Mechanism of induction by IPTGThe g

Mechanism of induction by IPTG

The gene coding for T7 RNA polymerase itself has been engineered into many commercially available E. coli strains under a modified lac operon system. You'll often see this called DE3 in the name of the E. coli strain i.e. BL21(DE3) cells. Instead of a T7 promoter sequence in front of the lac operator sequence, there is a lac promoter sequence that native E. coli RNA polymerase is able to bind. As soon as the lac repressor protein (LacI) falls of the lac operator sequence of DNA in the host chromosome, T7 RNA polymerase will be transcribed and translated. Some strains of E. coli add an additional gene coding for T7 lysozyme which inactivates the T7 promoter i.e. strains like BL21(DE3)pLysS. This keeps background expression levels of T7 RNA polymerase from expressing your protein prior to induction.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

กลไกการเหนี่ยวนำด้วย IPTGรหัสยีนสำหรับพอลิเมอเรส T7 อาร์เอ็นเอนั้นได้รับวิศวกรรมเป็นจำนวนมากในเชิงพาณิชย์ใช้ E. coli สายพันธุ์ภายใต้ระบบ operon ลัคแก้ไข นอกจากนี้คุณมักจะเห็นได้นี้เรียกว่า DE3 ใน E. coli สายพันธุ์เช่นเซลล์ BL21(DE3) แทนลำดับโปรโมเตอร์ T7 หน้าลำดับตัวลัค มีลำดับโปรโมเตอร์ลัค coli E. ที่เป็นอาร์เอ็นเอพอลิเมอเรสจะสามารถผูก เป็นโปรตีน lac repressor (LacI) ตกลัคดำเนินลำดับของดีเอ็นเอในโครโมโซมโฮสต์ T7 อาร์เอ็นเอพอลิเมอเรสจะทับศัพท์ และแปล บางสายพันธุ์ของ E. coli เพิ่มการเขียนโค้ดเพิ่มเติมยีนสำหรับ T7 lysozyme ซึ่งยกเลิกเรียกโปรโมเตอร์ T7 เช่นสายพันธุ์เช่น BL21 (DE3) pLysS นี้ช่วยให้ระดับพื้นหลังนิพจน์ T7 อาร์เอ็นเอพอลิเมอเรสจากโปรตีนของคุณก่อนที่จะเหนี่ยวนำแสดง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

กลไกของการเหนี่ยวนำโดยการ IPTG ยีนสำหรับโพลิเมอร์ T7 RNA ตัวเองได้รับการออกแบบเป็นหลายใช้ได้ในเชิงพาณิชย์ E. coli สายพันธุ์ภายใต้ระบบ Operon ครั่งแก้ไข คุณมักจะเห็นนี้เรียกว่า DE3 ในชื่อของสายพันธุ์เชื้อ E. coli เช่น BL21 (DE3) เซลล์ แทนที่จะลำดับโปรโมเตอร์ T7 ในด้านหน้าของผู้ประกอบการลำดับครั่งมีลำดับก่อการครั่งที่พื้นเมืองเชื้อ E. coli RNA polymerase สามารถที่จะผูก เร็วที่สุดเท่าที่โปรตีนครั่งอดกลั้น (Laci) ตกของลำดับประกอบครั่งของดีเอ็นเอในโครโมโซมโฮสต์ RNA polymerase T7 จะถูกคัดลอกและแปล บางสายพันธุ์ของเชื้อ E. coli เพิ่มยีนเพิ่มเติมสำหรับ lysozyme T7 ซึ่ง inactivates สายพันธุ์โปรโมเตอร์ T7 เช่นเช่น BL21 (DE3) pLysS ซึ่งจะทำให้ระดับการแสดงออกพื้นหลังของ T7 RNA polymerase จากการแสดงโปรตีนของคุณก่อนที่จะเหนี่ยวนำ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

กลไกของการเหนี่ยวนำ โดยโปรตีนยีนนะครับ

สำหรับ * * 3 อาร์เอ็นเอพอลิเมอเรสตัวเองได้รับการออกแบบใน E . coli สายพันธุ์หลายใช้ได้ในเชิงพาณิชย์ภายใต้การแก้ไข . kz ระบบ คุณมักจะเห็นนี้เรียกว่า DE3 ในชื่อของ E . coli สายพันธุ์ BL21 ( DE3 ) เช่น เซลล์ แทนที่จะเป็นโปรโมเตอร์ * * 3 ลำดับในด้านหน้าของครั่งผู้ประกอบการลำดับ ไม่มีแลค โปรโมเตอร์ลำดับที่พื้นเมือง .( อาร์เอ็นเอพอลิเมอเรสจะสามารถผูก ทันทีที่ครั่งผู้ควบคุมโปรตีน ( laci ) น้ำตกแห่งครั่งผู้ประกอบการลำดับดีเอ็นเอในโครโมโซม * * 3 โฮสต์ , อาร์เอ็นเอพอลิเมอเรสจะถูกคัดลอก และแปล บางสายพันธุ์ของเชื้ออีโคไลเพิ่มเพิ่มเติมยีนการเข้ารหัสสำหรับ * * 3 * * 3 inactivates ไลโซไซม์ซึ่งโปรโมเตอร์ได้แก่สายพันธุ์ BL21 ( DE3 ) เช่น plyss .นี้ช่วยให้ระดับการแสดงออกของอาร์เอ็นเอพอลิเมอเรสจากพื้นหลัง * * 3 แสดงโปรตีนของคุณก่อนที่จะป้อน