วิเคราะห์หาสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการ

วิเคราะห์หาสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการพัฒนาวิธีทดสอบ BL ELISA โดยทำการเพาะเชื้อ C. chauvoei ในอาหารเลี้ยงเชื้อเหลว Liver infusion broth ภายใต้สภาวะไร้อากาศที่อุณหภูมิ 37°C และเตรียมแอนติเจน BL ในรูปของสารละลายน้ำ (Soluble prot2) โดยวิเคราะห์ขนาดโปรตีนด้วยวิธี Sodium Dodecyle Sulfate-PolyAcrylamide Gel Electrophoresis พบแถบโปรตีนเด่นๆ 4 แถบ ที่มีน้ำหนักโมเลกุลขนาด 37, 47, 72 เเละ 79 kDa ตามลำดับ ทดสอบแอนติเจน BL ด้วยวิธี Western Blotting พบว่าแอนติเจน BL ทำปฏิกิริยากับซีรั่มโค และแพะที่ติดเชื้อแบลคเลก จากนั้นนำไปวัดปริมาณโปรตีนด้วย BCA Protein Assay Kit สามารถนำไปใช้เป็นแอนติเจนในการพัฒนาวิธีตรวจวินิจฉัยโรคโค และแพะต่อไปได้ การทดสอบสภาวะที่เหมาะสมด้วยวิธี Indirect ELISA ด้วย Checker Board Titration พบว่า Antigen ที่ระดับการเจือจาง 10 µg/ml สามารถทำปฏิกิริยาอย่างเหมาะสมกับ Antiserum ของโคที่ติดเชื้อ BL ที่ระดับการเจือจาง 1 : 40 และตรวจสอบการเกิดปฏิกิริยาด้วย Conjugate ที่เจือจาง 1 : 4,000 โดย Diluents ที่เหมาะสม คือ 1%BSA ในการเจือจางซีรั่ม และ Conjugate เมื่อได้ผล Checker Board Titration นำมาทดสอบเบื้องต้นกับซีรั่มโคจำนวน 63 ตัวอย่าง วิเคราะห์หาความสัมพันธ์ของระดับค่าการตอบสนองทางภูมิคุ้มกัน พบว่าระดับไตเตอร์ในแต่ละ Dilution มีความสัมพันธ์เป็นไปในทิศทางเดียวกันกับ Positive serum ซึ่งแสดงให้เห็นว่าโคที่ได้รับวัคซีนแบลคเลกมีการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันได้ดี

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิเคราะห์หาสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการพัฒนาวิธีทดสอบ BL ELISA โดยทำการเพาะเชื้อ C. chauvoei ในอาหารเลี้ยงเชื้อเหลวตับคอนกรีตซุปภายใต้สภาวะไร้อากาศที่อุณหภูมิ 37° C และเตรียมแอนติเจน BL ในรูปของสารละลายน้ำ (ละลาย prot2) โดยวิเคราะห์ขนาดโปรตีนด้วยวิธีโซเดียม Dodecyle ซัลเฟต PolyAcrylamide เจ Electrophoresis พบแถบโปรตีนเด่น ๆ 4 แถบที่มีน้ำหนักโมเลกุลขนาด 37, 47, 72 เเละ 79 kDa ตามลำดับทดสอบแอนติเจน BL ด้วยวิธี blotting วิธีเวสเทิร์นพบว่าแอนติเจน BL ทำปฏิกิริยากับซีรั่มโคและแพะที่ติดเชื้อแบลคเลกจากนั้นนำไปวัดปริมาณโปรตีนด้วยชุดทดสอบโปรตีน BCA สามารถนำไปใช้เป็นแอนติเจนในการพัฒนาวิธีตรวจวินิจฉัยโรคโคและแพะต่อไปได้การทดสอบสภาวะที่เหมาะสมด้วยวิธีตรวจสอบ ELISA ทางอ้อมด้วยกระดานการไทเทรตพบว่าตรวจหาที่ระดับการเจือจาง 10 ไมโครกรัมเป็น เครื่อง/ml สามารถทำปฏิกิริยาอย่างเหมาะสมกับ Antiserum ของโคที่ติดเชื้อ BL ที่ระดับการเจือจาง 1:40 และตรวจสอบการเกิดปฏิกิริยาด้วยสังยุคเจือจาง 1:4000 โดยทำที่เหมาะสมคือ 1% บีเอสเอในการเจือจางซีรั่มและสังยุคเมื่อได้ผลการไทเทรตคณะตรวจนำมาทดสอบเบื้องต้นกับซีรั่มโคจำนวน 63 ตัวอย่างวิเคราะห์หาความสัมพันธ์ของระดับค่าการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันพบว่าระดับไตเตอร์ในแต่ละเจือจางมีความสัมพันธ์เป็นไปในทิศทางเดียวกันกับเซรั่มบวกซึ่งแสดงให้เห็นว่าโคที่ได้รับวัคซีนแบลคเลกมีการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันได้ดี

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

BL ELISA โดยทำการเพาะเชื้อ C. chauvoei ในอาหารเลี้ยงเชื้อเหลวแช่น้ำซุปตับภายใต้สภาวะไร้อากาศที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสและเตรียมแอนติเจน BL ในรูปของสารละลายน้ำ (Soluble prot2) โดยวิเคราะห์ขนาดโปรตีนด้วยวิธีโซเดียม Dodecyle Sulfate- อะคริเลตเจล Electrophoresis พบแถบโปรตีนเด่น ๆ 4 แถบที่มีน้ำหนักโมเลกุลขนาด 37, 47, 72 เเละ 79 กิโลดาลตันตามลำดับทดสอบแอนติเจน BL ด้วยวิธี Western blotting พบว่าแอนติเจน BL ทำปฏิกิริยากับซีรั่มโคและแพะที่ติดเชื้อแบ ลคเลกจากนั้นนำไปวัดปริมาณโปรตีนด้วยโปรตีน BCA Assay Kit และแพะต่อไปได้การทดสอบสภาวะที่เหมาะสมด้วยวิธีทางอ้อม ELISA ด้วยตัวตรวจสอบคณะกรรมการการไตเตรทพบว่า Antigen ที่ระดับการเจือจาง 10 ไมโครกรัม / มล. สามารถทำปฏิกิริยาอย่างเหมาะสมกับ antiserum ของโคที่ติดเชื้อ BL ที่ระดับการเจือจาง 1: 40 และ ตรวจสอบการเกิดปฏิกิริยาด้วย Conjugate ที่เจือจาง 1: 4,000 โดยสารที่เหมาะสมคือ 1% บีเอสเอในการเจือจางซีรั่มและผันเมื่อได้ผลคณะกรรมการตรวจสอบการไตเตรท 63 ตัวอย่าง พบว่าระดับไตเตอร์ในแต่ละเจือจาง ซีรั่มในเชิงบวก

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิเคราะห์หาสภาวะที่เหมาะสมสำหรับการพัฒนาวิธีทดสอบ BL ELISA โดยทำการเพาะเชื้อ Cchauvoei ในอาหารเลี้ยงเชื้อเหลว infusion broth ตับภายใต้สภาวะไร้อากาศที่อุณหภูมิ 37 °องศาเซลเซียสและเตรียมแอนติเจน BL ในรูปของสารละลายน้ำ ( ละลาย prot2 ) โดยวิเคราะห์ขนาดโปรตีนด้วยวิธีโซเดียม dodecyle sulfate polyacrylamide gel electrophoresis พบแถบโปรตีนเด่นๆ 4 แถบ374772 เเละ 79 kDa ตามลำดับทดสอบแอนติเจน BL ด้วยวิธี Western blotting พบว่าแอนติเจน BL ทำปฏิกิริยากับซีรั่มโคและแพะที่ติดเชื้อแบลคเลกจากนั้นนำไปวัดปริมาณโปรตีนด้วย BCA ( ชุดโปรตีนและแพะต่อไปได้การทดสอบสภาวะที่เหมาะสมด้วยวิธีวิธี indirect ELISA ด้วยคณะกรรมการตรวจสอบไตเตรชั่นพบว่าแอนติเจนที่ระดับการเจือจาง 10 µ g / ml พบว่าสามารถทำปฏิกิริยาอย่างเหมาะสมกับของโคที่ติดเชื้อ BL ที่ระดับการเจือจาง 140 และตรวจสอบการเกิดปฏิกิริยาด้วยผันที่เจือจาง 1 : 4000 โดยสารที่เหมาะสมความ 1 % BSA ในการเจือจางซีรั่มและ ) คณะกรรมการตรวจสอบเมื่อได้ผลไทเทรตนำมาทดสอบเบื้องต้นกับซีรั่มโคจำนวน 63 ตัวอย่างวิเคราะห์หาความสัมพันธ์ของระดับค่าการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันเจือจางซีรั่มซึ่งแสดงให้เห็นว่าโคที่ได้รับวัคซีนแบลคเลกมีการตอบสนองทางภูมิคุ้มกันได้ดีมีความสัมพันธ์เป็นไปในทิศทางเดียวกันกับบวก