Biological materialThe susceptible Hevea brasiliensis clone PB260, from theCIRAD collection in Montpellier (France), was used for monitoringthe toxicity of the purification fractions.The C. cassiicola pathogenic strain CCP was collected oninfected hevea leaves from Philippines and purified by singleconidiumisolation. The isolate was maintained in the darkon Potato Dextrose Agar (PDA) medium at 25 ◦C. For longterm conservation, mycelial plugs were kept in sterile water,in the dark, at room temperature. For toxin production, a liquidculture was set up in 500 ml flasks, by inoculating 100 mlof modified Czapeck medium (Saccharose 30 g l−1, 2.2 g l−1 lglutamicacid, K2HPO4 1 g l−1, KCl 0.5 g l−1, MgSO4·7H2O0.5 g l−1, 36M FeSO4·7H2O, 35M ZnSO4·7H2O, 40MCuSO4·5H2O, pH being around 4 before sterilization) with 3mycelial plugs (5mm diameter) from a 7-days-old culture onPDA medium. The liquid culture was incubated without agitationat 25 ◦C (photoperiod 12 h) for 12–20 days. The mediumwas filtered once through Whatman filter paper to remove mostof the mycelium, then twice through 0.22 m Millipore membranes.The last filtration was conducted under sterile laminarflow. The sterile filtrate was stored at room temperature.
วัสดุทางชีวภาพ<br>ความไวต่อ hevea ยางพาราโคลน PB260, จาก<br>คอลเลกชัน CIRAD ในมงเปอลีเย (ฝรั่งเศส) ถูกใช้สำหรับการตรวจสอบ<br>ความเป็นพิษของเศษส่วนบริสุทธิ์<br>Cassiicola การเกิดโรคสายพันธุ์ CCP ถูกเก็บรวบรวมใน<br>ออกจากประเทศฟิลิปปินส์และบริสุทธิ์โดย singleconidium<br>แยก ตัวแยกถูกเก็บรักษาไว้ในที่มืด<br>บนมันฝรั่ง (PDA) ขนาดกลางที่25◦ C เป็นเวลานาน<br>การอนุรักษ์ในระยะที่ถูกเก็บไว้ในน้ำที่ไม่มีการฆ่าเชื้อ<br>ในที่มืดที่อุณหภูมิห้อง สำหรับการผลิตสารพิษ, ของเหลว<br>วัฒนธรรมได้รับการติดตั้งในขวด๕๐๐มล. โดยการลดการเป็นตัว๑๐๐มล.<br>ของการปรับเปลี่ยนของ Czapeck ขนาดกลาง (Saccharose 30 g l − 1, ๒.๒ g l − 1 lglutamic<br>กรด, K2HPO4 1 g l − 1, KCl ๐.๕ g l − 1, MgSO4 ·7H2O<br>๐.๕ g-1, 36M FeSO4 · 7H2O, 35M ZnSO4 · 7H2O, 40M<br>CuSO4 5H2O, pH เป็นรอบ4ก่อนที่จะฆ่าเชื้อ) 3<br>(เส้นผ่านศูนย์กลาง5มม.) จากวัฒนธรรมที่มีอายุ7วัน<br>สื่อของ PDA วัฒนธรรมของเหลวถูก incubated โดยไม่มีความปั่นป่วน<br>ที่25◦ C (ช่วงแสง12ชั่วโมง) เป็นเวลา 12-20 วัน สื่อกลาง<br>ถูกกรองครั้งเดียวผ่าน Whatman กรองกระดาษที่จะลบมากที่สุด<br>จากนั้นสองครั้งผ่าน๐.๒๒ m เยื่อหุ้มรูขุมขน<br>การกรองครั้งสุดท้ายถูกดำเนินการภายใต้การฆ่าเชื้อ<br>กระแส การถอนการฆ่าเชื้อถูกเก็บไว้ที่อุณหภูมิห้อง
การแปล กรุณารอสักครู่..
