We analyzed mitochondrial cytochrom

We analyzed mitochondrial cytochrome b (cyt b) gene sequences
from two mitten crabs, E. sinensis (GenBank Accession No.
NC_006992; Sun et al., 2005) and E. japonica (GenBank Accession
No. NC_011597). The sense primer (F 1) and antisense primer (R
498; 50-TCA GAT TCA TTG TAC TAG GTC G-30) were selected based
on the conserved region of the cyt b gene between E. sinensis and
E. japonica. The sense primer was designed with the PCR-RFLP
primer (F 1), and the antisense primer was designed using a one
site (double underline above) among the variation sites. The
amplification conditions used in this study were as follows: initial
denaturation for 11 min at 95 C followed by 35 cycles of 1 min at
94 C,1 min at 67 C, and 1 min at 72 C with a final 5 min extension
step at 72 C. The amplified samples were subjected to electrophoresis
on a 2.0% agarose gel.
PCR products were purified using PCR Purification Kits (Qiagen,
Hilden, Germany) and sequenced on an ABI3100 Prism automatic
DNA sequencer with the BigDye 3.1 Termination System (Applied
Biosystems, Foster City, CA, USA). After sequencing, the nucleotide
sequence of the cyt b gene from E. sinensis was analyzed using the
software Genetyx version 7.0 (Software Development Co., Ltd.,
Tokyo, Japan).
Fig. 1.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เราวิเคราะห์ลำดับยีน mitochondrial cytochrome b (cyt b)จากสอง mitten ปู E. sinensis (GenBank ทะเบียนเลขNC_006992 ซัน et al., 2005) และ E. japonica (ทะเบียน GenBank555 NC_011597) ความรู้สึกสีรองพื้น (F 1) และรองพื้น antisense (R498 50-TCA แกทพ้อยท์ TCA TTG มาตรวัดป้าย GTC G-30) ได้เลือกใช้ในภูมิภาคนำของยีน b cyt ระหว่าง E. sinensis และE. japonica รองพื้นรู้สึกถูกออกแบบ ด้วย PCR-RFLPสีรองพื้น (F 1), และรองพื้น antisense ถูกออกแบบมาใช้เป็นไซต์ (ขีดเส้นใต้คู่ข้างบน) ในไซต์เปลี่ยนแปลง ที่ขยายเงื่อนไขที่ใช้ในการศึกษานี้มีดังนี้: ครั้งแรกdenaturation สำหรับ 11 นาทีที่ 95 C ตามรอบ 35 นาที 1 ที่94 C, 1 นาทีที่ 67 C และ 1 นาทีที่ 72 C ขยาย 5 นาทีสุดท้ายขั้นตอนที่ 72 C. ถูกต้องตัวอย่างเอาต์ electrophoresisใน 2.0% agarose เจผลิตภัณฑ์ PCR ได้บริสุทธิ์ใช้ชุดฟอก PCR (QiagenHilden เยอรมนี) และเรียงลำดับบนอัตโนมัติปริซึม ABI3100DNA sequencer กับระบบ 3.1 จ้าง BigDye (ประยุกต์Biosystems ฟอสเตอร์ City, CA, USA) หลังจากจัดลำดับ การนิวคลีโอไทด์ลำดับของยีน b cyt จาก E. sinensis ถูกวิเคราะห์โดยใช้การซอฟต์แวร์ Genetyx เวอร์ชัน 7.0 (ซอฟต์แวร์พัฒนา Co., Ltd.โตเกียว ญี่ปุ่น)Fig. 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เราวิเคราะห์ข cytochrome ยล (CYT ข) ลำดับยีน
จากสองนวมปูอี sinensis (GenBank เลข
NC_006992. อาทิตย์และคณะ, 2005) และอี japonica (GenBank คู่สัญญา
ที่ NC_011597) ไพรเมอร์ความรู้สึก (F 1) และไพร antisense (R
498; 50-TCA GAT TCA TTG TAC TAG GTC G-30) ได้รับการคัดเลือกขึ้นอยู่
กับพื้นที่ป่าสงวนของ CYT ขยีนระหว่างอีเนซิสและ
อี japonica ไพรเมอร์ความรู้สึกถูกออกแบบด้วย PCR-RFLP
ไพร (F 1) และไพร antisense ได้รับการออกแบบโดยใช้หนึ่ง
เว็บไซต์ (ขีดเส้นใต้สองด้านบน) ในเว็บไซต์รูปแบบ
เงื่อนไขการใช้เครื่องขยายเสียงที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้มีดังนี้เริ่มต้น
denaturation สำหรับ 11 นาทีที่ 95 C ตามด้วย 35 รอบ 1 นาทีที่?
94 C, 1 นาทีที่ 67 C และ 1 นาทีที่ 72 องศาและมี 5 ครั้งสุดท้าย? นาทีขยาย
ขั้นตอนที่ 72 องศาเซลเซียส ตัวอย่าง amplied ด้วย electrophoresis
บน 2.0% agarose เจล.
ผลิตภัณฑ์พีซีอาร์ถูกทำให้บริสุทธิ์โดยใช้ชุดอุปกรณ์ PCR บริสุทธิ์ (Qiagen,
ฮิลเดน, เยอรมนี) และติดใจในปริซึม ABI3100 อัตโนมัติ
ซีเควนดีเอ็นเอกับ BigDye 3.1 ระบบการสิ้นสุด (Applied
Biosystems, ฟอสเตอร์ซิตี้ , CA, USA) หลังจากลำดับนิวคลีโอ
ลำดับของยีน CYT B จากอีเนซิสได้รับการวิเคราะห์โดยใช้
ซอฟแวร์ Genetyx รุ่น 7.0 (Software Development Co. , Ltd.
โตเกียวญี่ปุ่น).
รูป 1

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เราวิเคราะห์ไมโตคอนเดรียล ไซโตโครม บี ( cyt ลำดับยีน B )
2 E . นวมปู ไซแนนซิส ( ขนาดหนังสือไม่
nc_006992 ; Sun et al . , 2005 ) และ E . ญี่ปุ่น ( ขนาดไม่เข้า
nc_011597 ) ความรู้สึก ( F 1 ) รองพื้นและ primer ( R
antisense แล้ว ; 50-tca GAT TCA ทีทีจีแทค TAG GTC g-30 ) ได้รับการคัดเลือกจาก
ในเขตอนุรักษ์ของยีนระหว่าง cyt B และ E . ไซแนนซิส
E . ญี่ปุ่น .รู้สึกว่ารองพื้นถูกออกแบบด้วย
( F 1 ) ไพรเมอร์ , รองพื้นและ antisense ถูกออกแบบโดยใช้หนึ่ง
เว็บไซต์ ( ขีดเส้นใต้สองข้างต้น ) ในรูปแบบเว็บไซต์
( เงื่อนไขที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ เป็นดังนี้ : ครั้งแรก
( 11 นาทีที่ 95  C ตามด้วย 35 รอบ 1 นาทีที่ 94 
C 1 นาทีที่ 67  C และ 1 นาทีที่ 72  C สุดท้าย 5 นาทีที่ 72  นามสกุล
ขั้นตอน Cการขยายจำนวนรับเอนไซม์บนเจล 2.0 %
, .
ผลิตภัณฑ์ PCR เป็นบริสุทธิ์ใช้ PCR ( เพิ่มชุด , บำบัดน้ำเสีย
Hilden เยอรมนี ) และลำดับเบสใน DNA sequencer
abi3100 ปริซึมอัตโนมัติด้วยระบบ bigdye 3.1 การประยุกต์
Biosystems ฟอสเตอร์ ซิตี้ , แคลิฟอร์เนีย , สหรัฐอเมริกา หลังจากลำดับ , ลำดับนิวคลีโอไทด์ของยีน cyt
b จาก Eไซแนนซิส วิเคราะห์ข้อมูลโดยใช้โปรแกรม genetyx
รุ่น 7.0 ( Software Development Co . , Ltd .
โตเกียว , ญี่ปุ่น ) .
รูปที่ 1