performed the experiments only in m

performed the experiments only in male rats. We used 13-week-old
animals because previous studies have demonstrated normal
creatinine clearance in the age range of 16e20 weeks in ZDF rats
(20e24). After overnight fasting, test drugs were orally administered
to 13-week-old ZDF rats in a volume of 5 mL/kg. The
administered doses were 0.3 mg/kg for teneligliptin, 3 and 10 mg/
kg for canagliflozin, and a combination of 0.3 mg of teneligliptin
and 3 or 10 mg/kg of canagliflozin. Teneligliptin at 0.1 mg/kg and
1 mg/kg inhibits >50% of plasma DPP4 activity for 30 min and
significantly reduces postprandial hyperglycemia in Zucker fatty
rats (18), and canagliflozin at 3 mg/kg and 30 mg/kg inhibits >70%
of renal glucose reabsorption in ZDF rats (19). Glucose solution was
orally administered at 2 g/kg body weight 15 min after the
administration of the test compounds, and blood was collected
from the tail vein into chilled tubes containing EDTA and a DPP4
inhibitor 15 min before (15) and 0, 10, 30, 60, and 120 min after
the oral glucose administration. Plasma was separated by centrifugation
and stored at 80 C until the measurement of plasma
glucose, insulin, and aGLP-1 concentrations.
2.3.3. Determination of metabolic parameters
Plasma glucose concentrations were determined using a
Glucose CII-Test WAKO Kit (Wako Pure Chemical Industries, Osaka,
Japan). Plasma active GLP-1 (aGLP-1) concentrations were
measured using an ELISA kit (Epitope Diagnostics, Inc., San Diego,
CA) after solid phase extraction. Plasma insulin concentrations
were measured with an enzyme-linked immunosorbent assay kit
(Morinaga Institute of Biologic Science, Yokohama, Japan). Plasma
DPP4 activities were measured as described above.
2.3.4. Pharmacokinetic study
Plasma concentrations of canagliflozin and teneligliptin were
determined in satellite groups of 13 week-old ZDF rats by liquid
chromatography-tandem mass spectrometry (LC-MS/MS) after
solid-phase extraction from plasma. In brief, test compounds and
glucose were orally administered to ZDF rats as mentioned above.
The same volume of drug or vehicle was administered in both
single and combination treatment groups. Plasma samples were
collected at 0.25, 0.42, 0.75, 1.25, 2.25, 4, 8, 10, 24, and 32 h after test
compound administration. Each sample was loaded onto an OASIS
HLB mElution 96-well plate (30 mm, Waters Corporation, Milford,
MA) and eluted with acetonitrile. The eluates were injected into an
API4000 mass spectrometer (AB SCIEX, Framingham, USA) equipped
with an Atlantis C18 column (5 mm, 2.1 mm I.D.
50 mm;
Waters Corporation) for teneligliptin or a Cadenza CD C-18 column
(2.0 mm I.D.
50 mm, 3 mm, Imtakt Corporation, Kyoto, Japan) for
canagliflozin. The pharmacokinetic parameters were determined
using the pharmacokinetic analysis software Phoenix WinNonlin
6.3 (Pharsight Corporation, RealMountain View, USA).
2.4. Statistical analysis
Data were presented as the mean ± S.E.M. for each group. Statistical
analyses were performed using an SAS-based system (SAS
Institute, Cary, NC, USA) or Prism software (GraphPad, San Diego,
CA, USA), and significant differences were identified using a parametric
Dunnett's multiple comparison test, t-test, or two way
analysis of variance, as appropriate. Probabilities less than 5%
(P < 0.05) were considered to be statistically significant. Integrated
plasma glucose, aGLP-1, and insulin levels during OGTT were
expressed as the incremental area under the curve (DAUC0e2h),
calculated by the trapezoidal rule. The peak value of plasma
glucose, aGLP-1, and insulin above baseline levels measured at
0 min was calculated up to 120 min after glucose loading.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ดำเนินการทดลองในหนูเพศชายเท่านั้น เราใช้อายุ 13 สัปดาห์สัตว์เนื่องจากการศึกษาก่อนหน้านี้ได้แสดงให้เห็นว่าปกติเคลียร์ของ creatinine ในช่วงอายุสัปดาห์ 16e20 ในหนู ZDF(20e24) หลังจากถือศีลอดค้างคืน ยาทดสอบมีเนื้อหาจัดการเพื่อหนู ZDF อายุ 13 สัปดาห์ในปริมาตรของ 5 mL/kg ที่จัดการปริมาณได้ 0.3 mg/kg สำหรับ teneligliptin, 3 และ 10 มิลลิกรัม /สำหรับ canagliflozin และชุดของ teneligliptin 0.3 มก.และ 3 หรือ 10 mg/kg ของ canagliflozin Teneligliptin ที่ 0.1 mg/kg และ1 มิลลิกรัม/กิโลกรัมยับยั้ง > 50% ของพลาสม่ากิจกรรม DPP4 สำหรับ 30 นาที และลด postprandial hyperglycemia ใน Zucker ไขมันหนู (18), และ canagliflozin ที่ 3 มิลลิกรัม/กิโลกรัมและ 30 มิลลิกรัม/กิโลกรัมยับยั้ง > 70%ของ reabsorption กลูโคสไตในหนู ZDF (19) โซลูชั่นของน้ำตาลกลูโคสจัดการเนื้อหาที่ 2 กรัม/กก.น้ำหนักตัว 15 นาทีหลังจากการบริหารการทดสอบสารประกอบ และเลือดรวบรวมจากหลอดเลือดดำหางเป็นหลอดที่ประกอบด้วย EDTA และ DPP4 ที่เย็นผล 15 นาทีก่อน (15) และ 0, 10, 30, 60 และ 120 นาทีหลังจากจัดการน้ำตาลในช่องปาก พลาสม่าถูกคั่น ด้วย centrifugationและเก็บไว้ที่ 80 C จนกระทั่งวัดพลากลูโคส อินซูลิน และความเข้มข้น aGLP 12.3.3 การกำหนดพารามิเตอร์ที่เผาผลาญพลาสมากลูโคสความเข้มข้นที่กำหนดโดยใช้การน้ำตาลกลูโคส CII-WAKO ชุดทดสอบ (Wako เพียวเคมีอุตสาหกรรม โอซาก้าญี่ปุ่น) พลาสม่างาน GLP-1 (aGLP-1) ความเข้มข้นได้วัดโดยใช้ชุดการ ELISA (Epitope วินิจฉัย Inc., San DiegoCA) หลังการแยกเฟสของแข็ง ความเข้มข้นของอินซูลินพลาสม่าที่วัด มีการลิงค์เอนไซม์ immunosorbent assay ชุด(Morinaga สถาบันวิทยาศาสตร์อุบัติ โยโกฮามะ ญี่ปุ่น) พลาสม่าDPP4 กิจกรรมที่วัดตามที่อธิบายไว้ข้างต้น2.3.4 การ pharmacokinetic ศึกษามีความเข้มข้นของพลาสมาของ canagliflozin และ teneligliptinกำหนด โดยของเหลวในกลุ่มดาวเทียมของหนู ZDF สัปดาห์อายุ 13ตัวตามกันไป chromatography โตรเมทรี (LC-MS/MS) หลังจากเฟสของแข็งสกัดจากพลาสม่า ทดสอบสารสังเขป และเนื้อหาได้บริหารกลูโคสเพื่อหนู ZDF ดังกล่าวข้างต้นมีบริหารยาหรือรถระดับเดียวกันทั้งกลุ่มบำบัดเดี่ยวและผสม ตัวอย่างพลาสมาได้รวบรวมไว้ที่ 0.25, 0.42, 0.75, 1.25, 2.25, 4, 8, 10, 24 และ 32 h หลังจากทดสอบจัดการผสม แต่ละอย่างถูกโหลดลงในแอHLB mElution ดี 96 แผ่น (30 mm วอเตอร์ คอร์ปอเรชั่น ลฟอร์ดMA) และ eluted ด้วย acetonitrile Eluates ถูกฉีดเข้าไปในตัวAPI4000 โดยรวมสเปกโตรมิเตอร์ (AB SCIEX, Framingham สหรัฐอเมริกา) พร้อมมีคอลัมน์ที่มีแอตแลนติ C18 (5 มม. 2.1 มม.ประชาชน 50 มม.บริษัทวอเตอร์ส) teneligliptin หรือคอลัมน์ Cadenza CD C-18(2.0 mm ประชาชน 50 mm, 3 mm, Imtakt Corporation เกียวโต ญี่ปุ่น) สำหรับcanagliflozin มีกำหนดพารามิเตอร์ pharmacokineticใช้ซอฟต์แวร์วิเคราะห์ pharmacokinetic ฟีนิกซ์ WinNonlin6.3 (Pharsight Corporation ดู RealMountain สหรัฐอเมริกา)2.4. สถิติวิเคราะห์ข้อมูลนำเสนอเป็นเฉลี่ย± S.E.M. สำหรับแต่ละกลุ่ม ทางสถิติวิเคราะห์ได้ดำเนินการโดยใช้การใช้ SAS ระบบ (SASสถาบัน แครีแกรนต์ NC สหรัฐอเมริกา) หรือซอฟต์แวร์ปริซึม (GraphPad, San DiegoCA, USA), และระบุความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญโดยใช้แบบพาราเมตริกของ Dunnett ทดสอบเปรียบเทียบหลาย t-ทดสอบ หรือสองทางวิเคราะห์ของต่าง ตามความเหมาะสม กิจกรรมน้อยกว่า 5%(P < 0.05) ได้ถือเป็นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติ รวมมีพลาสมากลูโคส aGLP 1 และอินซูลินระดับระหว่าง OGTTแสดงเป็นเพิ่มพื้นที่ใต้เส้นโค้ง (DAUC0e2h),ตามกฎ trapezoidal ค่าสูงสุดของพลาสม่ากลูโคส aGLP 1 และอินซูลินสูงกว่าระดับพื้นฐานที่วัดคำนวณขั้นต่ำ 0 ถึง 120 นาทีหลังจากกลูโคสที่โหลด

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ดำเนินการทดลองในหนูเพียงชาย เราใช้ 13
สัปดาห์อายุสัตว์เพราะการศึกษาก่อนหน้านี้ได้แสดงให้เห็นปกติ
creatinine กวาดล้างในช่วงอายุของ 16e20 สัปดาห์ในหนู ZDF
(20e24) หลังจากการอดอาหารค้างคืนยาเสพติดได้รับการทดสอบปากเปล่าถึง 13 สัปดาห์เก่าหนู ZDF ในปริมาณ 5 มิลลิลิตร / กิโลกรัม ปริมาณยาเป็น 0.3 mg / kg สำหรับ teneligliptin, 3 และ 10 มิลลิกรัม / กิโลกรัม canagliflozin และการรวมกันของ 0.3 มิลลิกรัม teneligliptin และ 3 หรือ 10 มิลลิกรัม / กิโลกรัมของ canagliflozin Teneligliptin ที่ 0.1 มก. / กก. และ1 มก. / กกยับยั้ง> 50% ของกิจกรรม DPP4 พลาสม่า 30 นาทีและช่วยลดน้ำตาลในเลือดสูงภายหลังตอนกลางวันในZucker ไขมันหนู (18) และ canagliflozin ที่ 3 มก. / กก. และ 30 มก. / กกยับยั้ง> 70 % ของการดูดซึมกลูโคสที่ไตในหนู ZDF (19) วิธีการแก้ปัญหากลูโคสถูกปากเปล่าที่ 2 กรัม / กิโลกรัมน้ำหนักตัว 15 นาทีหลังจากที่การบริหารงานของสารทดสอบและเลือดถูกเก็บรวบรวมจากหลอดเลือดดำหางลงไปในท่อแช่เย็นที่มีEDTA และ DPP4 ยับยั้ง 15 นาทีก่อน (15) และ 0, 10 , 30, 60 และ 120 นาทีหลังจากการบริหารระดับน้ำตาลในช่องปาก พลาสม่าถูกแยกจากกันโดยการหมุนเหวี่ยงและเก็บไว้ที่? 80 C จนการวัดพลาสม่ากลูโคสอินซูลินและความเข้มข้นaGLP-1. 2.3.3 การกำหนดค่าพารามิเตอร์การเผาผลาญกลูโคสพลาสม่าได้รับการพิจารณาโดยใช้กลูโคสCII ทดสอบ WAKO Kit (Wako อุตสาหกรรมเคมีบริสุทธิ์, โอซาก้าประเทศญี่ปุ่น) พลาสม่าที่ใช้งาน GLP-1 (aGLP-1) ความเข้มข้นที่ถูกวัดโดยใช้ชุดELISA (Epitope วินิจฉัย, Inc, San Diego, CA) หลังจากการสกัดของแข็ง พลาสม่าความเข้มข้นของอินซูลินถูกวัดด้วยเอนไซม์ที่เชื่อมโยงชุดทดสอบอิมมูโน(Morinaga สถาบันวิทยาศาสตร์ทางชีวภาพโยโกฮามาญี่ปุ่น) พลาสม่ากิจกรรม DPP4 วัดตามที่อธิบายไว้ข้างต้น. 2.3.4 เภสัชจลนศาสตร์การศึกษาความเข้มข้นของพลาสม่าและ canagliflozin teneligliptin ถูกกำหนดไว้ในกลุ่มดาวเทียม13 สัปดาห์อายุหนู ZDF โดยของเหลวโคควบคู่มวลสาร(LC-MS / MS) หลังจากการสกัดของแข็งเฟสจากพลาสม่า ในช่วงสั้น ๆ และสารทดสอบน้ำตาลกลูโคสเป็นยารับประทานหนูZDF ดังกล่าวข้างต้น. ปริมาณเดียวกันของยาเสพติดหรือยานพาหนะเป็นยาทั้งเดี่ยวและกลุ่มการรักษารวมกัน ตัวอย่างพลาสมาถูกเก็บที่ 0.25, 0.42, 0.75, 1.25, 2.25, 4, 8, 10, 24, และ 32 ชั่วโมงหลังการทดสอบการบริหารจัดการสาร แต่ละตัวอย่างถูกโหลดลงบน OASIS HLB mElution แผ่น 96 หลุม (30 มมวอเตอร์คอร์ปอเรชั่นฟอร์ด, แมสซาชูเซต) และชะที่มี acetonitrile eluates ถูกฉีดเข้าไปในสเปกโตรมิเตอร์มวลAPI4000 (AB SCIEX ซึ่งรามิงแฮม, สหรัฐอเมริกา) ติดตั้งกับคอลัมน์แอตแลนติC18 (5 มิลลิเมตร 2.1 มิลลิเมตร ID 50 มม? วอเตอร์คอร์ปอเรชั่น) สำหรับ teneligliptin หรือ Cadenza ซีดี C-18 คอลัมน์(2.0 มม ID 50 มม 3 มม Imtakt คอร์ปอเรชั่นเกียวโตญี่ปุ่น) สำหรับcanagliflozin พารามิเตอร์ทางเภสัชจลนศาสตร์ได้รับการพิจารณาโดยใช้การวิเคราะห์ทางเภสัชจลนศาสตร์ซอฟต์แวร์ฟินิกซ์ WinNonlin 6.3 (Pharsight คอร์ปอเรชั่น RealMountain ดูสหรัฐอเมริกา). 2.4 การวิเคราะห์ทางสถิติข้อมูลนำเสนอเป็นค่าเฉลี่ย± SEM สำหรับแต่ละกลุ่ม สถิติการวิเคราะห์ได้ดำเนินการใช้ระบบ SAS-based (SAS Institute, แครี, NC, USA) หรือซอฟต์แวร์ปริซึม (GraphPad, San Diego, CA, USA) และความแตกต่างอย่างมีนัยสำคัญที่ถูกระบุโดยใช้พารามิเตอร์Dunnett ของการทดสอบการเปรียบเทียบหลาย t-test หรือวิธีที่สองการวิเคราะห์ความแปรปรวนตามความเหมาะสม ความน่าจะเป็นน้อยกว่า 5% (p <0.05) ได้รับการพิจารณาให้เป็นนัยสำคัญทางสถิติ แบบบูรณาการระดับน้ำตาลในเลือด, aGLP-1 และระดับอินซูลินในช่วง OGTT ถูกแสดงเป็นพื้นที่ที่เพิ่มขึ้นภายใต้เส้นโค้ง(DAUC0e2h) คำนวณโดยการปกครองรูปทรงสี่เหลี่ยมคางหมู ค่าสูงสุดของพลาสม่ากลูโคส aGLP-1, และอินซูลินสูงกว่าระดับพื้นฐานวัด 0 นาทีที่คำนวณได้ถึง 120 นาทีหลังจากการโหลดกลูโคส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ได้ทำการทดลองในหนูเพศผู้ เราใช้สัตว์เก่า
13 สัปดาห์ เพราะการศึกษาก่อนหน้านี้ได้แสดงให้เห็นเป็นปกติ
ปุ่มป่ำอายุอยู่ในช่วง 16e20 สัปดาห์ ZDF หนู
( 20e24 ) หลังจากค้างคืนการอดอาหาร , ยาแบบรับประทานและ
13 สัปดาห์เก่า ZDF หนูในปริมาตร 5 มิลลิลิตร / กิโลกรัม .
1 โดส เป็น 0.3 มิลลิกรัม / กิโลกรัม สำหรับ teneligliptin , 3 และ 10 มิลลิกรัม / กิโลกรัม สำหรับ canagliflozin
,และการรวมกันของ 0.3 มิลลิกรัม teneligliptin
3 หรือ 10 มิลลิกรัม / กิโลกรัม canagliflozin . teneligliptin ที่ 0.1 มก. / กก. และ
1 มิลลิกรัม / กิโลกรัม ยับยั้ง > 50% ของกิจกรรม dpp4 พลาสมาลดหลังอาหาร 30 นาที

หนูอ้วน hyperglycemia ในซัคเกอร์ ( 18 ) , และ canagliflozin 3 mg / kg และ 30 มิลลิกรัม / กิโลกรัม ยับยั้ง > 70% ของกลูโคสที่ไตในหนูแก้ว
ZDF ( 19 ) สารละลายกลูโคส
ผู้ที่รับประทาน 2 กรัมต่อกิโลกรัมน้ำหนักตัว 15 นาทีหลังจากที่
การบริหารสารทดสอบ และเก็บเลือดจากหลอดเลือดดำในแช่เย็น
หางหลอดที่มี EDTA และ dpp4
ยับยั้ง 15 นาทีก่อน (  15 ) และ 0 , 10 , 30 , 60 และ 120 นาทีหลังจากที่
การบริหารช่องปากกลูโคส . พลาสมาโดยแยกดังนี้
และเก็บไว้ที่  80 C จนถึงวัดพลาสมา
กลูโคส , อินซูลินและความเข้มข้น aglp-1 .
2.3.3 . การหาพารามิเตอร์ของการสลาย
พลาสมากลูโคสความเข้มข้นสารละลาย โดยใช้ชุดทดสอบกลูโคส CII
Wako ( Wako บริสุทธิ์อุตสาหกรรมเคมี , โอซาก้า ,
ญี่ปุ่น ) พลาสมาปราดเปรียว glp-1 ( aglp-1 ) ความเข้มข้น
วัดโดยใช้ชุด ELISA ( epitope mapping ในการวินิจฉัย , Inc . , San Diego ,
CA ) หลังจากการสกัดแยกด้วยเฟสของแข็ง พลาสมาเข้มข้น
อินซูลินเป็นวัดที่มีสุรคต Kit
( โมริสถาบันวิทยาศาสตร์ทางชีววิทยาโยโกฮาม่า ประเทศญี่ปุ่น ) พลาสมา
dpp4 กิจกรรมวัดตามที่อธิบายไว้ข้างต้น .
2.3.4 . พลาสมาการศึกษา

teneligliptin canagliflozin ยาและถูกกำหนดในกลุ่มของดาวเทียม 13 สัปดาห์เก่า ZDF หนูโดยของเหลว
โครมาโทกราฟีควบคู่ Mass Spectrometry ( อินซูลิน / MS ) หลังจาก
ส่วนสกัดจากพลาสมา ในช่วงสั้น ๆ , สารทดสอบและกลูโคสเป็นปากเปล่าและ ZDF

หนูดังกล่าวข้างต้น ปริมาณเดียวกันของยา หรือใช้ในรถ ทั้งเดี่ยวและกลุ่ม
รวมกัน ตัวอย่างพลาสมา
เก็บที่ 0.25 , 0.42 , 0.75 , 1.25 , 2.25 , 4 , 8 , 10 , 24 และ 32 ชั่วโมงหลังจากทดสอบ
ผสม ) แต่ละตัวอย่างถูกโหลดไปยังโอเอซิส
melution hlb 96 ดีจาน ( 30 มม. น้ำ Corporation , Milford ,
ma ) และตัวอย่างกับไน . การ eluates ถูกฉีดเข้าไป
api4000 แมสสเปกโตรมิเตอร์ ( AB sciex Framingham อเมริกา , ) ติดตั้ง
กับแอตแลนติสคอลัมน์ C18 5 mm , 2.1 มม. บัตร
50 มม. ;
Waters Corporation ) เพื่อ teneligliptin หรือซีดี - Cadenza คอลัมน์
( 2.0 มม. บัตร
50 มม. 3 มม. imtakt Corporation , เกียวโต ญี่ปุ่น )
canagliflozin .พารามิเตอร์ทางเภสัชจลนศาสตร์วิเคราะห์โดยใช้การวิเคราะห์ซอฟต์แวร์ Phoenix )

winnonlin 6.3 ( pharsight Corporation , realmountain มุมมอง , USA ) .
2.4 . การวิเคราะห์ข้อมูลทางสถิติที่ถูกนำเสนอเป็น s.e.m.
±หมายถึงกลุ่ม สถิติที่ใช้ในการวิเคราะห์คือการใช้
ตามระบบ SAS ( SAS
สถาบัน แครี่ , NC , USA ) หรือซอฟต์แวร์ปริซึม (
graphpad ซานดิเอโก แคลิฟอร์เนีย สหรัฐอเมริกา )และ เปรียบเทียบการระบุโดยใช้พารามิเตอร์
Dunnett ของหลายการทดสอบเปรียบเทียบ t-test หรือสองวิธี
การวิเคราะห์ความแปรปรวน ตามความเหมาะสม ความน่าจะเป็นน้อยกว่า 5 %
( P < 0.05 ) ถือว่ามีนัยสำคัญทางสถิติ รวม aglp-1
พลาสมากลูโคส และระดับอินซูลินในวิธีถูก
แสดงเป็นเพิ่มพื้นที่ใต้เส้นโค้ง (
dauc0e2h )คำนวณโดยกฎสี่เหลี่ยมคางหมู . ยอดค่า
aglp-1 พลาสมากลูโคสและอินซูลินสูงกว่าพื้นฐานระดับวัดที่
0 นาทีคำนวณถึง 120 นาทีหลังจากที่โหลดกลูโคส