Amplification of the 16S rDNA gene

Amplification of the 16S rDNA gene (1500 bp) was performed using specific primers for Lactobacillus and Lactococcus genus (F: 50- AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-30 and R: 50 -TACCTTGTTAGGACTT- CACC-30). The PCR program cycle was set as follows: denaturation for 4 min at 95 C, 32cycles for 5 min (which consisted of 94 C for 1min,58Cfor1min,and72Cfor95s),andafinalextensionat 72 C for 5 min. Amplicons were electrophoresed on 1% agarose gel. The amplified fragment was then purified from the gel using a QIAquick PCR purification kit (QIAGEN, Hilden, Germany). Purified 16S rDNA fragments were sequenced by Macrogene Company (Korean sequencing company). Each sequence was blasted with

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ขยายการ 16S rDNA ยีน (1500 bp) ที่ดำเนินการโดยใช้ไพรเมอร์เฉพาะสำหรับสกุลแลคโตบาซิลลัสและ Lactococcus (F: 50-AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-30 และ R: 50 - TACCTTGTTAGGACTT-CACC-30) วงจรโปรแกรม PCR ถูกตั้งค่าเป็นดังนี้: denaturation ใน 4 นาทีที่ 95 C, 32cycles สำหรับ 5 นาที (ซึ่งประกอบด้วย C 94 ใน 1 นาที 58 Cfor1min, and72 Cfor95s), andafinalextensionat 72 C สำหรับ 5 นาที Amplicons มี electrophoresed บน 1% agarose เจ ส่วนเอาต์ได้แล้วบริสุทธิ์จากเจลใช้ชุดฟอก QIAquick PCR (QIAGEN, Hilden เยอรมนี) บางส่วนของบริสุทธิ์ 16S rDNA ถูกเรียงลำดับ โดย บริษัท Macrogene (บริษัทลำดับที่เกาหลี) แต่ละลำดับเสียหายด้วย

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การขยายของยีน 16S rDNA (1500 bp) ได​​้รับการดำเนินการโดยใช้ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจงสำหรับแลคโตบาซิลลัสและสกุล Lactococcus (F: 50 AGAGTTTGATCMTGGCTCAG-30 และ R: 50 -TACCTTGTTAGGACTT- CACC-30) วงจรโปรแกรม PCR ถูกกำหนดดังต่อไปนี้: denaturation 4 นาทีที่ 95 ซี 32cycles เวลา 5 นาที (ซึ่งประกอบไปด้วย 94 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 นาที 58 Cfor1min, and72 Cfor95s?) andafinalextensionat 72 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาที? amplicons ถูก electrophoresed เมื่อวันที่ 1% agarose เจล ส่วนขยายบริสุทธิ์แล้วจากเจลโดยใช้ชุดฟอก PCR QIAquick (QIAGEN, ฮิลเดน, เยอรมนี) ชิ้นส่วน 16S rDNA บริสุทธิ์มีลำดับขั้นตอนโดย Macrogene บริษัท (บริษัท ลำดับเกาหลี) ลำดับแต่ละถูกทำลายด้วย

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การเพิ่มปริมาณของยีน 16S rDNA ( 1500 BP ) คือการใช้ไพรเมอร์ที่จำเพาะสำหรับแลคโตบาซิลลัส และแลคโตค คัสสกุล ( F : 50 - agagtttgatcmtggctcag-30 และ R : 50 - taccttgttaggactt - cacc-30 ) ร่วมโปรแกรมวงจรไว้ดังนี้ ( สำหรับ 4 นาทีที่ 95  C 32cycles เป็นเวลา 5 นาที ( ซึ่งจำนวน 94  C 1 นาที , 58  cfor1min and72  , cfor95s ) andafinalextensionat 72  องศาเซลเซียสเป็นเวลา 5 นาทีamplicons เป็น electrophoresed บน 1% เจล . ส่วน amplified fragment ก็บริสุทธิ์จากเจลใช้ qiaquick PCR ฟอก Kit ( QIAGEN Hilden , เยอรมนี ) บริสุทธิ์ 16S rDNA ชิ้นส่วนถูกลำดับ โดยบริษัท macrogene ( บริษัทของเกาหลี ) แต่ละลำดับก็เสียหายด้วย