ 4 ° C ค่า
น่านวัดที่ 412 นาโนเมตรการดูดกลืนแสงเท่ากับ
เทียบกับกราฟมาตรฐาน ( สร้างโดยใช้ความเข้มข้นของรู้จัก
H2O2 ) และแสดงเป็นμ mol − 1 G FW .
dpph หัวรุนแรงกิจกรรมการประมาณโดยใช้วิธี
larrauri et al . ( 1998 ) ครึ่งกรัมแช่แข็งตัวอย่างถูกสกัดด้วยเอธานอล 50%
ไฟฟ้า 10 , 000 G for20 minat 4 ° c.anethanolic
แก้ไข dpphserved เป็นควบคุมที่เป็นตัวเร่งปฏิกิริยา dpph กิจกรรม
คำนวณตามสูตรต่อไปนี้ :
dpph เป็นตัวเร่งปฏิกิริยากิจกรรมð % Þ
¼ 1 −ðการดูดกลืนแสงของตัวอย่าง = ค่าควบคุมÞ  100% :
2.7 . การวิเคราะห์การแสดงออกของยีนที่เกี่ยวข้องกับการป้องกันโดยวิธี RT-PCR )
RT-PCR วิเคราะห์การแสดงออกของยีนแบบ defenserelated
nonexpresser ยีน PR ( npr1 ชอบ ) ซึ่งเกี่ยวข้องกับ
( PR เหมือน )ไค ( ไค ) , บีตา - 1 ( GNS ) ฟีนิลอะลานีนแอมโมเนีย
lyase ( PAL ) ภาค ( lox1 ) และคะตะเลส ( cat1 ) ในผลไม้พืช หัวเชื้อ
ด้วยน้ำกลั่น ( เยาะเย้ย ) , R stolonifer หรือ B . subtilis
sm21 และทั้งรักษาและ sm21 เชื้อ B . subtilis