Multiple lots of matrix were assess

Multiple lots of matrix were assessed to determine if any additional variability found during this method validation could be attributed to the analysis of multiple lots of matrix. Human acidified blood inter-lot chromatographic selectivity was evaluated by preparing control blanks and zero samples in six lots of human control acidified blood samples and comparing the peak area ratios (PAR) of each zero sample to the mean PAR of the LLOQ calibration standard samples analyzed within the same run. The results from the acidified blood inter-lot chromatographic selectivity experiment for 13C5-NAD+ in six different lots of human acidified blood showed no response for 13C5-NAD+ in the control (blank acidified blood). But there was a trace amount response of 13C5-NAD+ in the zero sample with IS (13C5D3-NAD+). This indicated that there was some contribution from the possible impurity of IS. The peak area was measured and it was smaller than 20% of the LLOQ peak area, which was acceptable from regulatory standards. The selectivity of the method was also evaluated during each regressed validation run by LC–MS/MS to monitor for possible interfering peaks at the same chromatographic retention times as the analyte and IS. No significant chromatographic interferences were detected at the retention time of the analyte or IS as shown in Fig. 2.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

มายหลายเมทริกซ์ถูกประเมินเพื่อตรวจสอบถ้าพบระหว่างการตรวจสอบวิธีนี้สำหรับความผันผวนใด ๆ เพิ่มเติมอาจเกิดจากการวิเคราะห์ของเมทริกซ์มากมายหลาย เลือดมนุษย์ acidified มากระหว่าง chromatographic ใวถูกประเมิน โดยเตรียมช่องควบคุม และศูนย์ตัวอย่างใน 6 อย่างเลือดมนุษย์ควบคุม acidified และเปรียบเทียบอัตราที่ตั้งสูงสุด (ราคาพาร์) ของแต่ละตัวอย่างศูนย์การค่าเฉลี่ยราคาพาร์ LLOQ เทียบมาตรฐานตัวอย่างวิเคราะห์ภายในเหมือนรัน ผลลัพธ์จากวิธี chromatographic มากระหว่างการเลือด acidified ทดลองสำหรับ 13 C 5-และ + ในจำนวนแตกต่างกันหกเลือด acidified มนุษย์พบว่าไม่มีคำตอบสำหรับ 13 C 5-และ + ควบคุม (เปล่า acidified เลือด) แต่มีการตอบสนองยอดติดตามของ 13C 5-และ + ในตัวอย่างศูนย์กับ IS (13C5D3-และ +) ระบุว่า มีบางส่วนจากมลทินได้ของ IS พื้นที่สูงสุดที่วัด และก็มีขนาดเล็กกว่า 20% ของ LLOQ สูงสุด ซึ่งเป็นที่ยอมรับจากมาตรฐานการกำกับดูแล วิธีวิธีถูกยังประเมินระหว่างแต่ละมีการตรวจสอบโดย LC – MS/MS ตรวจเวลารักษา chromatographic เดียวเป็น analyte ยอดสุดรบกวนและ IS ตรวจพบ interferences chromatographic ไม่สำคัญที่เวลาเก็บรักษาของ analyte หรือ IS มาก Fig. 2

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

จำนวนมากหลายของเมทริกซ์ได้รับการประเมินเพื่อตรวจสอบว่าความแปรปรวนเพิ่มเติมใด ๆ ที่พบในระหว่างการตรวจสอบวิธีการนี​​้สามารถนำมาประกอบกับการวิเคราะห์จำนวนมากหลายของเมทริกซ์ เลือดกรดมนุษย์เลือกระหว่างจำนวนมากโครมาถูกประเมินโดยการเตรียมช่องว่างการควบคุมและการเป็นศูนย์ตัวอย่างในหกจำนวนมากจากการควบคุมของมนุษย์กรดตัวอย่างเลือดและเปรียบเทียบอัตราส่วนพื้นที่สูงสุด (PAR) ของแต่ละตัวอย่างศูนย์ถึงค่าเฉลี่ย PAR ตัวอย่างมาตรฐานการสอบเทียบ LLOQ วิเคราะห์ ภายในระยะเดียวกัน ผลจากกรดในเลือดระหว่างการทดลองจำนวนมากเลือกสำหรับโครมา 13C5-NAD + หกจำนวนมากที่แตกต่างกันของกรดในเลือดของมนุษย์ที่แสดงให้เห็นการตอบสนองไม่มี 13C5-NAD + ในการควบคุม (เลือดกรดว่าง) แต่มีการตอบสนองจำนวนร่องรอยของ 13C5-NAD + ในตัวอย่างเป็นศูนย์ (13C5D3-NAD +) แสดงให้เห็นว่ามีผลงานบางส่วนจากการปนเปื้อนที่เป็นไปได้ของการเป็น บริเวณยอดเขาวัดและมันก็มีขนาดเล็กลงกว่า 20% ของพื้นที่ LLOQ สูงสุดซึ่งได้รับการยอมรับจากมาตรฐานการกำกับดูแล การเลือกของวิธีการที่ได้รับการประเมินในแต่ละการตรวจสอบถดถอยที่ดำเนินการโดย LC-MS / MS สำหรับการตรวจสอบยอดการรบกวนที่เป็นไปได้ในเวลาที่การเก็บรักษาเช่นเดียวกับโครมาวิเคราะห์และ IS ไม่มีโครมารบกวนอย่างมีนัยสำคัญที่ตรวจพบในช่วงเวลาการเก็บรักษาวิเคราะห์หรือ IS ดังแสดงในรูป 2

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

หลาย ๆของเมทริกซ์มีการประเมินเพื่อตรวจสอบว่าใด ๆของวิธีการตรวจสอบเพิ่มเติมพบในระหว่างนี้อาจจะเกิดจากการวิเคราะห์ของหลาย ๆของเมทริกซ์ มนุษย์เลือดระหว่างการปรับมาก และประเมินโดยการเตรียมการควบคุมช่องว่างและศูนย์ตัวอย่างในหกมากมายมนุษย์ควบคุมปรับเลือด และเปรียบเทียบอัตราส่วนพื้นที่สูงสุด ( PAR ) ของแต่ละศูนย์ตัวอย่างเพื่อหมายถึงหุ้นของการสอบเทียบมาตรฐาน lloq ตัวอย่างวิเคราะห์ภายในวิ่งเดียวกัน จากผลเลือดมาก และการปรับระหว่างการทดลองเพื่อ 13c5-nad + 6 มากมายที่แตกต่างกันของมนุษย์ปรับเลือด ไม่พบการ 13c5-nad + ในการควบคุม ( ว่างปรับเลือด ) แต่ก็ติดตามปริมาณการตอบสนองของ 13c5-nad + ในศูนย์ตัวอย่าง ( 13c5d3-nad + ) นี้พบว่ามีการสนับสนุนจากที่สุดบริสุทธิ์ของเป็น พื้นที่สูงสุดวัดได้ และมันมีขนาดเล็กกว่า 20 % ของพื้นที่ lloq สูงสุดซึ่งเป็นที่ยอมรับจากมาตรฐานบังคับ การเลือกเกิดของวิธีการประเมินในแต่ละกลับไปตรวจสอบดำเนินการโดย LC MS / MS ) เพื่อตรวจสอบที่เป็นไปได้รบกวนยอดพร้อมกัน และเวลากักเป็นครูและเป็น . ไม่มีการแทรกแซง และถูกตรวจพบในเวลาที่สำคัญของครู หรือ ดังแสดงในรูปที่ 2