Bacterial strains and growth condit

Bacterial strains and growth conditions Thirteen E. coli strains, pathogenic and non-pathogenic, were included in the study (Table 1). The strains were grown in Luria Bertoni broth (LB) (Sigma-Aldrich, Missouri, USA) overnight at 37 °C, then diluted 1:100 in LB (rich nutrient broth) or Syncase broth (low iron content, contains less than 0.5 μg of Fe3+ per ml) [22]. From each of the 1:100 dilutions 250 μl of the strains were distributed to each well in the 96-well NunclonTMSurface microtiter plates (Nunc AS, Roskilde, Denmark). The inoculum concentration was 1x105-5x106 colony forming units. Different concentrations of bovine lactoferrin (approximately 15% iron-saturated, DMW International, Veghel, Netherlands) were added to the wells and incubated at 37 °C in a microtiter plate reader (Sunrise Remote Control, Tecan, Salzburg, Austria). To measure bacterial growth, optical density was monitored at wavelength 620 nm every 15 min for 18 hours (1080 minutes). The start inoculum and the negative control, growth medium without bacteria, had similar OD detection level (≥0.1). The modeled growth curves were based on empirical triplicate measures of bacterial growth from each sample. Positive controls were 250 μl of all E. coli isolates grown in both LB and Syncase broth with added water (50 μl) in order to obtain identical volumes for all samples. All E. coli strains were cultured using 3 and 8 mg/ml of lactoferrin (Lf ) when grown in LB broth, in addition to the positive control without lactoferrin. In Syncase broth, a defined growth media with low iron content, 0.5, and 3 mg/ml of lactoferrin were added, in addition to the positive control without lactoferrin. 8 mg/ml lactoferrin was also added to Syncase broth, but since most strains were totally inhibited by 3 mg/ml these results were not included in this study.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

สายพันธุ์แบคทีเรียและสภาวะการเจริญเติบโตสิบสามสายพันธุ์อีโคไล, ที่ทำให้เกิดโรคและไม่ก่อโรคถูกรวมอยู่ในการศึกษา (ตารางที่ 1) สายพันธุ์ที่ปลูกใน Luria Bertoni น้ำซุป (LB) (Sigma-Aldrich มิสซูรีสหรัฐอเมริกา) ค้างคืนที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสจากนั้นเจือจาง 1: 100 ปอนด์ (น้ำซุปสารอาหารที่อุดมไปด้วย) หรือน้ำซุป Syncase (ธาตุเหล็กต่ำมีน้อยกว่า 0.5 ไมโครกรัมของ Fe3 + ต่อมล.) [22] จากแต่ละที่ 1: 100 เจือจาง 250 ไมโครลิตรของสายพันธุ์ที่มีการกระจายไปยังแต่ละดีใน 96 หลุม NunclonTMSurface แผ่นไมโคร (Nunc AS, กิลด์, เดนมาร์ก) ความเข้มข้นของเชื้อเป็น 1x105-5x106 อาณานิคมสร้างหน่วย ความเข้มข้นแตกต่างกันของ lactoferrin วัว (ประมาณ 15% เหล็กอิ่มตัว DMW นานาชาติ Veghel, Netherlands) ถูกเพิ่มเข้าไปในหลุมและบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสในการอ่านแผ่นไมโคร (Sunrise รีโมทคอนโทรล, Tecan, Salzburg, ออสเตรีย) การวัดการเจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรีย, ความหนาแน่นของออปติคอลได้รับการตรวจสอบที่ความยาวคลื่น 620 นาโนเมตรทุก 15 นาทีเป็นเวลา 18 ชั่วโมง (1,080 นาที) หัวเชื้อเริ่มต้นและการควบคุมเชิงลบกลางการเจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรียโดยไม่ต้องมี OD ที่คล้ายกันระดับการตรวจสอบ (≥0.1) เส้นโค้งการเจริญเติบโตรูปแบบขึ้นอยู่กับมาตรการเพิ่มขึ้นสามเท่าเชิงประจักษ์ของการเจริญเติบโตของเชื้อแบคทีเรียจากแต่ละตัวอย่าง ควบคุมบวก 250 ไมโครลิตรของเชื้อ E. coli แยกเติบโตทั้งในปอนด์และน้ำซุป Syncase ด้วยน้ำเพิ่ม (50 ไมโครลิตร) เพื่อให้ได้ปริมาณเหมือนกันสำหรับทุกตัวอย่าง ทั้งหมดอีโคไลสายพันธุ์ที่ถูกเลี้ยงโดยใช้ 3 และ 8 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร lactoferrin (LF) เมื่อปลูกในน้ำซุป LB นอกเหนือไปจากการควบคุมในเชิงบวกโดยไม่ต้อง lactoferrin ในน้ำซุป Syncase สื่อการเจริญเติบโตที่กำหนดด้วยธาตุเหล็กต่ำ, 0.5, และ 3 มิลลิกรัม / มิลลิลิตร lactoferrin ถูกเพิ่มนอกเหนือไปจากการควบคุมในเชิงบวกโดยไม่ต้อง lactoferrin 8 mg / ml lactoferrin ถูกบันทึกไปยังน้ำซุป Syncase แต่เนื่องจากสายพันธุ์ส่วนใหญ่ถูกยับยั้งโดยสิ้นเชิง 3 mg / ml ผลลัพธ์เหล่านี้ไม่รวมอยู่ในการศึกษาครั้งนี้

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

สายพันธุ์แบคทีเรีย E . coli และเงื่อนไขการเจริญเติบโตสิบสามสายพันธุ์ก่อโรคและไม่ก่อโรค ถูกรวมอยู่ในการศึกษา ( ตารางที่ 1 ) สายพันธุ์ที่ปลูกในน้ำซุปเบอร์โตลุเรีย ( ปอนด์ ) ( ซิกม่า Aldrich , Missouri , USA ) ค้างคืนที่ 37 ° C แล้วเจือจาง 1 : 100 ในปอนด์ ( ซุปรวย nutrient broth ( ) หรือ syncase ปริมาณเหล็กต่ำประกอบด้วยน้อยกว่า 0.5 กรัมต่อมิลลิลิตร μ fe3 ) [ 22 ] จากแต่ละแห่ง 1100 วิธีการ 250 μ L ของสายพันธุ์ กระจายกันใน 96 ดี nunclontmsurface ไมโครจาน ( ขณะนี้เป็น , Roskilde , เดนมาร์ก ) ความเข้มข้นของเชื้อ 1x105-5x106 อาณานิคมสร้างหน่วย ระดับความเข้มข้นของหัวใจวัว ( ประมาณ 15 % เหล็กอิ่มตัว dmw Veghel นานาชาติ ,เนเธอร์แลนด์ ) ถูกเพิ่มไปยังบ่อบ่มที่ 37 ° C ในไมโครเพลทอ่าน ( พระอาทิตย์ขึ้นการควบคุมระยะไกลทีแคนซัลซ์บวร์ก ออสเตรีย ) วัดการเจริญเติบโตของแบคทีเรีย , ความหนาแน่นของแสงถูกตรวจสอบที่ความยาวคลื่น 620 nm ทุก 15 นาที 18 ชั่วโมง ( 1080 นาที ) ต้นเชื้อและควบคุมลบ อาหารเลี้ยงเชื้อปราศจากแบคทีเรีย มีระดับการตรวจจับ OD ที่คล้ายกัน ( ≥ 0.1 )แบบจำลองการเจริญเติบโตของเส้นโค้งตามมาตรการเชิงประจักษ์จากการทำสำเนาสามฉบับจากแต่ละตัวอย่าง การควบคุมบวกจำนวน 250 μ l ( E . ทุกสายพันธุ์ที่ปลูกในทั้งปอนด์และเพิ่มน้ำซุปกับ syncase ( 50 μ L ) เพื่อให้ได้ปริมาณที่เหมือนกันสำหรับทุกตัวอย่าง ทั้งหมดที่ E . coli สายพันธุ์เพาะเลี้ยงโดยใช้ 3 และ 8 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตร แลคโตเฟอร์ริน ( LF ) เมื่อปลูกในน้ำซุปปอนด์นอกจากการควบคุมบวกไม่มีหัวใจ . ในน้ำซุป syncase การกําหนดการสื่อกับปริมาณเหล็กต่ำ , 0.5 และ 1 มิลลิกรัมต่อมิลลิลิตรของหัวใจเพิ่มขึ้น นอกเหนือจากการควบคุมบวกไม่มีหัวใจ . 8 mg / ml Lactoferrin ก็เพิ่ม syncase ซุป แต่ที่พบมากที่สุด คือ ทั้งหมด ( 3 mg / ml ผลเหล่านี้ไม่ได้ถูกรวมอยู่ในการศึกษา .