The PSC was extracted from the eggs

The PSC was extracted from the eggshell membrane according
to the methods of Kittiphattanabawon, Benjakul, Visessanguan,
Nagai, and Tanaka (2005) and Liu et al. (2012), with slight modifications.
Five grams of fresh eggshell membrane were weighed precisely.
To remove non-collagenous proteins, the eggshell
membranes were treated with 10 volumes (v/w) of alkali solution
(0.2–1.2 mol/l NaOH) for 6–36 h with continuous stirring. The
alkaline solution was changed every 2 h. After removal of the
supernatant, the alkali-treated samples were washed with distilled
water until the neutral pH was reached. To extract PSC, the
pre-treated eggshell membranes were soaked in 0.5 mol/l acetic
acid with pepsin (15–90 U/mg defatted skin) for 12–72 h with gentle
stirring. The amount of pepsin was calculated on the basis of
activity. The mixture was filtered with two layers of cheesecloth
to remove undissolved debris. The solution was salted out by adding
NaCl to a final concentration of 2 mol/l in the presence of
0.05 mol/l Tris (hydroxymethyl) amino methane (pH 7.0). The
resulting precipitate was collected by centrifuging at 30,000g for
40 min at 5 C; the precipitate was then dissolved in 0.5 mol/lacetic acid at a sample/solution ratio of 1:10 (w/v). The final solution
was dialyzed against cold distilled water using a dialysis
membrane with molecular weight cut-off of 12 kDa for 12 h at
4 C, with a change of solution every 4 h. The solution was then
lyophilized using a freeze dryer (ALPHA 2–4; Christ, Harz,
Germany). From this point it was referred to as pepsin soluble collagen
(PSC). The yield of PSC was calculated on the basis of eggshell
membrane weight after cleaning and expressed as a weight percentage.
The percentage PSC yield was calculated as follows:

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

PSC การถูกแยกจากเยื่อเปลือกไข่ตามกับวิธีการ Benjakul, Kittiphattanabawon, VisessanguanNagai และทานากะ (2005) และหลิว et al. (2012), มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อยการชั่งน้ำหนัก 5 กรัมของเยื่อเปลือกไข่สดได้แม่นยำเอาโปรตีนไม่ collagenous เปลือกไข่สารได้รับการรักษา ด้วยวอลุ่ม 10 (v/w) ของอัลคาไล(0.2-1.2 โมล/l NaOH) สำหรับ 6 – 36 h กับกวนอย่างต่อเนื่อง ที่ละลายด่างถูกเปลี่ยนแปลงทุก 2 h หลังจากเอาของsupernatant ตัวอย่างถือว่าด่างถูกล้างด้วยกลั่นน้ำจนถึง pH เป็นกลาง แยก PSC การเยื่อหุ้มเปลือกไข่ก่อนบำบัดถูกนำไปแช่ใน 0.5 โมล/l อะซิติกกรดกับเพพซิน (15-90 U/มิลลิกรัม สกัดไขมันทางผิวหนัง) สำหรับ h 12 – 72 ด้วยใจกวน จำนวนของเพพซินถูกคำนวณบนพื้นฐานของกิจกรรมการ ส่วนผสมที่กรองกับสองชั้นของ cheeseclothเอาเศษ undissolved โซลูชันมีเค็มออก โดยการเพิ่มNaCl จะเข้มข้นสุดท้ายของโมล 2 l หน้า0.05 โมล/l ตรี (hydroxymethyl) อะมิโนมีเทน (pH 7.0) ที่precipitate ได้ถูกรวบรวม โดย centrifuging ที่ 30000 g สำหรับ40 นาทีที่ 5 C precipitate ถูกแล้วละลายในกรดระดับ 0.5 โมล/lacetic ที่แก้ไขปัญหาตัวอย่างอัตราส่วน 1:10 (w/v) การแก้ปัญหาขั้นสุดท้ายมี dialyzed กับหน่วยใช้น้ำกลั่นเมมเบรน ด้วยการตัดน้ำหนักโมเลกุลของ kDa 12 สำหรับ h 12 ที่4 C กับการเปลี่ยนแปลงของทุก h 4 การแก้ปัญหาได้แล้วlyophilized ใช้การหยุดเป่า (อัลฟา 2-4 คริสต์ Harzเยอรมนี) จากจุดนี้ มันถูกเรียกว่าคอลลาเจนละลายเพพซิน(PSC) ที่คำนวณจากผลตอบแทนของ PSC เป็นเปลือกไข่เมมเบรนน้ำหนักหลังจากทำความสะอาด และแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์ของน้ำหนักคำนวณจากผลตอบแทน PSC เปอร์เซ็นต์ดังนี้:

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

PSC
ถูกสกัดจากเยื่อเปลือกไข่ตามวิธีการของKittiphattanabawon, เบญจกุล, Visessanguan,
นากาอิและทานากะ (2005) และหลิว et al, (2012) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย.
ห้ากรัมของเยื่อหุ้มเปลือกไข่สดถูกชั่งน้ำหนักอย่างแม่นยำ.
ในการลบโปรตีนที่ไม่ collagenous
ที่เปลือกไข่เยื่อได้รับการรักษาที่มี10 เล่ม (V / w) ของการแก้ปัญหาด่าง
(0.2-1.2 โมล / ลิตร NaOH) สำหรับ 6-36 ชั่วโมงกับกวนอย่างต่อเนื่อง
สารละลายด่างก็เปลี่ยนทุก 2 ชั่วโมง หลังจากที่การกำจัดของใส, ตัวอย่างด่างได้รับการรักษาที่ถูกล้างด้วยกลั่นน้ำจนค่าpH เป็นกลางก็มาถึง เพื่อดึง PSC ที่เยื่อเปลือกไข่ก่อนรับการรักษาที่ถูกแช่ใน 0.5 โมล / ลิตรอะซิติกกรดน้ำย่อย(15-90 U / mg ผิวสกัด) สำหรับ 12-72 ชั่วโมงกับอ่อนโยนกวน ปริมาณของน้ำย่อยที่ได้รับการคำนวณบนพื้นฐานของกิจกรรม ส่วนผสมที่ถูกกรองที่มีสองชั้นของผ้าที่จะเอาเศษ undissolved วิธีการแก้ปัญหาที่ได้รับการออกเค็มโดยการเพิ่มโซเดียมคลอไรด์ที่จะมีความเข้มข้นสุดท้ายของ 2 โมล / ลิตรในการปรากฏตัวของ 0.05 โมล / ลิตร Tris (hydroxymethyl) ก๊าซมีเทนอะมิโน (pH 7.0) ตะกอนที่เกิดขึ้นได้รับการเก็บรวบรวมโดยเหวี่ยงที่ 30,000g สำหรับ40 นาทีที่ 5 C; ตะกอนก็เลือนหายไปแล้วใน 0.5 โมล / กรด lacetic ที่ตัวอย่าง / แก้ปัญหาของอัตราส่วน 01:10 (w / v) วิธีการแก้ปัญหาสุดท้ายถูก dialyzed กับน้ำกลั่นเย็นโดยใช้ฟอกไตเมมเบรนที่มีน้ำหนักโมเลกุลตัด12 กิโลดาลตันเป็นเวลา 12 ชั่วโมงที่4 องศาเซลเซียสโดยมีการเปลี่ยนแปลงของการแก้ปัญหาทุก 4 ชั่วโมง การแก้ปัญหาก็แห้งโดยใช้เครื่องเป่าแช่แข็ง (ALPHA 2-4; คริสต์ฮาร์ซ, เยอรมนี) จากจุดนี้มันถูกเรียกว่าคอลลาเจนเปปซินที่ละลายน้ำได้(PSC) ผลผลิตของ PSC ถูกคำนวณบนพื้นฐานของเปลือกไข่น้ำหนักเยื่อหลังจากการทำความสะอาดและการแสดงเป็นเปอร์เซ็นต์น้ำหนัก. ผลผลิต PSC ร้อยละที่คำนวณได้ดังต่อไปนี้:

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ที่สกัดจากเยื่อเปลือกไข่กิจการตามวิธีการของ kittiphattanabawon

visessanguan กูล , , , นากา และ ทานากะ ( 2005 ) และ Liu et al . ( 2012 ) ที่มีการปรับเปลี่ยนเล็กน้อย .
5 กรัมของน้ำหนักเยื่อเปลือกไข่สดแน่นอน .
เอาปลอดโปรตีน collagenous , เปลือกไข่
+ รักษาด้วย 10 เล่ม ( v / w )
สารละลายด่าง ( 0.2 - 12 mol / l NaOH ) 6 – 36 ชั่วโมงต่อเนื่อง กวน
สารละลายด่างก็เปลี่ยนทุก 2 ชั่วโมง หลังจากการกำจัด
น่าน , ด่างถือว่าจำนวนการล้างด้วยน้ำที่ pH เป็นกลาง
กลั่นจนครบ สารสกัดจากสับปะรดกวน ,
ก่อนถือว่าเปลือกไข่เยื่อชุ่ม 0.5 mol / L กรดอะซิติกกรดด้วยเปปซิน (
15 – 90 U / mg สกัดผิว ) 12 - 72 ชั่วโมงกับอ่อนโยน
กวน .จํานวนเพพซินถูกคำนวณบนพื้นฐานของ
กิจกรรม ส่วนผสมจะถูกกรองด้วยสองชั้นของผ้า
undissolved เพื่อเอาเศษ สารละลายเกลือออกโดยการเพิ่มเกลือความเข้มข้นสุดท้าย
2 mol / L ในการปรากฏตัวของ 0.05 mol / l
ทริส ( ซี ) มีก๊าซมีเทน ( pH 7.0 )
ผลการศึกษาโดยสารตกตะกอนที่ 30000g เพื่อ
40 นาทีที่ 5  C ;ที่ถูกละลายในกรดที่ lacetic 0.5 mol / ตัวอย่าง / แก้ไขอัตราส่วน 1 : 10 ( w / v )
ทางออกสุดท้ายคือผ่านกับเย็นน้ำกลั่นใช้ฟอกเลือด
เยื่อกับตัดโมเลกุลของ 12 กิโล 12 H ที่
4  C กับการเปลี่ยนแปลงของสารละลาย ทุก 4 ชั่วโมง สารละลายที่แห้งแล้วใช้เครื่องเป่าแช่แข็ง
( อัลฟา 2 – 4 ; พระคริสต์ ฮาร์ทส์
, เยอรมนี )จากจุดนี้ มันถูกเรียกว่าเปปซินคอลลาเจนจาก
( PSC ) ผลผลิตของ PSC ถูกคำนวณบนพื้นฐานของน้ำหนักเยื่อเปลือกไข่
หลังจากทำความสะอาดและแสดงเป็น น้ำหนักร้อยละ ร้อยละ PSC ผลผลิต
คำนวณได้ดังนี้