2.2.4. Determination of protein-pre

2.2.4. Determination of protein-precipitable phenolics
2.2.4.1. Determination of tannins (phenolics) in tannin–protein complex.
The precipitable protein phenolics as tannins was quantified by the
method described by Makkar (2003). Briefly, to a 2 ml of BSA solution
(containing 1 mg BSA/ml acetate buffer), suitable aliquots of PFJP were
taken in a test tube and mixed well before incubating at 4 °C overnight.
The contents were centrifuged at 3000 g for about 10 min and the
precipitatewas dissolved in 1.5 ml of 1% SDS solution. An aliquot of this
solutionwas mixedwith 3 ml of SDS-triethanolamine solution and 1 ml
ferric chloride (0.01M) and the absorbance at 510 nm (Model: UV–
VIS1700 Shimadzu, Japan) was recorded after 15–30 min. The amount
of tannins phenolics was calculated as tannic acid equivalent from the
calibration curve using standard tannic acid solution (0.5 mg/ml).
2.2.4.2. Determination of protein precipitable phenolics as percentage of
total phenolics. The protein precipitable phenolics as a percentage of
total phenolics was quantified by the method described by Makkar
(2003). Briefly, different aliquots of the PFJP was made up to 1 ml with
1 ml 1% SDS, and 3 ml SDS-triethanolaminewas added followed by 1 ml
of ferric chloride (0.01 M) and the absorbance at 510 nm (Model: UV–
VIS1700 Shimadzu, Japan) was recorded. The amount of total phenolics
was calculated as tannic acid equivalent fromthe calibration curve using
standard tannic acid solution (0.5 mg/ml). Protein precipitable phenolics
as percentage of total phenolics was calculated by following the
equation:
Protein precipitable phenolics ð%Þ = ðTannins phenolics = Total phenolicsÞ
× 100:
2.2.5. Determination of condensed tannins (proanthocyanidins)
The condensed tanninswere quantified by the method described by
Makkar (2003). Briefly, Aliquots of 25 or 50 μl PFJP made into 2.0ml
with 50% (v/v)methanolwasmixedwith 3.0 ml of Butanol–HCl reagent
followed by 0.1 ml ferric chloride reagent and kept in boilingwater bath
for 60 min. The absorbance was recorded at 550 nm (Model: UV–
VIS1700 Shimadzu, Japan) after cooling the tubes at room temperature
with suitable blank. The percent condensed tannins were calculated as
per extinction coefficient method: E1%, 1 cm, 550 nm of leucocyanidin 460.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

ใน 2.2.4. กำหนด phenolics โปรตีน precipitable2.2.4.1 การกำหนดชิม (phenolics) ชิม – โปรตีนคอมเพล็กซ์Phenolics โปรตีน precipitable เป็นชิมถูกวัดโดยการวิธีที่อธิบายไว้ โดย Makkar (2003) สั้น ๆ การ 2 มล.ของบีเอสเอ(ประกอบด้วยบัฟเฟอร์อะซิเตทบีเอส เอ/ml 1 มิลลิกรัม), aliquots เหมาะของ PFJP ได้ในหลอดทดลอง และผสมก่อน incubating ที่ 4 ° C ค้างคืนเนื้อหาถูกเหวี่ยงที่ 3000 กรัมประมาณ 10 นาทีและprecipitatewas ละลายใน 1.5 ml ของสารละลาย 1% SDS ส่วนลงตัวนี้solutionwas mixedwith SDS triethanolamine 3 มิลลิลิตร 1 มิลลิลิตรและการแก้ไขปัญหาคคลอไรด์ (0.01M) และ absorbance ที่ 510 nm (รุ่น: UV-VIS1700 Shimadzu ญี่ปุ่น) ถูกบันทึกไว้หลังจาก 15 – 30 นาที ยอดเงินชิม phenolics คำนวณเป็นกรดคสารเทียบจากการเส้นโค้งการสอบเทียบที่ใช้โซลูชันมาตรฐานคสารกรด (0.5 mg/ml)2.2.4.2 การวัดปริมาณของโปรตีน precipitable phenolics เป็นเปอร์เซ็นต์ของphenolics รวม Phenolics precipitable โปรตีนเป็นเปอร์เซ็นต์ของphenolics รวมถูกวัด โดยวิธีโดย Makkar(2003) . สั้น ๆ aliquots แตกต่างกันของ PFJP ที่ทำการถึง 1 มล.ด้วย1 มิลลิลิตร 1% SDS และ 3 มล. SDS triethanolaminewas เพิ่มตาม ด้วย 1 มล.คคลอไรด์ (0.01 M) และ absorbance ที่ 510 nm (รุ่น: UV-มีบันทึก VIS1700 Shimadzu ญี่ปุ่น) จำนวน phenolics รวมคำนวณเป็นกรดคสารเทียบจากการใช้เส้นโค้งการสอบเทียบการแก้ไขปัญหามาตรฐานคสารกรด (0.5 mg/ml) Phenolics precipitable โปรตีนเป็นเปอร์เซ็นต์ phenolics รวมคำนวณโดยการสมการ:โปรตีน precipitable phenolics ð%Þ = ðTannins phenolics = phenolicsÞ รวม× 100:2.2.5 การกำหนดข้นชิม (proanthocyanidins)Tanninswere ข้นที่วัด โดยวิธีโดยMakkar (2003) สั้น ๆ Aliquots ของ 25 หรือ 50 μl PFJP ทำเป็น 2.0mlมี 50% (v/v) methanolwasmixedwith 3.0 ml ของรีเอเจนต์วทานอ – HClตาม ด้วยรีเอเจนต์คคลอไรด์ 0.1 มล. และเก็บไว้ในห้องน้ำ boilingwater60 นาที Absorbance ที่ถูกบันทึกไว้ที่ 550 nm (รุ่น: UV-VIS1700 Shimadzu ญี่ปุ่น) หลังจากเย็นหลอดที่อุณหภูมิห้องด้วยการว่างเปล่าที่เหมาะสม คำนวณเป็นเปอร์เซ็นต์ข้นชิมต่อวิธีสัมประสิทธิ์การสูญเสีย: E1%, 1 ซม. 550 nm ของ leucocyanidin 460

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.2.4 ความมุ่งมั่นของฟีนอลโปรตีน precipitable
2.2.4.1 ความมุ่งมั่นของแทนนิน (ฟีนอล) ในการที่ซับซ้อนแทนนินโปรตีน.
ฟีนอลโปรตีน precipitable
เป็นแทนนินที่ถูกวัดโดยวิธีการอธิบายโดยMakkar (2003) สั้น ๆ ไป 2 มิลลิลิตรของการแก้ปัญหาบีเอสเอ
(ที่มี 1 มิลลิกรัมบีเอสเอ / บัฟเฟอร์อะซิเตทมล.) aliquots เหมาะสม PFJP
ถูกถ่ายในหลอดทดลองและนำมาผสมกันให้ดีก่อนการบ่มที่อุณหภูมิ4 องศาเซลเซียสในชั่วข้ามคืน.
เนื้อหาถูกหมุนเหวี่ยงที่ 3,000 กรัมประมาณ 10 นาทีและ
precipitatewas ละลายใน 1.5 มิลลิลิตรสารละลาย 1% SDS aliquot นี้
solutionwas mixedwith 3 มล. ของการแก้ปัญหาระบบ SDS-triethanolamine 1
มิลลิลิตรและคลอไรด์เฟอริก(0.01M) และการดูดกลืนแสงที่ 510 นาโนเมตร (แบบ: รังสียูวี
VIS1700 Shimadzu ญี่ปุ่น) จะถูกบันทึกหลังจาก 15-30 นาที จำนวนเงินของแทนนินฟีนอลที่คำนวณได้เท่ากับกรดแทนนิคจากกราฟมาตรฐานใช้วิธีกรดแทนนิคมาตรฐาน(0.5 mg / ml). 2.2.4.2 ความมุ่งมั่นของฟีนอลโปรตีน precipitable เป็นร้อยละของฟีนอลรวม ฟีนอลโปรตีน precipitable เป็นร้อยละของฟีนอลรวมถูกวัดโดยวิธีการที่อธิบายโดยMakkar (2003) สั้น ๆ , aliquots ที่แตกต่างกันของ PFJP ถูกสร้างขึ้นมาได้ถึง 1 มล. กับ1 มิลลิลิตร 1% SDS และ 3 มล. SDS-triethanolaminewas เพิ่มผู้ติดตาม 1 มิลลิลิตรของเฟอริกคลอไรด์(0.01 M) และการดูดกลืนแสงที่ 510 นาโนเมตร (แบบ: รังสียูวีVIS1700 Shimadzu ญี่ปุ่น) จะถูกบันทึก ปริมาณของฟีนอลรวมที่คำนวณได้เท่ากับกรดแทนนิค fromthe กราฟมาตรฐานโดยใช้สารละลายกรดแทนนิคมาตรฐาน(0.5 mg / ml) โปรตีนฟีนอล precipitable เป็นร้อยละของฟีนอลรวมที่คำนวณได้จากต่อไปนี้สม: โปรตีนฟีนอล precipitable% d = ÞðTanninsฟีนอล = รวมphenolicsÞ× 100: 2.2.5 ความมุ่งมั่นของแทนนินข้น (proanthocyanidins) tanninswere ข้นวัดโดยวิธีการที่อธิบายโดยMakkar (2003) สั้น ๆ , aliquots 25 หรือ 50 ไมโครลิตร PFJP ทำให้เป็น 2.0ml 50% (v / v) methanolwasmixedwith 3.0 มลสาร Butanol-HCl ตามด้วย 0.1 มลสารเฟอริกคลอไรด์และเก็บไว้ในห้องอาบน้ำ boilingwater 60 นาที การดูดกลืนแสงที่ถูกบันทึกไว้ที่ 550 นาโนเมตร (แบบ: รังสียูวีVIS1700 Shimadzu, ญี่ปุ่น) หลังจากที่ระบายความร้อนหลอดที่อุณหภูมิห้องด้วยว่างเปล่าที่เหมาะสม ร้อยละแทนนินข้นถูกคำนวณเป็นต่อการสูญเสียค่าสัมประสิทธิ์วิธีการ: E1% 1 ซม 550 นาโนเมตรของ leucocyanidin 460