The hememodification in GlbN is the

The hememodification in GlbN is the alkylation of histidine Nε2 by a
heme vinyl Cα as shown in Fig. 1b. Several studies have defined the
conditions under which the reaction occurs and have amounted to a
plausible mechanism [20,21]. Following reduction to the ferrous state,
the key steps are the protonation of the heme vinyl Cβ followed by
(or in concert with) a nucleophilic attack by a neutral histidine. In
wild-type (WT) ferrous GlbNs, the modification reaches completion in
a few seconds at neutral pH and is accelerated by decreasing pH as
long as acid denaturation is avoided. We have monitored the reaction
in variants of GlbN and proposed that the main determinant of linkage
formation is sterics, i.e., whether a productive orientation of the vinyl
and histidine ring can be adopted. This is evident in the preparation of
a protein containing the WT crosslink (H117 to heme 2-vinyl) and an
engineered crosslink (L79H to heme 4-vinyl) [22]. Additionally, we
have noted that certain ligands to the ferrous state such as the π-acids
CO [21], NO• and O2 (unpublished observations) inhibit the reaction,
presumably because of their propensity for a redistribution of electron
density of the ferrous heme (e.g., formation of Fe(III)–O2
− from
Fe(II)–O2, [23]) disfavoring vinyl protonation.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

hememodification ใน GlbN เป็น alkylation ของฮิสติดีนNε2โดย
ไวนิล heme Cαดังแสดงในรูป 1b การศึกษาหลายแห่งได้กำหนดไว้
ภายใต้เงื่อนไขที่ปฏิกิริยาเกิดขึ้นและมีจํานวน
กลไกที่เป็นไปได้ [20,21] ต่อไปนี้การลดลงของรัฐเหล็ก
ขั้นตอนที่สำคัญคือโปรตอนของไวนิล heme Cβตามด้วย
(หรือในคอนเสิร์ตด้วย) nucleophilic โจมตีโดยฮิสติดีนที่เป็นกลาง ใน
ป่าชนิด (น้ำหนัก) GlbNs เหล็ก, การปรับเปลี่ยนถึงเสร็จใน
ไม่กี่วินาทีที่ pH เป็นกลางและจะเร่งโดยการลดค่าความเป็นกรดเป็น
เวลานานเป็น denaturation กรดจะหลีกเลี่ยง เราได้รับการตรวจสอบปฏิกิริยา
ในสายพันธุ์ของ GlbN และเสนอว่าปัจจัยหลักของการเชื่อมโยง
การก่อตัวเป็น sterics คือไม่ว่าจะเป็นการวางแนวทางการผลิตของไวนิล
และแหวนฮิสติดีนสามารถใช้เป็นแนวทาง นี่คือความชัดเจนในการจัดทำ
โปรตีนที่มี WT Crosslink (H117 จะ heme 2 ไวนิล) และ
Crosslink วิศวกรรม (L79H เพื่อ heme 4 ไวนิล) [22] นอกจากนี้เรา
ได้ตั้งข้อสังเกตว่าแกนด์บางอย่างที่รัฐธาตุเหล็กเช่นπ-กรด
CO [21], NO •และ O2 (ข้อสังเกตที่ไม่ได้เผยแพร่) ยับยั้งปฏิกิริยา
คงเพราะนิสัยชอบของพวกเขาสำหรับการกระจายของอิเล็กตรอน
หนาแน่นของ heme เหล็ก (เช่นการก่อตัวของเฟ (III) -O2
- จาก
Fe (II) -O2 [23]) disfavoring โปรตอนไวนิล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การ hememodification ใน glbn เป็นแอลคิลเลชันของฮิสติดีน N ε 2 โดย
ฮีมไวนิล C αดังแสดงในรูปที่ 1 บี หลายการศึกษาได้กำหนด
ภายใต้เงื่อนไขที่ปฏิกิริยาเกิดขึ้น และมีจำนวนเงิน
เหตุผลกลไก [ 20,21 ] ต่อไปนี้ลดสถานะเหล็ก ,
ขั้นตอนสำคัญคือโปรตอนของฮีมไวนิล C ตามด้วย
บีตา( หรือในคอนเสิร์ตกับ ) การโจมตี nucleophilic โดยีนที่เป็นกลาง ใน
ยา ( WT ) glbns เหล็ก , การปรับเปลี่ยนถึงเสร็จสิ้นในไม่กี่วินาทีที่ pH เป็นกลาง
และถูกเร่งโดยลดค่าพีเอชเป็นกรด (
นานเท่าที่จะหลีกเลี่ยง เรามีการติดตามปฏิกิริยา
ในสายพันธุ์ของ glbn และเสนอว่าปัจจัยหลักของการสร้างการเชื่อมโยงเป็น sterics
.ไม่ว่าทิศทางของการผลิตไวนิล
และแหวนีนสามารถนำมาใช้ นี้เห็นได้ชัดในการเตรียม
โปรตีนที่มีปริมาณพันธะข้าม ( h117 ฮีม 2-vinyl ) และวิศวกรรม ( l79h
Crosslink ฮีม 4-vinyl ) [ 22 ] นอกจากนี้ มีข้อสังเกตว่าบางอย่างเรา
ลิแกนด์กับรัฐ เหล็ก เช่น π - กรด
Co [ 21 ] ไม่บวกและ O2 ( สังเกตพิมพ์ ) ยับยั้งปฏิกิริยา
แต่เพราะนิสัยของพวกเขาสำหรับการกระจายของอิเล็กตรอนความหนาแน่นของ heme เหล็ก
( เช่น การก่อตัวของ Fe ( III ) และบริษัท เวสเทิร์น จาก O2

Fe ( II ) และ O2 [ 23 ] ) disfavoring ไวนิลโปรตอน .