3.5. Epifluorescence and phase-cont

3.5. Epifluorescence and phase-contrast microscopy observations
3.5.1. LIVE/DEAD BacLight stained cells
L. monocytogenes LGB LIVE/DEAD BacLight stained cells were
observed by epifluorescence microscopy to assess the physiological
state of the cells. Based on the number of examined fields, only E
and D samples (Table 1), giving no more than a 3 Log cfu/mL cell
reduction, were considered. The results demonstrated a substantial
correspondence of the number of dead cells obtained either by
non-selective medium counts or by PI staining. Limited to the
above treatments, these results seem to indicate that the adopted
procedure for L. monocytogenes LGB injured cell repair is effective.
Indeed, besides the medium composition, temperature selection is
considered of paramount importance for the recovery of injured
L. monocytogenes cells, with an optimum value from 15 C to 20 C
(Koseki & Yamamoto, 2007).
The above correspondence was also observed by Smelt, Rijike, &
Hayhurst (1994) for the pressure inactivation of L. plantarum
exponential phase cells. Contrarily, starting from stationary phase
cultures, a proportion of dead cells not able to uptake PI was
detected in L. monocytogenes (Ritz, Thozolan, Federighi, & Pilet,
2001) and Lactobacillus rhamnosus (Ananta & Knorr, 2009), supporting
the hypothesis that some dead cells can still maintain
membrane integrity. Studying pressure inactivation and the PI
uptake kinetics in L. plantarum, Ulmer et al. (2000) concluded that
irreversible membrane damage occurred after cell death. In view of
this last conclusion, a possible reason for the correspondence
observed in this study between cell death and PI uptake may rely
on the elapsed time in a hostile medium (wild berry smoothies)
before cell staining. Beyond the pressure stress, this delay may
contribute at first to cell death and then to membrane damage.
Indeed, in electroporation experiments, it is well known that
electroporated cultures can be recovered only by their immediate
transfer from electroporation buffer to the appropriate recovery
medium.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

3.5 สังเกต microscopy Epifluorescence และระยะความคมชัด3.5.1. LIVE คนตาย BacLight สีเซลล์L. monocytogenes LGB LIVE/ตาย BacLight สีเซลล์ได้ตรวจสอบ โดย epifluorescence microscopy เพื่อประเมินการสรีรวิทยาสถานะของเซลล์ ตามหมายเลขของฟิลด์ที่กล่าวถึง E เท่านั้นและ D ตัวอย่าง (ตาราง 1), ให้ไม่มากกว่าเซลล์ 3 ล็อก cfu/mLลด ได้ถือ ผลลัพธ์ที่แสดงเป็นสำคัญติดต่อจำนวนของเซลล์ที่ตายแล้วได้อย่างใดอย่างหนึ่งโดยสื่อไม่ใช้นับ หรือ PI ย้อมสี จำกัดเหนือรักษา ผลลัพธ์เหล่านี้ดูเหมือนจะ บ่งชี้ว่า การนำมาใช้ขั้นตอนการซ่อมเซลล์ L. monocytogenes LGB ที่บาดเจ็บมีผลบังคับใช้แน่นอน นอกเหนือจากองค์ประกอบกลาง เลือกอุณหภูมิได้ถือว่าใจมีความสำคัญสำหรับการฟื้นตัวของบาดเจ็บL. monocytogenes เซลล์ มีค่าสูงสุดจาก 15 C ถึง 20 C(Koseki และยามาโมโตะ 2007)จดหมายข้างต้นยังถูกสังเกต โดยมัด Rijike, &Hayhurst (1994) สำหรับยกเลิกการดันเรียกของ L. plantarumเซลล์ระยะเนน เริ่มต้นจากระยะเครื่องเขียนหรือวัฒนธรรม สัดส่วนของเซลล์ที่ตายแล้วไม่สามารถดูดซับ PI ได้พบใน L. monocytogenes (ริทซ์ Thozolan, Federighi, & Piletปี 2001) และแลคโตบาซิลลัส rhamnosus (อนันต & Knorr, 2009), สนับสนุนสมมติฐานที่ยังคงสามารถรักษาเซลล์บางส่วนตายความสอดคล้องของเมมเบรน ศึกษายกเลิกการเรียกความดันและ PIดูดซับจลนพลศาสตร์ใน L. plantarum, Ulmer et al. (2000) ได้ที่เมมเบรนควมเสียหายที่เกิดขึ้นหลังจากเซลล์ตาย ในมุมมองของบทสรุปสุดท้ายนี้ สาเหตุเกี่ยวข้องกันได้สังเกตอาจอาศัยดูดซับในการศึกษานี้ระหว่างเซลล์ตายและ PIเวลาผ่านไปในกลางศัตรู (น้ำปั่นเบอร์รี่ป่า)ก่อนย้อมสีเซลล์ด้วย นอกเหนือจากความเครียดความกดดัน ความล่าช้านี้อาจนำที่แรกเซลล์ที่ตาย แล้ว กับเมมเบรนความเสียหายแน่นอน ในการทดลอง electroporation มันเป็นที่รู้จักที่electroporated วัฒนธรรมสามารถกู้คืน โดยพวกเขาทันทีโอนย้ายจาก electroporation บัฟเฟอร์การกู้คืนที่เหมาะสมสื่อ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

3.5 . epifluorescence ระยะความคมชัดและใช้สังเกต
3.5.1 . สด / ตาย baclight ย้อมเซลล์
L monocytogenes lgb สด / ตาย baclight ย้อมเซลล์มี
สังเกตด้วยกล้องจุลทรรศน์ epifluorescence การประเมินสภาพทางสรีรวิทยา
ของเซลล์ ขึ้นอยู่กับจำนวนของการตรวจสอบเขตข้อมูลเฉพาะ E
D ตัวอย่าง ( ตารางที่ 1 ) ให้ไม่เกิน 3 log CFU / ml เซลล์
ลด พิจารณาด้วยผลการศึกษาแสดงให้เห็นเป็นรูปธรรม
จดหมายของจำนวนเซลล์ที่ตายได้เหมือนกัน โดย ไม่นับ หรือเลือกขนาดกลาง
pi staining (
ข้างบน รักษาผลเหล่านี้ดูเหมือนจะบ่งชี้ว่า การใช้กระบวนการ monocytogenes lgb บาดเจ็บ
L เซลล์ซ่อมแซมที่มีประสิทธิภาพ .
แน่นอน นอกจากนี้สื่อองค์ประกอบ การเลือกอุณหภูมิ
ถือว่าเป็นสิ่งที่สำคัญที่สุดสำหรับการกู้คืนของบาดเจ็บ
L monocytogenes เซลล์ ด้วยมูลค่าที่เหมาะสมจาก 15  C 20  C
( koseki &ยามาโมโตะ , 2007 ) .
จดหมายข้างต้น พบว่า โดย rijike &หลอมเหลว , ,
hayhurst ( 1994 ) สำหรับความดันใช้งานของ L . plantarum
ชี้แจงระยะที่เซลล์ . อย่างตรงกันข้าม เริ่มจากวัฒนธรรมเฟส
เครื่องเขียนสัดส่วนของเซลล์ที่ตาย ไม่สามารถใช้ปี่ถูกตรวจพบใน monocytogenes ( Ritz
L thozolan Federighi , , ,
pilet & , 2001 ) และแลคโตบาซิลัส rhamnosus ( อนันต&นอร์ , 2009 ) สนับสนุนสมมติฐานที่ว่า บางเซลล์ที่ตาย

โดยยังสามารถรักษาความสมบูรณ์ การศึกษาทำให้ความดันและ PI
ใช้จลนศาสตร์ใน L . plantarum Ulmer et al . ( 2000 ) สรุปว่า
ทั้งนี้ ความเสียหายที่เกิดขึ้นหลังจากการตายของเซลล์เยื่อ . ในมุมมองของ
สรุปสุดท้าย เหตุผลที่เป็นไปได้สำหรับการติดต่อ
สังเกตในการศึกษาระหว่างการตายของเซลล์และการดูดซึมและอาจพึ่งพา
ในเวลาในสื่อที่เป็นมิตร ( ไวด์เบอรี่สมูทตี้ )
ก่อนที่เซลล์ staining นอกเหนือจากความดันความเครียด ความล่าช้าอาจ
มีส่วนร่วมที่แรกเซลล์ตายและสร้างความเสียหาย .
แน่นอนในการทดลอง electroporation มันเป็นที่รู้จักกันดีว่า
electroporated วัฒนธรรมสามารถกู้คืนโดยเฉพาะของพวกเขาทันที
โอนจากบัฟเฟอร์ไปยังสื่อการกู้คืน electroporation
เหมาะสม