Phospholipid analysis was performed

Phospholipid analysis was performed analogue to Apostel et al.
(2013): Extraction and purification is a modified method by
Frostegård et al. (1991). For gas chromatography (GC) measurements,
the fatty acids were saponified, then derivatized into fatty
acid methyl esters (FAME) according to Knapp (1979). External
standards consisting of the 27 fatty acids given in Supplementary
Table 1 and an internal standard were derivatized and measured
together with the samples.
FAME-contents were measured on a GCeMS (GC 5890 with MS
5971A, Agilent, Waldbronn, Germany) with a 30 m DB1-MS column,
in the selected ion mode. Quantification occurred via a linear
regression calculated from the external standards.
d13C-values were measured by a GC-C-IRMS, consisting of the
autosampler unit AS 2000, the Trace GC 2000 by ThermoQuest, the
combustion unit Combustion Interface III and the isotope-ratio
mass spectrometer DeltaPlus (all units from Thermo Fisher, Bremen,
Germany). Volumes of 1.5 ml were injected into a liner (Type
TQ(CE) 3mmID TAPER) at a injector block temperature of 250
C in
splitless mode (splitless time: 1 min). Gas chromatography was
performed with a combination of two capillary columns: a 30 m
DB5-MS and a 15mDB1-MS (both: internal diameter 0.25 mm, film
thickness 0.25 mm; Agilent), a constant He-flux (99.996% pure) of
2 ml min1 and the temperature program presented in
Supplementary Table 2. CO2 reference gas (99.995% pure) was injected for 20 s into the detector several times throughout the
measurement to identify any drift of the d13C-values. The d13C of the
second reference gas peak was defined as 40‰ and all other d13C
values were calculated by comparison.
The chromatograms were evaluated with ISODAT NT 2.0.
Linear regressions were calculated from CO2 reference gas
(99.995% pure) peaks to correct for any drift during measurements.
To correct for amount-dependent 13C isotopic fractionation
during measurements (Schmitt et al., 2003), and for the addition of
C during derivatization, linear and logarithmic regressions of the
external standards d13C-values to their area were calculated. If both
regressions were significant, that with the higher significance was
applied. As the d13C-value for the derivatizing agentswas unknown,
the correction was performed according to Glaser and Amelung
(2002) (Eq. (3)).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วิเคราะห์เรียมเป็นอนาล็อกดำเนินการ Apostel et al(2013): การสกัดและทำให้บริสุทธิ์เป็นวิธีการแก้ไขโดยFrostegård et al. (1991) สำหรับการวัดแก๊ส chromatography (GC)กรดไขมันถูก saponified แล้ว derivatized เป็นไขมันกรด methyl esters (ชื่อเสียง) ตาม Knapp (1979) ภายนอกมาตรฐานที่ประกอบด้วยกรดไขมัน 27 ที่กำหนดให้ในการเสริมตารางที่ 1 และมีมาตรฐานภายใน derivatized และวัดพร้อมตัวอย่างหาชื่อเสียงที่วัด GCeMS (5890 GC กับ MS5971A, Agilent, Waldbronn เยอรมนี) กับคอลัมน์ m 30 DB1 MSในโหมดเลือกไอออน ด้านที่เกิดขึ้นผ่านการเชิงเส้นถดถอยคำนวณมาตรฐานภายนอกd13C-ค่าที่วัด โดยเครื่อง GC-C-IRMS ประกอบด้วยการหน่วยสามารถเป็น 2000, 2000 GC ติดตาม โดย ThermoQuest การหน่วยเผาไหม้เผาไหม้ติดต่อ III และอัตราส่วนไอโซโทปสเปกโตรมิเตอร์มวล DeltaPlus (หน่วยทั้งหมดจากเทอร์โม Fisher เบรเมนเยอรมนี) ปริมาณ 1.5 ml ถูกฉีดเข้าไปในซับ (ชนิดTQ(CE) 3mmID เรียว) ที่อุณหภูมิ 250 C ในบล็อกอัดโหมด splitless (เวลา splitless: 1 นาที) Chromatography ก๊าซถูกกับการรวมกันของสองคอลัมน์ฝอย: 30 เมตร15mDB1-MS และ DB5 MS (ทั้ง: ภายในเส้นผ่าศูนย์กลาง 0.25 มม. ฟิล์มความหนา 0.25 มม. Agilent), เขาระฟ้า (99.996 บริสุทธิ์%) ของนาที 2 มล. 1 และโปรแกรมอุณหภูมิในเสริมตาราง 2 แก๊ส CO2 อ้างอิง (99.995% บริสุทธิ์) ถูกฉีด 20 s เป็นเครื่องตรวจจับหลายครั้งตลอดการการวัดเพื่อระบุการล่องลอยของค่า d13C D13C ของการสูงสุดแก๊สอ้างอิงสองถูกกำหนดเป็น 40‰ และ d13C อื่น ๆ ทั้งหมดค่าที่คำนวณโดยการเปรียบเทียบChromatograms ถูกประเมินกับ ISODAT NT 2.0รู้จักเส้นคำนวณจากแก๊ส CO2 อ้างอิงยอด (99.995% บริสุทธิ์) เพื่อแก้ไขความเบี่ยงเบนใด ๆ ระหว่างวัดการแก้ไขสำหรับแยก isotopic 13C ขึ้นอยู่กับจำนวนวัด (Schmitt et al. 2003), และ สำหรับการเพิ่มC ในระหว่าง derivatization รู้จักเส้น และลอการิทึมของการมีคำนวณค่า d13C ภายนอกพื้นที่ของพวกเขา ถ้าทั้งสองรู้จักสำคัญ ที่ มีความสำคัญสูงได้นำไปใช้ เป็นค่า d13C สำหรับ agentswas derivatizing ไม่ทราบดำเนินการแก้ไขตาม Glaser และ Amelung(2002) (eq. (3))

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิเคราะห์เรียมได้ดำเนินการแบบอะนาล็อกไป Apostel et al.
(2013): การสกัดและการทำให้บริสุทธิ์เป็นวิธีการแก้ไขโดย
Frostegård et al, (1991) สำหรับแก๊ส chromatography (GC) วัด
กรดไขมันที่ถูกกราฟแล้ว derivatized ลงในไขมัน
เอสเทอกรดเมธิล (FAME) ตามแนป (1979) ภายนอก
มาตรฐานประกอบด้วยกรดไขมันที่ 27 ได้รับในการเสริม
ตารางที่ 1 และมาตรฐานภายในถูก derivatized และวัด
ร่วมกับกลุ่มตัวอย่าง.
FAME-เนื้อหาถูกวัดใน GCeMS (GC 5890 กับ MS
5971A, Agilent, Waldbronn, เยอรมนี) กับ 30 M-MS DB1 คอลัมน์
ในโหมดไอออนที่เลือก ปริมาณที่เกิดขึ้นผ่านทางเส้น
ถดถอยคำนวณได้จากมาตรฐานภายนอก.
d13C ค่าถูกวัดโดย GC-C-IRMS ประกอบด้วย
หน่วย autosampler AS 2000, Trace GC ปี 2000 โดย ThermoQuest ที่
หน่วยการเผาไหม้เผาไหม้อินเตอร์เฟซ III และ isotope- อัตราส่วน
มวลสเปกโตรมิเตอร์ DeltaPlus (ทุกหน่วยจากเทอร์โมฟิชเชอร์เบรเมน
เยอรมนี) ปริมาณ 1.5 มล. ถูกฉีดเข้าไปในซับ (ชนิด
TQ (CE) 3mmID TAPER) ที่อุณหภูมิหัวฉีดบล็อก 250 C มีอะไรบ้าง?
โหมด Splitless (เวลา Splitless: 1 นาที) แก๊สโครมาได้รับการ
ดำเนินการกับการรวมกันของสองคอลัมน์เส้นเลือดฝอย A: a 30 เมตร
DB5-MS และ 15mDB1-MS (ทั้งสอง: ภายในขนาดเส้นผ่าศูนย์กลาง 0.25 มม, ฟิล์ม
หนา 0.25 มม Agilent) คง He-ฟลักซ์ (99.996% บริสุทธิ์) ของ
2 มิลลิลิตรนาที 1 และโปรแกรมอุณหภูมิที่นำเสนอใน
ตารางเสริม 2. ก๊าซ CO2 อ้างอิง (99.995% บริสุทธิ์) ถูกฉีดเป็นเวลา 20 s เข้าไปในเครื่องตรวจจับหลายครั้งตลอด
การวัดเพื่อแจ้งดริฟท์ของ d13C-ค่าใด ๆ d13C ของ
ยอดก๊าซอ้างอิงที่สองถูกกำหนดเป็น 40 ‰และทุก d13C อื่น ๆ
ค่าจะถูกคำนวณโดยเปรียบเทียบ.
chromatograms ได้รับการประเมินด้วย ISODAT NT 2.0.
การถดถอยเชิงเส้นจะถูกคำนวณจากก๊าซอ้างอิง CO2
(99.995% บริสุทธิ์) ยอดเพื่อแก้ไขสำหรับ ดริฟท์ใด ๆ ในระหว่างการวัด.
ในการแก้ไขปัญหาสำหรับจำนวนเงินขึ้นอยู่กับ 13C แยกไอโซโทป
ในช่วงการวัด (มิต et al., 2003) และการเพิ่มขึ้นของ
C ในช่วงอนุพันธ์เชิงเส้นและการถดถอยลอการิทึมของ
มาตรฐานภายนอก d13C ค่าไปยังพื้นที่ของพวกเขาจะถูกคำนวณ . หากทั้งสอง
ถดถอยอย่างมีนัยสำคัญที่มีนัยสำคัญที่สูงขึ้นถูก
นำมาใช้ ในฐานะที่เป็น d13C ค่าสำหรับ derivatizing agentswas ไม่รู้จัก
การแก้ไขที่ได้ดำเนินการตามที่ตับและ Amelung
(2002) (สม. (3))

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การวิเคราะห์ฟอสโฟลิปิดแสดงอนาล็อกเพื่อ apostel et al .( 56 ) : การสกัดและการแก้ไขโดยวิธีคือfrosteg ปี RD et al . ( 1991 ) แก๊สโครมาโทกราฟี ( GC ) การวัดผลกรดไขมันมีการดูดซึมแล้ว derivatized เป็นไขมันเมทิลเอสเทอร์ของกรด ( ชื่อเสียง ) ตาม แนปป์ ( 1979 ) ภายนอกมาตรฐานประกอบด้วย 27 กรดไขมันให้เพิ่มเติมตารางที่ 1 และภายใน derivatized และวัดมาตรฐานด้วยกันกับตัวอย่างชื่อเสียงวัดเนื้อหาใน gcems ( GC 5890 กับ MS5971a Agilent , waldbronn , เยอรมนี ) กับคอลัมน์ db1-ms 30 เมตร ,ในการเลือกไอออนโหมด ปริมาณที่เกิดขึ้นผ่านทางแบบเส้นตรงการคํานวณจากมาตรฐานภายนอกd13c วัดค่าโดย gc-c-irms ประกอบด้วยautosampler หน่วยเป็น 2000 ร่องรอย GC 2000 โดย thermoquest ,การเผาไหม้การเผาไหม้อินเตอร์เฟซ 3 หน่วย และอัตราส่วนไอโซโทปแมสสเปกโทรมิเตอร์ deltaplus ( หน่วยทั้งหมดจากเทอร์โมฟิชเชอร์ , เบรเมนเยอรมนี ) ปริมาณ 1.5 ml ฉีดเข้าไปในถุง ( ชนิดพิมพ์ดีด ( CE ) 3mmid เรียว ) ที่อุณหภูมิ 250 C ในหัวบล็อกโหมด splitless ( เวลา : splitless 1 นาที ) แก๊สโครมาโตกราฟี คือการรวมกันของทั้งสองแคพิลลารีคอลัมน์ : 30 ม.db5-ms และ 15mdb1 MS ( ทั้งภายในเส้นผ่าศูนย์กลาง 0.25 มม. , ภาพยนตร์ความหนา 0.25 มม. ; Agilent ) คงที่เขาฟลักซ์ ( 99.996 % บริสุทธิ์ ) ของ2 ml min1 และนำเสนอในโปรแกรมอุณหภูมิโต๊ะเสริม 2 ก๊าซ CO2 อ้างอิง ( 99.995 % บริสุทธิ์ ) คือฉีด 20 เป็นเครื่องตรวจจับหลายครั้งตลอดการวัดเพื่อระบุใด ๆล่องลอยของ d13c ค่า การ d13c ของแก๊สจุดสุดยอดการอ้างอิงสองถูกกำหนดไว้ที่ 40 d13c ‰และทั้งหมดอื่น ๆค่าที่คำนวณโดยการเปรียบเทียบกลิ่นที่ประเมินด้วย isodat NT 2.0สมการถดถอยเชิงเส้นได้ก๊าซ CO2 จากอ้างอิง( 99.995 % บริสุทธิ์ ) ยอดที่ถูกต้องสำหรับการใด ๆล่องลอยในการวัดแก้ไขปริมาณขึ้นอยู่กับ 13C แยกไอโซโทประหว่างการวัด ( Schmitt et al . , 2003 ) และสำหรับเพิ่มซีซัลและลอการิทึม สมการถดถอยเชิงเส้นระหว่าง , ของมาตรฐานภายนอก d13c ค่าพื้นที่ของตนเองได้ ถ้าทั้งสมการถดถอยอย่างมีนัยสำคัญที่สูงขึ้นอย่างมีนัยสำคัญทางสถิติที่ระดับ . 05 คือประยุกต์ เป็นค่า d13c สำหรับ derivatizing agentswas ที่ไม่รู้จักการแก้ไข คือ การปฏิบัติตาม และ amelung เกลเซอร์( 2002 ) ( อีคิว ( 3 ) )