Isolates of LAB were propagated twi

Isolates of LAB were propagated twice in MRS broth (1% v/v) for 20 h at 37 °C before experimental use. The cells from 100 ml MRS culture were harvested by centrifugation (4300g, 10 min), and washed three times in phosphate-buffered saline, pH 7.0. Washed cell pellets were then suspended in (1/10) cultivation volume in the same buffer, hence obtaining a 10-fold increase in cell density. To 1 ml of the washed cell suspension, 5 ml of simulated gastric juice and 1.5 ml NaCl (0.5 w/v) were added. Simulated gastric juice was prepared freshly daily by suspending pepsin (3 g/L) in sterile saline (0.5% w/v) and adjusting the pH to 2.0 with concentrated HCl (Charteris et al., 1998). The materials were vortexed for 10 s and incubated at 37 °C for 3 h. Aliquots of 0.1 ml were then removed at constant intervals (0, 1, 2, 3 h) for determination of total viable count. Dilutions were made (up to 10−4) and cells were plated in duplicate on MRS agar. Plates were incubated at 37 °C for 72 h before enumeration (Charteris et al., 1998).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

แยกของแล็บถูกแพร่กระจายในน้ำซุป MRS (1% v/v) สำหรับ h 20 37 ° c ก่อนทดลองใช้ เซลล์จากวัฒนธรรมนาง 100 มล.เก็บเกี่ยว โดยการหมุนเหวี่ยง (4300 กรัม 10 นาที), และซักสามครั้งในบัฟเฟอร์ฟอสเฟตเกลือ pH 7.0 ล้างเซลล์ขี้ถูกหยุดชั่วคราวระดับเสียงในการเพาะปลูก (1/10) ในบัฟเฟอร์เดียว จึง ได้รับการเพิ่ม 10-fold ในความหนาแน่นของเซลล์ เพื่อระงับเซลล์ล้าง 5 ml ของน้ำในกระเพาะอาหารจำลอง และ 1.5 ml NaCl 1 ml (0.5 w/v) เพิ่มขึ้น น้ำในกระเพาะอาหารจำลองจัดทำสดใหม่ทุกวัน โดยระงับธาตุเพพซิน (3 g/L) ในน้ำเกลือปลอดเชื้อ (0.5% w/v) และปรับค่า pH 2.0 กับ HCl เข้มข้น (Charteris et al. 1998) วัสดุถูก vortexed สำหรับ 10 s และได้รับการกกที่ 37 ° C สำหรับ 3 h. Aliquots ของ 0.1 มล.ถูกเอาออกจากนั้นในช่วงเวลาคง (0, 1, 2, 3 ชม.) สำหรับการกำหนดนับได้รวม ทำเจือจาง (ถึง 10−4) และเซลล์ถูกชุบในซ้ำบนอาหารเลี้ยงเชื้อ MRS แผ่นได้รับการกกที่ 37 ° C เป็นเวลา 72 ชั่วโมงก่อนการแจงนับ (Charteris et al. 1998)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

แยกห้องปฏิบัติการได้รับการแพร่กระจายสองครั้งใน MRS น้ำซุป (1% v / v) เป็นเวลา 20 ชั่วโมงที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสก่อนการใช้งานทดลอง เซลล์จาก 100 มล. วัฒนธรรม MRS ถูกเก็บเกี่ยวโดยการหมุนเหวี่ยง (4300g, 10 นาที) และล้างสามครั้งในน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ค่า pH 7.0 ล้างเม็ดเซลล์ถูกระงับแล้ว (1/10) ปริมาณการเพาะปลูกในบัฟเฟอร์เดียวกันจึงได้รับเพิ่มขึ้น 10 เท่าในความหนาแน่นของเซลล์ 1 มิลลิลิตรของเซลล์แขวนลอยล้างขนาด 5 ml ของน้ำย่อยจำลองและ 1.5 มล. โซเดียมคลอไรด์ (0.5 w / v) ถูกเพิ่ม น้ำย่อยจำลองถูกจัดทำสดใหม่ทุกวันโดยการระงับน้ำย่อย (3 กรัม / ลิตร) ในน้ำเกลือปราศจากเชื้อ (0.5% w / v) และการปรับค่า pH 2.0 กับความเข้มข้น HCl (ชาร์ et al., 1998) วัสดุที่ถูกหมุนวนเวลา 10 วินาทีและบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 3 ชั่วโมง aliquots 0.1 มล. ถูกถอดออกมาแล้วในช่วงเวลาที่คงที่ (0, 1, 2, 3 ชั่วโมง) สำหรับการกำหนดนับรวมการทำงานได้ เจือจางได้ทำ (ถึง 10-4) และเซลล์ที่ถูกชุบซ้ำกันบน MRS agar แผ่นถูกบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 72 ชั่วโมงก่อนการแจงนับ (ชาร์ et al., 1998)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

จำนวนห้องปฏิบัติการเป็นจำนวนสองครั้งใน MRS broth ( 1 % v / v ) ที่อุณหภูมิ 37 องศา C เป็นเวลา 20 ชั่วโมงก่อนใช้โปรแกรม เซลล์จาก 100 ml คุณนายวัฒนธรรมถูกเก็บเกี่ยวโดยการปั่นเหวี่ยง ( 4300g , 10 นาที ) และฟอสเฟต เกลือล้างสามครั้งในบัฟเฟอร์พีเอช 7.0 . ล้างขี้แล้วเซลล์แขวนลอยใน ( 1 / 10 ) ปริมาณการเพาะปลูกในบัฟเฟอร์เดียวกันจึงได้รับ 10 พับเพิ่มความหนาแน่นของเซลล์ 1 มิลลิลิตรของล้างเซลล์แขวนลอย , 5 ml ของน้ำขนาด 1.5 ml ) กระเพาะอาหาร ( 0.5 w / v ) มีการเพิ่ม จำลองในน้ำมะนาวเตรียมสดทุกวันโดยระงับเพพซิน ( 3 กรัม / ลิตร ) ในน้ำเกลือปลอดเชื้อ ( 0.5% ( w / v ) และปรับ pH ด้วยกรดไฮโดรคลอริกเข้มข้น 2.0 ( ชาร์เตอริส et al . , 1998 ) วัสดุที่ vortexed 10 และบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 3 ชั่วโมง เฉยๆ 0.1 มิลลิลิตร แล้วลบออกในช่วงเวลาคงที่ ( 0 , 1 , 2 , 3 H ) สำหรับการหาผลรวมได้นับ วิธีการทำ ( ถึง 10 − 4 ) และเซลล์มีการชุบซ้ำบนนางวุ้น จานถูกบ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 72 ชั่วโมงก่อนการแจงนับ ( ชาร์เตอริส et al . , 1998 )