Cell Proliferation Assay Inhibition

Cell Proliferation Assay Inhibition of cell proliferation
by rhinacanthins was determined by TetraColor ONE cell
proliferation assay kit. In briefly, HeLaS3 cells (5103 cells/
well) were suspended in 200 ml of DMEM containing 10%
FBS and seeded on a 96-well culture plate (Costar, Cambridge,
MA, U.S.A.). After 24 h of preincubation at 37 °C,
various concentrations of rhinacanthins-C, -N and -Q dissolved
in 0.1% DMSO were added to each well at the final
concentrations of 0, 3, 10, 30, 100, and 300 mM, and incubated
for a further indicated times (24, 48 or 72 h). At the
end of each time point, the medium containing the drugs
were discarded and the cells were washed with PBS. Subsequently,
10 ml of TetraColor ONE solution and 190 ml of free
DMEM medium were added to each well and then incubated
at 37 °C for 3 h. The amount of formazan formed was measured
on a microplate reader at a test wavelength of 492 nm
and a reference wavelength of 630 nm. Each assay was performed
in quadruplicate. DMSO (0.1%) had no cytotoxic effect
on the cells. The IC50 values were calculated from the
mean of absorbance.34,35)

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เซลล์ยับยั้งการงอกวิเคราะห์เซลล์การงอกโดย rhinacanthins ถูกกำหนด โดยเซลล์หนึ่ง TetraColorชุดทดสอบการงอก ในเวลาสั้น ๆ HeLaS3 เซลล์ (เซลล์ 5103 /ใจถูกหยุดชั่วคราวใน 200 ml ของ DMEM ที่ประกอบด้วย 10%FBS และ seeded บนจานดี 96 วัฒนธรรม (Costar เคมบริดจ์MA สหรัฐอเมริกา) หลังจาก 24 ชมของ preincubation ที่ 37 ° Cความเข้มข้นต่าง ๆ ของ rhinacanthins-C, -N และ -Q ส่วนยุบใน 0.1% DMSO ถูกเพิ่มไปยังแต่ละดีที่สุดท้ายความเข้มข้น 0, 3, 10, 30, 100 และ 300 มม. และ incubatedสำหรับการเพิ่มเติมระบุเวลา (24, 48 หรือ 72 h) ที่จุดสิ้นสุดของเวลาแต่ละจุด กลางประกอบด้วยยาถูกละทิ้ง และเซลล์ถูกล้าง ด้วย PBS ในเวลาต่อมา10 ml ของ TetraColor หนึ่ง และ 190 ml ของฟรีเพิ่ม DMEM กลางไปดีละแล้ว incubatedที่ 37 ° C สำหรับ 3 h มีวัดจำนวน formazan ที่เกิดขึ้นบนเครื่องอ่าน microplate ที่ความยาวคลื่นทดสอบของ 492 nmและความยาวคลื่นอ้างอิงของ 630 nm ทำการทดสอบแต่ละใน quadruplicate DMSO (0.1%) ได้ผลไม่ cytotoxicในเซลล์ ค่า IC50 คำนวณได้จากการค่าเฉลี่ยของ absorbance.34,35)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Assay
การเพิ่มจำนวนเซลล์ยับยั้งการเพิ่มจำนวนเซลล์โดยrhinacanthins ถูกกำหนดโดย TetraColor
เซลล์หนึ่งชุดทดสอบการแพร่กระจาย ในเวลาสั้น ๆ เซลล์ HeLaS3 (5103 เซลล์ /
ดี) ที่ถูกระงับใน 200 มิลลิลิตร DMEM ที่มี 10%
FBS และเมล็ดบนจานวัฒนธรรม 96 หลุม (ดาราเคมบริดจ์,
MA, USA) หลังจาก 24 ชั่วโมงของ preincubation ที่ 37
องศาเซลเซียสความเข้มข้นต่างๆของrhinacanthins-C -N และ -Q
ละลายใน0.1% DMSO
ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละดีที่สุดท้ายความเข้มข้น0, 3, 10, 30, 100, และ 300 มิลลิ
และบ่มเป็นเวลาที่ระบุต่อไป(24, 48 หรือ 72 ชั่วโมง) ในตอนท้ายของแต่ละจุดเวลาที่สื่อที่มียาเสพติดที่ถูกโยนทิ้งและเซลล์ถูกล้างด้วยพีบีเอส ต่อมา10 มิลลิลิตร TetraColor หนึ่งวิธีการแก้ปัญหาและ 190 มล. ฟรีกลางDMEM ถูกเพิ่มเข้าไปในแต่ละดีและจากนั้นบ่มที่อุณหภูมิ37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 ชั่วโมง ปริมาณของ formazan ที่เกิดขึ้นได้รับการวัดในการอ่านmicroplate ในการทดสอบของความยาวคลื่น 492 นาโนเมตรและความยาวคลื่นอ้างอิง630 นาโนเมตร การทดสอบในแต่ละที่ได้ดำเนินการใน quadruplicate DMSO (0.1%) ไม่มีผลพิษในเซลล์ ค่า IC50 ถูกคำนวณจากค่าเฉลี่ยของabsorbance.34,35)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การทดสอบการยับยั้งเซลล์เซลล์ proliferation

โดยการรนาแคนทินถูกกำหนดโดย tetracolor หนึ่งเซลล์
proliferation ) ชุด ในสั้น , helas3 เซลล์ ( 5103 เซลล์ /
) ถูกระงับใน 200 มิลลิลิตร บรรจุ 10 %
dmem FBS และเมล็ดบนจาน 96 ดีวัฒนธรรม ( COSTAR เคมบริดจ์
MA , USA ) หลังจาก 24 ชั่วโมงของพบ 37 °องศาเซลเซียสความเข้มข้นต่าง rhinacanthins-c
, ,- N - Q ละลาย
ใน 0.1% DMSO ถูกเพิ่มไปยังแต่ละที่ความเข้มข้นสุดท้าย
0 , 5 , 10 , 30 , 100 และ 300 มิลลิเมตร และบ่ม
สำหรับเพิ่มเติมพบครั้ง ( 24 , 48 และ 72 ชั่วโมง ) ที่
จบแต่ละจุดเวลา อาหารที่มียา
ถูกยกเลิก และเซลล์ก็ล้างด้วย PBS ต่อมา
10 มิลลิลิตร tetracolor สารละลายและ 190 มิลลิลิตร
ฟรีdmem ขนาดกลางเพิ่มกัน แล้วบ่มที่ 37 ° C
3 H . จํานวนของปฏิบัติการในพื้นที่ภาคเหนือของประเทศไทยก่อตั้งวัด
อ่านในการทดสอบความยาวคลื่น 492 nm
และการอ้างอิงความยาวคลื่น 630 นาโนเมตร แต่ละวิธีมีการปฏิบัติ
ในประกอบด้วยสี่ส่วน . DMSO ( 0.1 % ) ไม่มีพิษผล
บนเซลล์ การ ic50 ค่าคำนวณจากค่าเฉลี่ยของค่า

34,35 ) .