transformed into E. coli BL21 (DE3)

transformed into E. coli BL21 (DE3). Protein expression was
induced by administering 0.5 mmol/L of isopropyl-b-D-thiogalactopyranoside.
His-recombinant proteins were then
purified using Ni2þ-charged sepharose according to the
manufacturer’s instructions (Amersham plc, Amersham,
UK). The His-recombinant proteins were eluted using an
elution buffer (20 mmol/L of sodium phosphate, 500 mmol/
L of NaCl, and 500 mmol/L of imidazole). The samples were
massively dialyzed against the elution buffer without
imidazole and then into phosphate-buffered saline (PBS; pH
7.4) to reduce the salt concentrations.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เปลี่ยนเป็น E. coli BL21 (DE3) โปรตีนนิพจน์ได้เกิดจากการจัดการ 0.5 mmol/L ของ isopropyl-b-D-thiogalactopyranosideวททชพระโปรตีนถูกแล้วบริสุทธิ์ใช้ sepharose คิด Ni2þ ตามคำแนะนำของผู้ผลิต (Amersham plc, Amershamสหราชอาณาจักร) โปรตีนวททชพระถูก eluted โดยใช้การelution บัฟเฟอร์ (20 mmol/L ของโซเดียมฟอสเฟต 500 mmol /ลิตรของ NaCl และ 500 mmol/L ของอิมิดาโซล) ตัวอย่างดีdialyzed กับบัฟเฟอร์ elution โดยอย่างหนาแน่นอิมิดาโซลและ เป็น buffered ฟอสเฟตน้ำเกลือ (PBS ค่า pH แล้ว7.4) เพื่อลดความเข้มข้นเกลือ

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กลายเป็นเชื้อ E. coli BL21 (DE3) การแสดงออกของโปรตีนที่ถูก
เหนี่ยวนำโดยการบริหาร 0.5 mmol / L ของไอโซโพรพิ-BD-thiogalactopyranoside.
โปรตีนของเขา-recombinant จากนั้นก็
บริสุทธิ์โดยใช้ Sepharose Ni2þชาร์จตาม
คำแนะนำของผู้ผลิต (Amersham plc, Amersham,
สหราชอาณาจักร) โปรตีนของเขา-recombinant ถูกชะใช้
บัฟเฟอร์ชะ (20 mmol / L ของโซเดียมฟอสเฟต 500 mmol /
L ของโซเดียมคลอไรด์, และ 500 มิลลิโมล / ลิตร imidazole) ตัวอย่าง
dialyzed อย่างหนาแน่นกับบัฟเฟอร์ชะโดยไม่ต้อง
imidazole แล้วเข้าไปสารละลายฟอสเฟตบัฟเฟอร์ (พีบีเอส; ค่า pH
7.4) เพื่อลดความเข้มข้นของเกลือ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

แปลงเป็น E . coli BL21 ( DE3 ) การแสดงออกของโปรตีนคือ
เกิดจากการบริหาร 0.5 มิลลิโมล / ลิตรของ isopropyl-b-d-thiogalactopyranoside .
โปรตีน recombinant ของเขาแล้ว
บริสุทธิ์ใช้ ni2 þ - ค่าบริการเกี่ยวข้องตามคําแนะนําของผู้ผลิต (

) ชาม ชาม , , UK ) รีคอมบิแนนท์โปรตีนของเขาคือตัวอย่างการใช้บัฟเฟอร์ (
20 mmol / L โซเดียมฟอสเฟต 500 มิลลิโมล /
ผมเกลือและ 500 มิลลิโมล / ลิตรอิมิดาโซล ) จำนวนมากมายก่ายกองกับบัฟเฟอร์ซิ

( ไม่มีอิมิดาโซล แล้วเข้าไปในเกลือฟอสเฟต ( PBS ; M
7.4 ) เพื่อลดความเข้มข้นของเกลือ .