Quantitative analysis of biofilm wa

Quantitative analysis of biofilm was performed by adding 200 μL of 33% (v/v) glacial acetic acid (Merck, Darmstadt, Germany) per well for thick biofilms. The optical density (OD) of 135 μL of each well was measured using an ELISA reader (Molecular Devices, Spectra Max Plus 384) at 492 nm. Each strain and/or each condition was tested in (at least) three independent experiments, and each used eight biological replicates. Based on using OD of the biofilms and the corresponding blanks (ODc), strains were classified as per the criteria described by Stepanovic, Vulcovic, Dakic, and Savic (2000).

In order to differentiate between the behavior of single bacterial cells (L. plantarum 33 and E. coli) and of cells resulting from biofilm on adhesion ability, bacterial cells from both treatments were submitted to the adhesion assay in a Caco-2 cell line as described previously. To monitor the biofilm composition (in terms of viable counts of LAB and E. coli), cells were collected from each well, plated on MRS agar for Lactobacillus strains, and VRBD for E. coli, and incubated at 37 °C for 24–48 h to enumerate bacterial counts per mL.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิเคราะห์เชิงปริมาณของ biofilm ที่ดำเนินการ โดยการเพิ่ม μL 200 ของ 33% (v/v) น้ำแข็งกรดอะซิติก (เมอร์ค ดาร์มส เยอรมนี) ต่อด้วยสำหรับ biofilms หนา ความหนาแน่นออปติคอล (OD) ของ μL 135 ของแต่ละดีถูกวัดโดยใช้เครื่องอ่าน ELISA (อุปกรณ์โมเลกุล แรมสเป็คตราสูงสุดบวก 384) ที่ 492 nm ต้องใช้แต่ละหรือแต่ละเงื่อนไขถูกทดสอบในการทดลองอิสระสาม (น้อย) และสามารถจำลองแต่ละชีวภาพ 8 ใช้ ขึ้นอยู่กับการใช้ OD biofilms และช่องว่างที่สอดคล้องกัน (ODc), สายพันธุ์ถูกจัดตามเงื่อนไขที่อธิบายไว้ โดย Stepanovic, Vulcovic, Dakic, Savic (2000)เพื่อแยกความแตกต่างระหว่างการทำงาน ของเซลล์แบคทีเรียเดียว (L. plantarum 33 และ E. coli) และเซลล์ที่เกิดจาก biofilm ในความสามารถในการยึดเกาะ เซลล์แบคทีเรียจากการรักษาทั้งสองถูกส่งไปทดสอบการยึดเกาะในบรรทัดตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้เซลล์ Caco 2 การตรวจสอบองค์ประกอบ biofilm (ในแง่ของการนับได้ของแล็บและ E. coli), เซลล์ถูกรวบรวมจากแต่ละดี ชุบ MRS agar สำหรับสายพันธุ์แลคโตบาซิลลัส และ VRBD สำหรับ E. coli ก incubated ที่ 37 ° C ใน 24 – 48 h ระบุนับจำนวนแบคทีเรียต่อมิลลิลิตร

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวิเคราะห์เชิงปริมาณของฟิล์มทำโดยการเพิ่ม 200 μ L 33 เปอร์เซ็นต์ ( v / v ) กรดแอซีติก ( เมอร์คดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี ) ต่อด้วยไบโอฟิล์มหนา ความหนาแน่นของแสง ( OD ) 135 μ L ของแต่ละคือการวัดอ่าน ELISA ( อุปกรณ์ระดับโมเลกุลนี้แม็กซ์พลัส 384 ) ที่ 492 นาโนเมตร แต่ละสายพันธุ์ และ / หรือ แต่ละสภาวะการทดสอบ ( อย่างน้อย ) สามการทดลองที่เป็นอิสระและแต่ละใช้แปดแบบชีวภาพ ใช้ OD ของไบโอฟิล์ม และช่องว่างที่สอดคล้องกัน ( ODC ) สายพันธุ์จำแนกตามเกณฑ์ที่ระบุไว้ โดย stepanovic vulcovic dakic , , , และซาวิค ( 2000 ) .

เพื่อแยกความแตกต่างระหว่างพฤติกรรมของแบคทีเรียเซลล์เดียว ( L . plantarum 33 และ E . coli ) และเซลล์ที่เกิดจากฟิล์มใน ความสามารถในการยึดเกาะ ,เซลล์แบคทีเรียทั้งจากการรักษาที่ถูกส่งไปยังเกาะ assay ในเซลล์ caco-2 ตามที่อธิบายไว้ก่อนหน้านี้ ตรวจสอบฟิล์มองค์ประกอบ ( ในแง่ของรัฐนับจากห้องทดลองและ E . coli ) , เซลล์ที่เก็บจากแต่ละอย่างดีชุบบนอาหารวุ้นคุณนายสำหรับสายพันธุ์แลคโตบาซิลลัส และ vrbd ใน E . coli , บ่มที่ 37 ° C เป็นเวลา 24 และ 48 ชั่วโมง เพื่อนับจำนวนจุลินทรีย์ต่อมิลลิลิตร