2.5. Analysis of individual phenolic compounds by analytical
RP-HPLC
The dried active extracts were hydrolyzed according to the
slightly modified method of Proestos et al. [34]. Forty milliliters of
methanol containing BHT (1 mg/ml) were added to 0.5 g of dried
fractions. Then, 10 ml of 6 M HCl were added. The mixture was
stirred carefully and then sonicated for 15 min and refluxed in
a water bath at 90 ◦C for 2 h. The obtained mixture was filtered
through a 0.45 m membrane filter and injected to HPLC/UV.
The separation of phenolic compounds was performed with an
Agilent 1100 series HPLC system equipped with on-line degasser (G
1322A), a quaternary pump (G 1311A), a thermostatic autosampler
(G 1313A), a column heater (G 1316A) and a diode array detector
(G 1315A). Instrument control and data analysis were carried
out using Agilent HPLC Chemstation 10.1 edition through Windows
2000. The separation was carried out on a reverse phase ODS C18
(4 m, 250 mm
×
4.6 mm, Hypersil) column used as a stationary
phase at ambient temperature. The mobile phase consisted of acetonitrile
(solvent A) and water with 0.2% sulfuric acid (solvent B).
The flow rate was kept at 0.5 ml/min.
The gradient program was as follows: 15% A/85% B (0–12 min),
40% A/60% B (12–14 min), 60% A/40% B (14–18 min), 80% A/20% B
(18–20 min), 90% A/10% B (20–24 min), 100% A (24–28 min). The
injection volume was 20 l and peaks were monitored at 280 nm.
Phenolic compounds of S. arenaria extracts were identified by comparing
their retention times with those of pure standards. The
results were expressed as % of each compound from the total phenolic
compounds.
2.5 การวิเคราะห์ของแต่ละสารฟีนอโดยวิเคราะห์RP HPLCใช้สารสกัดแห้งถูกไลซ์ตามเล็กน้อยแก้ไขวิธีของ Proestos et al. [34] 40 มิลลิลิตรของบาทที่มีเมทานอล (1 มิลลิกรัม/มิลลิลิตร) เพิ่ม 0.5 กรัมแห้งเศษส่วน แล้ว 10 ml ของ 6 M HCl เพิ่ม เป็นส่วนผสมกวนอย่างระมัดระวังแล้ว sonicated 15 นาที และ refluxed ในอ่างน้ำที่ 90 ◦C สำหรับ 2 ชม ส่วนผสมได้รับถูกกรองผ่านตัวกรองเมมเบรน 0.45 ม. และฉีดการ HPLC/UVการแยกของสารฟีนอดำเนินการกับการชุด Agilent 1100 ระบบ HPLC มี degasser ออนไลน์ (G1322A), เครื่องสี่สูบ (G 1311A) การเกิดระบบ(G 1313A), ร้อนคอลัมน์ (G 1316A) และเครื่องตรวจจับไดโอดอาร์เรย์(G 1315A) เครื่องมือควบคุมและการวิเคราะห์ข้อมูลดำเนินการออกใช้รุ่น Agilent HPLC Chemstation 10.1 ผ่านหน้าต่าง2000 ดำเนินการการแยกออกจากด้านหลังในเฟส ODS C18(4 m, 250 มม.×4.6 มม. Hypersil) ใช้เป็นเขียนคอลัมน์ระยะที่อุณหภูมิ ขั้นตอนการเคลื่อนที่ประกอบด้วย acetonitrile(ก) ตัวทำละลายและน้ำกรดซัลฟิวริก 0.2% (ตัวทำละลาย B)อัตราการไหลที่ถูกเก็บไว้ที่ 0.5 ml/นาทีโปรแกรมไล่ระดับได้ดังนี้: 15% A/85% B (0 – 12 นาที),40% A/60% B (12 – 14 นาที 60% B A/40% (14-18 นาที), 80% A/20% B(18-20 นาที), 90% A/10% B (20 – 24 นาที 100% (24 – 28 นาที) การฉีดปริมาณเป็น 20 l และมีการตรวจสอบยอดที่ 280 nmสารประกอบฟีนอ S. arenaria สารสกัดจากถูกระบุ โดยการเปรียบเทียบเวลาเก็บรักษาของพวกเขากับผู้บริสุทธิ์มาตรฐาน การผลลัพธ์ถูกแสดงเป็น%ของแต่ละสารประกอบจากฟีนอลรวมสารประกอบ
การแปล กรุณารอสักครู่..
