- ข้อความ
- ประวัติศาสตร์
MATERIALS AND METHODSMicroorganism
MATERIALS AND METHODS
Microorganism Monascus anka GIM 3.592 (deposited in the publicly
accessible culture collection GDMCC/GIMCC, Guangdong Culture Collection Centre
of Microbiology, China) was maintained on potato dextrose agar (PDA) plates and
preserved at 4C. A sub-culture was carried out at 30C for 7 days monthly.
Culture media Pre-inoculum culture medium consisted of glucose 20 g,
peptone 10 g, yeast extract 3 g, KCl 0.5 g, KH2PO4 4 g, ZnSO4$7H2O 0.01 g, and
FeSO4$7H2O 0.01 g in 1 L of double distilled water. Inoculum culture medium and
fermentation culture medium consisted of glucose 50 g, one of the investigated
nitrogen sources (NaNO3 6.44 g or (NH4)2SO4 5.00 g or peptone 8.84 g), KCl 0.5 g,
KH2PO4 4 g, ZnSO4$7H2O 0.01 g, MgSO4$7H2O 0.5 g, and FeSO4$7H2O 0.01 g in 1 L of
double distilled water. The pH of the inoculum culture was adjusted to selected
values by HCl 1 M or NaOH 2 M. The amount of each nitrogen source in the culture
medium was selected to ensure equimolar concentrations of nitrogen (0.076 M).
Cultivation For pre-inoculum cultivation, a suspension of spores was
collected by washing PDA plates with 0.1% tween 80 solution and then approximately
3 106 spores were inoculated into 50 mL pre-inoculum culture medium in
250 mL Erlenmeyer flasks. This cultivation was carried out at 30C, 180 rpm for 30 h
in a shaker (New Brunswick Scientific).
Then, an aliquot of pre-inoculum culture (5 mL) was inoculated into 50 mL
inoculum culture medium in 250 mL Erlenmeyer flasks and incubated at 30C,
180 rpm for 15 h.
For batch fermentations, an aliquot of inoculum culture (150 mL) was inoculated
into 1.5 L of fermentation culture medium with the same composition of the inoculum
culture medium, in 3 L bioreactors (New Brunswick Scientific, USA). The
fermentation conditions were set as follows: agitation 500 rpm, temperature 30C,
aeration rate 1.5 L/min. The pH was kept constant at 2.5, 4.0 or 6.5 during the whole
fermentation period by HCl 1 M or NaOH 2 M. For two-stage pH control fermentations,
pH was kept constant at 2.5 for the first 96 h and then maintained at 6.5
during the following 72 h. During the fermentation, a silicone antifoaming agent was
added when necessary.
Analysis methods An aliquot of fermentation sample (20 ml) was filtered
under vacuum through a 0.8 mm mixed cellulose esters membrane. The filtrate
(extracellular broth) was appropriately diluted to determine the residual glucose
concentration and the extracellular pigments concentration. The absorbance spectrum
of the extracellular broth was recorded by a UV/VIS spectrophotometer (Unico,
USA) from 350 nm to 550 nm at 1 nm intervals. The absorbance units (AU) at specific
wavelengths (410, 470 and 510 nm) were used as an index of the extracellular
pigments concentration. The residual glucose was quantified by the standard 3, 5-
dinitrosalicylic acid (DNS) method.
The mycelia on the filter were washed three times with double distilled water
and collected for intracellular pigments concentration analysis. The mycelia were
resuspended in a volume of acidic aqueous ethanol (70%, v/v, in aqueous HCl, pH 2)
equal to the initial volume of the aliquot (20 mL) and incubated 1 h. The pH of the
ethanol aqueous solution was acidic to prevent orange pigments shifting from orange
to red. The suspension was filtered with a pre-weighed filter paper and the
filtrate (intracellular extract) was subjected to the same pigments quantitation
described for the extracellular broth. The mycelia remained on the pre-weighed
filter was dried to constant weight at 60C to determine dry cell weight (DCW).
Thin layer chromatography (TLC) analysis was performed with two different
mobile phases on Silica gel 60 F254 TLC plates (Merck) (33). One mobile phase
consisted of methylbenzene/ethyl acetate/formic acid (7:3:1) and was used to
separate the red pigments from other pigments. With this mobile phase the red
pigments were separated with two Rf values of 0.17 and 0.21, while the yellow and
orange pigments co-eluted with Rf values of 0.64 and 0.68. A second mobile phase
consisted of n-hexane/ethyl acetate/petroleum ether (30:17:5) and was utilized to
separated the yellow pigments from the other pigments. The yellow pigments had Rf
values of 0.67 and 0.73. The amount of sample loaded on the TLC plate was quantitative:
10 ml of sample with an absorbance value at 410 nm adjusted to 50 AU, was
loaded on the TLC plate. For samples with absorbance value at 410 nm below 50
units, a volume (ml) equal to 500/AU was loaded.
The color characteristics of the pigments were analyzed in terms of CIELAB color
space parameters. The highest absorbance values of intracellular and extracellular
pigments solutions among 410 nm, 470 nm or 510 nm were adjusted to the range of
1.5e2.0 for further analysis. The parameters (L*, a*, b*, C*, hab) of pigments solutions
in the CIELAB color space were measured by a CR-400 colorimeter (Minolta, Osaka,
Japan). L*, which ranges from 0 (perfect black) to 100 (perfect white), represents the
lightness; a* and b* represent the color coordinates, where positive a* and b* values
indicate red and yellow while negative a* and b* values indicate green and blue,
respectively; C* is the chroma where C* ¼ [(a*)2 þ (b*)2
]
1/2 and represents the
saturation of the color: chroma values closes to 0 indicate duller or grayer colors,
whereas higher values indicate more vivid colors; the hue angle (hab), where
hab ¼ tan1
(b*/a*), is a numerical value that represents the hue: hue angles of 0, 90,
180 and 270 represent red, yellow, green and blue, respectively.
RESU
Microorganism Monascus anka GIM 3.592 (deposited in the publicly
accessible culture collection GDMCC/GIMCC, Guangdong Culture Collection Centre
of Microbiology, China) was maintained on potato dextrose agar (PDA) plates and
preserved at 4C. A sub-culture was carried out at 30C for 7 days monthly.
Culture media Pre-inoculum culture medium consisted of glucose 20 g,
peptone 10 g, yeast extract 3 g, KCl 0.5 g, KH2PO4 4 g, ZnSO4$7H2O 0.01 g, and
FeSO4$7H2O 0.01 g in 1 L of double distilled water. Inoculum culture medium and
fermentation culture medium consisted of glucose 50 g, one of the investigated
nitrogen sources (NaNO3 6.44 g or (NH4)2SO4 5.00 g or peptone 8.84 g), KCl 0.5 g,
KH2PO4 4 g, ZnSO4$7H2O 0.01 g, MgSO4$7H2O 0.5 g, and FeSO4$7H2O 0.01 g in 1 L of
double distilled water. The pH of the inoculum culture was adjusted to selected
values by HCl 1 M or NaOH 2 M. The amount of each nitrogen source in the culture
medium was selected to ensure equimolar concentrations of nitrogen (0.076 M).
Cultivation For pre-inoculum cultivation, a suspension of spores was
collected by washing PDA plates with 0.1% tween 80 solution and then approximately
3 106 spores were inoculated into 50 mL pre-inoculum culture medium in
250 mL Erlenmeyer flasks. This cultivation was carried out at 30C, 180 rpm for 30 h
in a shaker (New Brunswick Scientific).
Then, an aliquot of pre-inoculum culture (5 mL) was inoculated into 50 mL
inoculum culture medium in 250 mL Erlenmeyer flasks and incubated at 30C,
180 rpm for 15 h.
For batch fermentations, an aliquot of inoculum culture (150 mL) was inoculated
into 1.5 L of fermentation culture medium with the same composition of the inoculum
culture medium, in 3 L bioreactors (New Brunswick Scientific, USA). The
fermentation conditions were set as follows: agitation 500 rpm, temperature 30C,
aeration rate 1.5 L/min. The pH was kept constant at 2.5, 4.0 or 6.5 during the whole
fermentation period by HCl 1 M or NaOH 2 M. For two-stage pH control fermentations,
pH was kept constant at 2.5 for the first 96 h and then maintained at 6.5
during the following 72 h. During the fermentation, a silicone antifoaming agent was
added when necessary.
Analysis methods An aliquot of fermentation sample (20 ml) was filtered
under vacuum through a 0.8 mm mixed cellulose esters membrane. The filtrate
(extracellular broth) was appropriately diluted to determine the residual glucose
concentration and the extracellular pigments concentration. The absorbance spectrum
of the extracellular broth was recorded by a UV/VIS spectrophotometer (Unico,
USA) from 350 nm to 550 nm at 1 nm intervals. The absorbance units (AU) at specific
wavelengths (410, 470 and 510 nm) were used as an index of the extracellular
pigments concentration. The residual glucose was quantified by the standard 3, 5-
dinitrosalicylic acid (DNS) method.
The mycelia on the filter were washed three times with double distilled water
and collected for intracellular pigments concentration analysis. The mycelia were
resuspended in a volume of acidic aqueous ethanol (70%, v/v, in aqueous HCl, pH 2)
equal to the initial volume of the aliquot (20 mL) and incubated 1 h. The pH of the
ethanol aqueous solution was acidic to prevent orange pigments shifting from orange
to red. The suspension was filtered with a pre-weighed filter paper and the
filtrate (intracellular extract) was subjected to the same pigments quantitation
described for the extracellular broth. The mycelia remained on the pre-weighed
filter was dried to constant weight at 60C to determine dry cell weight (DCW).
Thin layer chromatography (TLC) analysis was performed with two different
mobile phases on Silica gel 60 F254 TLC plates (Merck) (33). One mobile phase
consisted of methylbenzene/ethyl acetate/formic acid (7:3:1) and was used to
separate the red pigments from other pigments. With this mobile phase the red
pigments were separated with two Rf values of 0.17 and 0.21, while the yellow and
orange pigments co-eluted with Rf values of 0.64 and 0.68. A second mobile phase
consisted of n-hexane/ethyl acetate/petroleum ether (30:17:5) and was utilized to
separated the yellow pigments from the other pigments. The yellow pigments had Rf
values of 0.67 and 0.73. The amount of sample loaded on the TLC plate was quantitative:
10 ml of sample with an absorbance value at 410 nm adjusted to 50 AU, was
loaded on the TLC plate. For samples with absorbance value at 410 nm below 50
units, a volume (ml) equal to 500/AU was loaded.
The color characteristics of the pigments were analyzed in terms of CIELAB color
space parameters. The highest absorbance values of intracellular and extracellular
pigments solutions among 410 nm, 470 nm or 510 nm were adjusted to the range of
1.5e2.0 for further analysis. The parameters (L*, a*, b*, C*, hab) of pigments solutions
in the CIELAB color space were measured by a CR-400 colorimeter (Minolta, Osaka,
Japan). L*, which ranges from 0 (perfect black) to 100 (perfect white), represents the
lightness; a* and b* represent the color coordinates, where positive a* and b* values
indicate red and yellow while negative a* and b* values indicate green and blue,
respectively; C* is the chroma where C* ¼ [(a*)2 þ (b*)2
]
1/2 and represents the
saturation of the color: chroma values closes to 0 indicate duller or grayer colors,
whereas higher values indicate more vivid colors; the hue angle (hab), where
hab ¼ tan1
(b*/a*), is a numerical value that represents the hue: hue angles of 0, 90,
180 and 270 represent red, yellow, green and blue, respectively.
RESU
0/5000
MATERIALS AND METHODSMicroorganism Monascus anka GIM 3.592 (deposited in the publiclyaccessible culture collection GDMCC/GIMCC, Guangdong Culture Collection Centreof Microbiology, China) was maintained on potato dextrose agar (PDA) plates andpreserved at 4C. A sub-culture was carried out at 30C for 7 days monthly.Culture media Pre-inoculum culture medium consisted of glucose 20 g,peptone 10 g, yeast extract 3 g, KCl 0.5 g, KH2PO4 4 g, ZnSO4$7H2O 0.01 g, andFeSO4$7H2O 0.01 g in 1 L of double distilled water. Inoculum culture medium andfermentation culture medium consisted of glucose 50 g, one of the investigatednitrogen sources (NaNO3 6.44 g or (NH4)2SO4 5.00 g or peptone 8.84 g), KCl 0.5 g,KH2PO4 4 g, ZnSO4$7H2O 0.01 g, MgSO4$7H2O 0.5 g, and FeSO4$7H2O 0.01 g in 1 L ofdouble distilled water. The pH of the inoculum culture was adjusted to selectedvalues by HCl 1 M or NaOH 2 M. The amount of each nitrogen source in the culturemedium was selected to ensure equimolar concentrations of nitrogen (0.076 M).Cultivation For pre-inoculum cultivation, a suspension of spores wascollected by washing PDA plates with 0.1% tween 80 solution and then approximately3 106 spores were inoculated into 50 mL pre-inoculum culture medium in250 mL Erlenmeyer flasks. This cultivation was carried out at 30C, 180 rpm for 30 hin a shaker (New Brunswick Scientific).Then, an aliquot of pre-inoculum culture (5 mL) was inoculated into 50 mLinoculum culture medium in 250 mL Erlenmeyer flasks and incubated at 30C,180 rpm for 15 h.For batch fermentations, an aliquot of inoculum culture (150 mL) was inoculatedinto 1.5 L of fermentation culture medium with the same composition of the inoculumculture medium, in 3 L bioreactors (New Brunswick Scientific, USA). Thefermentation conditions were set as follows: agitation 500 rpm, temperature 30C,aeration rate 1.5 L/min. The pH was kept constant at 2.5, 4.0 or 6.5 during the wholefermentation period by HCl 1 M or NaOH 2 M. For two-stage pH control fermentations,pH was kept constant at 2.5 for the first 96 h and then maintained at 6.5during the following 72 h. During the fermentation, a silicone antifoaming agent wasadded when necessary.Analysis methods An aliquot of fermentation sample (20 ml) was filteredunder vacuum through a 0.8 mm mixed cellulose esters membrane. The filtrate(extracellular broth) was appropriately diluted to determine the residual glucoseconcentration and the extracellular pigments concentration. The absorbance spectrumof the extracellular broth was recorded by a UV/VIS spectrophotometer (Unico,USA) from 350 nm to 550 nm at 1 nm intervals. The absorbance units (AU) at specificwavelengths (410, 470 and 510 nm) were used as an index of the extracellularpigments concentration. The residual glucose was quantified by the standard 3, 5-dinitrosalicylic acid (DNS) method.The mycelia on the filter were washed three times with double distilled water
and collected for intracellular pigments concentration analysis. The mycelia were
resuspended in a volume of acidic aqueous ethanol (70%, v/v, in aqueous HCl, pH 2)
equal to the initial volume of the aliquot (20 mL) and incubated 1 h. The pH of the
ethanol aqueous solution was acidic to prevent orange pigments shifting from orange
to red. The suspension was filtered with a pre-weighed filter paper and the
filtrate (intracellular extract) was subjected to the same pigments quantitation
described for the extracellular broth. The mycelia remained on the pre-weighed
filter was dried to constant weight at 60C to determine dry cell weight (DCW).
Thin layer chromatography (TLC) analysis was performed with two different
mobile phases on Silica gel 60 F254 TLC plates (Merck) (33). One mobile phase
consisted of methylbenzene/ethyl acetate/formic acid (7:3:1) and was used to
separate the red pigments from other pigments. With this mobile phase the red
pigments were separated with two Rf values of 0.17 and 0.21, while the yellow and
orange pigments co-eluted with Rf values of 0.64 and 0.68. A second mobile phase
consisted of n-hexane/ethyl acetate/petroleum ether (30:17:5) and was utilized to
separated the yellow pigments from the other pigments. The yellow pigments had Rf
values of 0.67 and 0.73. The amount of sample loaded on the TLC plate was quantitative:
10 ml of sample with an absorbance value at 410 nm adjusted to 50 AU, was
loaded on the TLC plate. For samples with absorbance value at 410 nm below 50
units, a volume (ml) equal to 500/AU was loaded.
The color characteristics of the pigments were analyzed in terms of CIELAB color
space parameters. The highest absorbance values of intracellular and extracellular
pigments solutions among 410 nm, 470 nm or 510 nm were adjusted to the range of
1.5e2.0 for further analysis. The parameters (L*, a*, b*, C*, hab) of pigments solutions
in the CIELAB color space were measured by a CR-400 colorimeter (Minolta, Osaka,
Japan). L*, which ranges from 0 (perfect black) to 100 (perfect white), represents the
lightness; a* and b* represent the color coordinates, where positive a* and b* values
indicate red and yellow while negative a* and b* values indicate green and blue,
respectively; C* is the chroma where C* ¼ [(a*)2 þ (b*)2
]
1/2 and represents the
saturation of the color: chroma values closes to 0 indicate duller or grayer colors,
whereas higher values indicate more vivid colors; the hue angle (hab), where
hab ¼ tan1
(b*/a*), is a numerical value that represents the hue: hue angles of 0, 90,
180 and 270 represent red, yellow, green and blue, respectively.
RESU
and collected for intracellular pigments concentration analysis. The mycelia were
resuspended in a volume of acidic aqueous ethanol (70%, v/v, in aqueous HCl, pH 2)
equal to the initial volume of the aliquot (20 mL) and incubated 1 h. The pH of the
ethanol aqueous solution was acidic to prevent orange pigments shifting from orange
to red. The suspension was filtered with a pre-weighed filter paper and the
filtrate (intracellular extract) was subjected to the same pigments quantitation
described for the extracellular broth. The mycelia remained on the pre-weighed
filter was dried to constant weight at 60C to determine dry cell weight (DCW).
Thin layer chromatography (TLC) analysis was performed with two different
mobile phases on Silica gel 60 F254 TLC plates (Merck) (33). One mobile phase
consisted of methylbenzene/ethyl acetate/formic acid (7:3:1) and was used to
separate the red pigments from other pigments. With this mobile phase the red
pigments were separated with two Rf values of 0.17 and 0.21, while the yellow and
orange pigments co-eluted with Rf values of 0.64 and 0.68. A second mobile phase
consisted of n-hexane/ethyl acetate/petroleum ether (30:17:5) and was utilized to
separated the yellow pigments from the other pigments. The yellow pigments had Rf
values of 0.67 and 0.73. The amount of sample loaded on the TLC plate was quantitative:
10 ml of sample with an absorbance value at 410 nm adjusted to 50 AU, was
loaded on the TLC plate. For samples with absorbance value at 410 nm below 50
units, a volume (ml) equal to 500/AU was loaded.
The color characteristics of the pigments were analyzed in terms of CIELAB color
space parameters. The highest absorbance values of intracellular and extracellular
pigments solutions among 410 nm, 470 nm or 510 nm were adjusted to the range of
1.5e2.0 for further analysis. The parameters (L*, a*, b*, C*, hab) of pigments solutions
in the CIELAB color space were measured by a CR-400 colorimeter (Minolta, Osaka,
Japan). L*, which ranges from 0 (perfect black) to 100 (perfect white), represents the
lightness; a* and b* represent the color coordinates, where positive a* and b* values
indicate red and yellow while negative a* and b* values indicate green and blue,
respectively; C* is the chroma where C* ¼ [(a*)2 þ (b*)2
]
1/2 and represents the
saturation of the color: chroma values closes to 0 indicate duller or grayer colors,
whereas higher values indicate more vivid colors; the hue angle (hab), where
hab ¼ tan1
(b*/a*), is a numerical value that represents the hue: hue angles of 0, 90,
180 and 270 represent red, yellow, green and blue, respectively.
RESU
การแปล กรุณารอสักครู่..
วัสดุและวิธีการ
จุลินทรีย์เชื้อราแอนก้า คิม 3.592 ( ฝากในสาธารณชนสามารถเข้าถึงคอลเลกชัน gdmcc วัฒนธรรม /
gimcc , Guangdong วัฒนธรรมศูนย์คอลเลกชัน
จุลชีววิทยา , จีน ) ไว้บนอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( PDA ) และแผ่น
เก็บไว้ที่ 4C . ซับวัฒนธรรมได้ดำเนินการที่ 30C 7 วัน รายเดือน
วัฒนธรรมสื่อ ก่อนโดยสื่อวัฒนธรรม ประกอบด้วยกลูโคส 20 กรัม
extract สารสกัดจากยีสต์ 10 กรัม , 3 กรัม ปริมาณ 0.5 กรัม kh2po4 4 g $ 7h2o znso4 0.01 กรัม และ feso4 7h2o
$ 0.01 กรัมใน 1 คู่ น้ำกลั่น อาหารเลี้ยงเชื้อและการหมักเชื้อ
อาหารเลี้ยงเชื้อประกอบด้วยกลูโคส 50 กรัม หนึ่งในสอบสวน
แหล่งไนโตรเจน ( NaNO3 6.44 กรัมหรือ ( NH4 ) 2so4 5.00 กรัม หรือขจัดกรัมตามลำดับ ) ปริมาณ 0.5 g ,
kh2po4 4 กรัม znso4 $ 7h2o 0.01 กรัม MgSO4 ใ $ 7h2o 0.5 กรัม และ feso4 $ 7h2o 0 .01 กรัมใน 1 ลิตร
คู่น้ำกลั่น pH ของ 3 วัฒนธรรมคือปรับค่าโดยเลือก
1 M หรือ NaOH HCl 2 เมตร ปริมาณของแต่ละแหล่งไนโตรเจนในวัฒนธรรม
กลางถูกเลือกเพื่อให้แน่ใจว่า ๆความเข้มข้นของไนโตรเจน ( 0.076 M )
การเพาะปลูกเพื่อเพาะเชื้อก่อน , ช่วงล่างสปอร์ถูก
เก็บซักแผ่น 0 พีดีเอ .1 tween 80 วิธีการแก้ปัญหาแล้วประมาณ
3 106 สปอร์เป็นเชื้อปริมาณ 50 มิลลิลิตร ก่อนสื่อวัฒนธรรมใน
เออร์เลนเมเยอร์ ขวด 250 ml . การเพาะปลูกการที่ 30C 180 รอบ 30 H
ในเครื่องปั่น ( บรุนซ์ใหม่ทางวิทยาศาสตร์ ) .
แล้วเป็นส่วนลงตัวของวัฒนธรรมก่อนเชื้อ ( 5 ml ) เป็นเชื้อ 50 ml
3 สื่อวัฒนธรรมและหมักในฟลาสก์ขนาด 250 มิลลิลิตร ขวด บ่มที่อุณหภูมิ 30C
,180 รอบ / นาทีเป็นเวลา 15 ชั่วโมง
สำหรับ fermentations แบทช์เป็นส่วนลงตัวของวัฒนธรรม 3 ( 150 มล. ) เป็นเชื้อ
เป็น 1.5 L ของวัฒนธรรมการหมักอาหารที่มีส่วนประกอบเดียวกัน ของเชื้อในอาหารเลี้ยงเชื้อ 3
, L เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ ( บรุนซ์ใหม่ทางวิทยาศาสตร์ , USA )
สภาพการหมักกำหนดดังนี้ อัตราการกวน 500 รอบต่อนาทีอุณหภูมิ 30 C
, อัตราการให้อากาศ 1.5 ลิตร / นาที ค่า pH คงที่ที่ 2.5 , 40 หรือ 6.5 ตลอดระยะเวลาการหมักด้วย HCl
1 M หรือ NaOH 2 เมตร สำหรับสองขั้นตอนการควบคุม fermentations
อ , pH คงที่ที่ 2.5 สำหรับแรก 96 H แล้วไว้ที่ 6.5
ช่วงต่อไปนี้ 72 ชั่วโมง ในระหว่างหมัก , ซิลิโคนกันฟองตัวแทน
วิธีการเพิ่มเมื่อจำเป็น เป็นส่วนลงตัวตัวอย่างและการวิเคราะห์ ( 20 มล ) คือกรองสุญญากาศด้วย
08 มม. เอสเทอร์ผสมเซลลูโลสเมมเบรน 148
( และน้ำ ) คืออย่างเหมาะสมเจือจางเพื่อตรวจสอบส่วนที่เหลือกลูโคส
ความเข้มข้นและความเข้มข้นสีภายนอก . นสเปกตรัม
ของน้ำซุปที่มีการบันทึกไว้โดย UV / VIS Spectrophotometer ( Unico
, USA ) จาก 350 nm 550 nm ในช่วงเวลา 1 นาโนเมตร นหน่วย ( AU )
( 410 , ความยาวคลื่นที่เฉพาะเจาะจง470 และ 510 nm ) ซึ่งใช้เป็นดัชนีของความเข้มข้น
สีภายนอก . กลูโคสที่เหลือก็วัดได้ตามมาตรฐาน 3 , 5 -
dinitrosalicylic acid ( DNS ) .
แต่ละตัวกรองถูกล้างด้วยน้ำกลั่นสองครั้งสามครั้ง และเก็บภายในเซลล์ความเข้มข้น
สี การวิเคราะห์ และเส้นใย
resuspended ในปริมาณกรดสารละลายเอทานอล ( 70% , V / V ,ในสารละลาย HCl , pH 2 )
เท่ากับปริมาณเริ่มต้นของการเทศนา ( 20 มล. ) โดย 1 . pH ของสารละลายเป็นกรด
เอทานอลเพื่อป้องกันสีส้มเปลี่ยนจากสีส้ม
สีแดง ระงับถูกกรองด้วยกระดาษกรอง และก่อนชั่ง
กรอง ( แยกเซลล์ ) ถูกยัดเยียดให้เหมือนกันสีเซลล์
อธิบายสำหรับน้ำซุปและ .เส้นใยที่ยังคงอยู่บนก่อนชั่งน้ำหนัก
กรองแห้งน้ำหนักคงที่ที่ 60C หาน้ำหนักเซลล์แห้ง ( dcw ) .
Thin layer chromatography ( TLC ) วิเคราะห์ข้อมูลด้วยสองระยะเคลื่อนที่แตกต่างกัน
บนซิลิกาเจล 60 f254 TLC แผ่น ( Merck ) ( 33 ) หนึ่งเฟสเคลื่อนที่
ประกอบด้วยเมทิลเบนซีน / ethyl acetate / กรด ( 7:3:1 ) และถูกใช้ในการแยกเม็ดสีสีแดงจาก
สีอื่น ๆกับโทรศัพท์มือถือนี้เฟสสีแดง
ถูกแยกกับสอง RF เท่ากับ 0.17 และ 0.21 , ในขณะที่สีเหลืองและสีส้ม
ตัวอย่างกับค่า Rf เท่ากับ 0.64 Co และ 0.68 . เป็นเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยบีบ 2
/ / ปิโตรเลียมอีเทอร์เอทิลอะซิเตท ( 30:17:5 ) และใช้
แบ่งสีสีเหลืองจากสีอื่น ๆ สี เหลือง มีค่า Rf
0.67 และ 0.73 .ปริมาณตัวอย่างที่โหลดบน TLC plate เชิงปริมาณ :
10 มิลลิลิตรของตัวอย่างที่มีค่าค่า 410 nm ปรับ 50 AU คือ
โหลดบน TLC plate . สำหรับตัวอย่างที่มีค่าการดูดกลืนแสงที่ 410 nm ด้านล่าง 50
หน่วย ปริมาตร ( มิลลิลิตร ) เท่ากับ 500 / Au ถูกโหลด
สีลักษณะของสีที่นำมาวิเคราะห์ในแง่ของแถบสี
พื้นที่พารามิเตอร์สูงสุดและค่าการดูดกลืนแสงของเซลล์และ
สีโซลูชั่นระหว่าง 410 nm , 470 nm หรือ 510 nm และระยะช่วง
1.5e2.0 สำหรับการวิเคราะห์ต่อไป พารามิเตอร์ ( L * a * b * C * HAB ) สีโซลูชั่น
ในแถบสีพื้นที่วัดโดย cr-400 colorimeter ( Minolta , โอซาก้า ,
ญี่ปุ่น ) L * ซึ่งช่วงจาก 0 ( สมบูรณ์ดำ ) 100 ( ผิวขาว )แสดงถึงความสว่าง
; a * และ b * แสดงสี พิกัด ที่บวกค่า a * และ b *
แสดงสีแดงและสีเหลือง ในขณะที่ค่า a * และ b * เท่ากับบ่งชี้สีเขียวและสีฟ้า ,
) ; C * Chroma ที่ C * ¼ [ ( * ) 2 þ ( b * ) 2
]
1 / 2 และเป็นตัวแทน
ความอิ่มตัวของสี : Chroma ค่าปิด 0 บ่งชี้แบบ duller หรือเกรเยอร์สี ในขณะที่ค่านิยมสูงขึ้นบ่งชี้
สีสดใสมากกว่าสีมุม ( HAB ) ที่
HAB ¼แทน 1
( b * / * ) คือตัวเลขที่แสดงถึงค่าสี : สีมุม 0 , 90 , 180 และ 270
เป็นตัวแทนของสีแดง , สีเหลือง , สีเขียวและสีฟ้า
resu ตามลำดับ
จุลินทรีย์เชื้อราแอนก้า คิม 3.592 ( ฝากในสาธารณชนสามารถเข้าถึงคอลเลกชัน gdmcc วัฒนธรรม /
gimcc , Guangdong วัฒนธรรมศูนย์คอลเลกชัน
จุลชีววิทยา , จีน ) ไว้บนอาหารเลี้ยงเชื้อ potato dextrose agar ( PDA ) และแผ่น
เก็บไว้ที่ 4C . ซับวัฒนธรรมได้ดำเนินการที่ 30C 7 วัน รายเดือน
วัฒนธรรมสื่อ ก่อนโดยสื่อวัฒนธรรม ประกอบด้วยกลูโคส 20 กรัม
extract สารสกัดจากยีสต์ 10 กรัม , 3 กรัม ปริมาณ 0.5 กรัม kh2po4 4 g $ 7h2o znso4 0.01 กรัม และ feso4 7h2o
$ 0.01 กรัมใน 1 คู่ น้ำกลั่น อาหารเลี้ยงเชื้อและการหมักเชื้อ
อาหารเลี้ยงเชื้อประกอบด้วยกลูโคส 50 กรัม หนึ่งในสอบสวน
แหล่งไนโตรเจน ( NaNO3 6.44 กรัมหรือ ( NH4 ) 2so4 5.00 กรัม หรือขจัดกรัมตามลำดับ ) ปริมาณ 0.5 g ,
kh2po4 4 กรัม znso4 $ 7h2o 0.01 กรัม MgSO4 ใ $ 7h2o 0.5 กรัม และ feso4 $ 7h2o 0 .01 กรัมใน 1 ลิตร
คู่น้ำกลั่น pH ของ 3 วัฒนธรรมคือปรับค่าโดยเลือก
1 M หรือ NaOH HCl 2 เมตร ปริมาณของแต่ละแหล่งไนโตรเจนในวัฒนธรรม
กลางถูกเลือกเพื่อให้แน่ใจว่า ๆความเข้มข้นของไนโตรเจน ( 0.076 M )
การเพาะปลูกเพื่อเพาะเชื้อก่อน , ช่วงล่างสปอร์ถูก
เก็บซักแผ่น 0 พีดีเอ .1 tween 80 วิธีการแก้ปัญหาแล้วประมาณ
3 106 สปอร์เป็นเชื้อปริมาณ 50 มิลลิลิตร ก่อนสื่อวัฒนธรรมใน
เออร์เลนเมเยอร์ ขวด 250 ml . การเพาะปลูกการที่ 30C 180 รอบ 30 H
ในเครื่องปั่น ( บรุนซ์ใหม่ทางวิทยาศาสตร์ ) .
แล้วเป็นส่วนลงตัวของวัฒนธรรมก่อนเชื้อ ( 5 ml ) เป็นเชื้อ 50 ml
3 สื่อวัฒนธรรมและหมักในฟลาสก์ขนาด 250 มิลลิลิตร ขวด บ่มที่อุณหภูมิ 30C
,180 รอบ / นาทีเป็นเวลา 15 ชั่วโมง
สำหรับ fermentations แบทช์เป็นส่วนลงตัวของวัฒนธรรม 3 ( 150 มล. ) เป็นเชื้อ
เป็น 1.5 L ของวัฒนธรรมการหมักอาหารที่มีส่วนประกอบเดียวกัน ของเชื้อในอาหารเลี้ยงเชื้อ 3
, L เครื่องปฏิกรณ์ชีวภาพ ( บรุนซ์ใหม่ทางวิทยาศาสตร์ , USA )
สภาพการหมักกำหนดดังนี้ อัตราการกวน 500 รอบต่อนาทีอุณหภูมิ 30 C
, อัตราการให้อากาศ 1.5 ลิตร / นาที ค่า pH คงที่ที่ 2.5 , 40 หรือ 6.5 ตลอดระยะเวลาการหมักด้วย HCl
1 M หรือ NaOH 2 เมตร สำหรับสองขั้นตอนการควบคุม fermentations
อ , pH คงที่ที่ 2.5 สำหรับแรก 96 H แล้วไว้ที่ 6.5
ช่วงต่อไปนี้ 72 ชั่วโมง ในระหว่างหมัก , ซิลิโคนกันฟองตัวแทน
วิธีการเพิ่มเมื่อจำเป็น เป็นส่วนลงตัวตัวอย่างและการวิเคราะห์ ( 20 มล ) คือกรองสุญญากาศด้วย
08 มม. เอสเทอร์ผสมเซลลูโลสเมมเบรน 148
( และน้ำ ) คืออย่างเหมาะสมเจือจางเพื่อตรวจสอบส่วนที่เหลือกลูโคส
ความเข้มข้นและความเข้มข้นสีภายนอก . นสเปกตรัม
ของน้ำซุปที่มีการบันทึกไว้โดย UV / VIS Spectrophotometer ( Unico
, USA ) จาก 350 nm 550 nm ในช่วงเวลา 1 นาโนเมตร นหน่วย ( AU )
( 410 , ความยาวคลื่นที่เฉพาะเจาะจง470 และ 510 nm ) ซึ่งใช้เป็นดัชนีของความเข้มข้น
สีภายนอก . กลูโคสที่เหลือก็วัดได้ตามมาตรฐาน 3 , 5 -
dinitrosalicylic acid ( DNS ) .
แต่ละตัวกรองถูกล้างด้วยน้ำกลั่นสองครั้งสามครั้ง และเก็บภายในเซลล์ความเข้มข้น
สี การวิเคราะห์ และเส้นใย
resuspended ในปริมาณกรดสารละลายเอทานอล ( 70% , V / V ,ในสารละลาย HCl , pH 2 )
เท่ากับปริมาณเริ่มต้นของการเทศนา ( 20 มล. ) โดย 1 . pH ของสารละลายเป็นกรด
เอทานอลเพื่อป้องกันสีส้มเปลี่ยนจากสีส้ม
สีแดง ระงับถูกกรองด้วยกระดาษกรอง และก่อนชั่ง
กรอง ( แยกเซลล์ ) ถูกยัดเยียดให้เหมือนกันสีเซลล์
อธิบายสำหรับน้ำซุปและ .เส้นใยที่ยังคงอยู่บนก่อนชั่งน้ำหนัก
กรองแห้งน้ำหนักคงที่ที่ 60C หาน้ำหนักเซลล์แห้ง ( dcw ) .
Thin layer chromatography ( TLC ) วิเคราะห์ข้อมูลด้วยสองระยะเคลื่อนที่แตกต่างกัน
บนซิลิกาเจล 60 f254 TLC แผ่น ( Merck ) ( 33 ) หนึ่งเฟสเคลื่อนที่
ประกอบด้วยเมทิลเบนซีน / ethyl acetate / กรด ( 7:3:1 ) และถูกใช้ในการแยกเม็ดสีสีแดงจาก
สีอื่น ๆกับโทรศัพท์มือถือนี้เฟสสีแดง
ถูกแยกกับสอง RF เท่ากับ 0.17 และ 0.21 , ในขณะที่สีเหลืองและสีส้ม
ตัวอย่างกับค่า Rf เท่ากับ 0.64 Co และ 0.68 . เป็นเฟสเคลื่อนที่ประกอบด้วยบีบ 2
/ / ปิโตรเลียมอีเทอร์เอทิลอะซิเตท ( 30:17:5 ) และใช้
แบ่งสีสีเหลืองจากสีอื่น ๆ สี เหลือง มีค่า Rf
0.67 และ 0.73 .ปริมาณตัวอย่างที่โหลดบน TLC plate เชิงปริมาณ :
10 มิลลิลิตรของตัวอย่างที่มีค่าค่า 410 nm ปรับ 50 AU คือ
โหลดบน TLC plate . สำหรับตัวอย่างที่มีค่าการดูดกลืนแสงที่ 410 nm ด้านล่าง 50
หน่วย ปริมาตร ( มิลลิลิตร ) เท่ากับ 500 / Au ถูกโหลด
สีลักษณะของสีที่นำมาวิเคราะห์ในแง่ของแถบสี
พื้นที่พารามิเตอร์สูงสุดและค่าการดูดกลืนแสงของเซลล์และ
สีโซลูชั่นระหว่าง 410 nm , 470 nm หรือ 510 nm และระยะช่วง
1.5e2.0 สำหรับการวิเคราะห์ต่อไป พารามิเตอร์ ( L * a * b * C * HAB ) สีโซลูชั่น
ในแถบสีพื้นที่วัดโดย cr-400 colorimeter ( Minolta , โอซาก้า ,
ญี่ปุ่น ) L * ซึ่งช่วงจาก 0 ( สมบูรณ์ดำ ) 100 ( ผิวขาว )แสดงถึงความสว่าง
; a * และ b * แสดงสี พิกัด ที่บวกค่า a * และ b *
แสดงสีแดงและสีเหลือง ในขณะที่ค่า a * และ b * เท่ากับบ่งชี้สีเขียวและสีฟ้า ,
) ; C * Chroma ที่ C * ¼ [ ( * ) 2 þ ( b * ) 2
]
1 / 2 และเป็นตัวแทน
ความอิ่มตัวของสี : Chroma ค่าปิด 0 บ่งชี้แบบ duller หรือเกรเยอร์สี ในขณะที่ค่านิยมสูงขึ้นบ่งชี้
สีสดใสมากกว่าสีมุม ( HAB ) ที่
HAB ¼แทน 1
( b * / * ) คือตัวเลขที่แสดงถึงค่าสี : สีมุม 0 , 90 , 180 และ 270
เป็นตัวแทนของสีแดง , สีเหลือง , สีเขียวและสีฟ้า
resu ตามลำดับ
การแปล กรุณารอสักครู่..
ภาษาอื่น ๆ
การสนับสนุนเครื่องมือแปลภาษา: กรีก, กันนาดา, กาลิเชียน, คลิงออน, คอร์สิกา, คาซัค, คาตาลัน, คินยารวันดา, คีร์กิซ, คุชราต, จอร์เจีย, จีน, จีนดั้งเดิม, ชวา, ชิเชวา, ซามัว, ซีบัวโน, ซุนดา, ซูลู, ญี่ปุ่น, ดัตช์, ตรวจหาภาษา, ตุรกี, ทมิฬ, ทาจิก, ทาทาร์, นอร์เวย์, บอสเนีย, บัลแกเรีย, บาสก์, ปัญจาป, ฝรั่งเศส, พาชตู, ฟริเชียน, ฟินแลนด์, ฟิลิปปินส์, ภาษาอินโดนีเซี, มองโกเลีย, มัลทีส, มาซีโดเนีย, มาราฐี, มาลากาซี, มาลายาลัม, มาเลย์, ม้ง, ยิดดิช, ยูเครน, รัสเซีย, ละติน, ลักเซมเบิร์ก, ลัตเวีย, ลาว, ลิทัวเนีย, สวาฮิลี, สวีเดน, สิงหล, สินธี, สเปน, สโลวัก, สโลวีเนีย, อังกฤษ, อัมฮาริก, อาร์เซอร์ไบจัน, อาร์เมเนีย, อาหรับ, อิกโบ, อิตาลี, อุยกูร์, อุสเบกิสถาน, อูรดู, ฮังการี, ฮัวซา, ฮาวาย, ฮินดี, ฮีบรู, เกลิกสกอต, เกาหลี, เขมร, เคิร์ด, เช็ก, เซอร์เบียน, เซโซโท, เดนมาร์ก, เตลูกู, เติร์กเมน, เนปาล, เบงกอล, เบลารุส, เปอร์เซีย, เมารี, เมียนมา (พม่า), เยอรมัน, เวลส์, เวียดนาม, เอสเปอแรนโต, เอสโทเนีย, เฮติครีโอล, แอฟริกา, แอลเบเนีย, โคซา, โครเอเชีย, โชนา, โซมาลี, โปรตุเกส, โปแลนด์, โยรูบา, โรมาเนีย, โอเดีย (โอริยา), ไทย, ไอซ์แลนด์, ไอร์แลนด์, การแปลภาษา.
- Therefore
- มันอลังการมาก
- It's really very big
- yes darling, because i want to live my l
- เสียใจ
- base
- and droplet charges
- ฉันอยุ่สาขาบริหารธุรกิจ
- Verbatim
- ฉันจะไปญี่ปุ่น
- ผู้สูงอายุที่มีปัญหาด้านสายตา
- ร้านขายของชำ
- ask for 10% for both the machine and the
- เขาคนนั้นหายไปไหน
- No cheating on the test is preferred
- clothes
- -ได้สำเร็จหลักสูตรการฝึกระดับฝีมือ สาขาก
- Pyrolysis by thermogravimetric
- ให้บริการถ่ายถาพ ตกแต่งภาพ ให้กับลูกค้า
- The layout of the products helps me in p
- Liberalism is an economic concept that S
- 1. สะตอ 100 กรัม2. กะปิ 1/2 ช้อนโต๊ะ3. ก
- ซึ่งสามารถจำแนกได้เป็น กากถั่วเหลือง 300
- 술 한잔 해야지
