Specimens were then treated for 90 min at room temperature in a blocking solution consisting of 0.3% Triton X-100 and 3% skim milk in 0.01 M PBS. The sections were labelled using a primary rabbit antibody to CGRP (Chemicon, Temecula, CA, USA) diluted to 1:1000 in blocking solution, then incubated for 20 h at 4 8C. To detect CGRP immunoreactivity in DRG, sections were incubated with goat anti-rabbit Alexa Fluor 488 fluorescent antibody conjugate (1:400; Molecular Probes, Eugene, OR, USA).
ตัวอย่างที่ได้รับการรักษาแล้ว 90 นาทีที่อุณหภูมิห้องในการแก้ปัญหาการปิดกั้นประกอบด้วย 0.3% Triton X-100 และ 3% นมพร่องมันเนยใน 0.01 M พีบีเอส ส่วนที่ถูกระบุโดยใช้แอนติบอดีกระต่ายหลักเพื่อ CGRP (Chemicon, Temecula, CA, USA) ลดลงเหลือ 1: 1000 ในการแก้ปัญหาการปิดกั้นการบ่มแล้วเป็นเวลา 20 ชั่วโมงที่ 4 8C เพื่อตรวจหาภูมิคุ้มกันใน CGRP DRG ส่วนถูกบ่มกับแพะป้องกันกระต่าย Alexa Fluor 488 ผันแอนติบอดีเรืองแสง (1: 400; วัดระดับโมเลกุล, Eugene, OR, สหรัฐอเมริกา)
การแปล กรุณารอสักครู่..
