Cloning and heterologous expression

Cloning and heterologous expression of a novel
ligninolytic peroxidase gene from poroid brown-rot
fungus Antrodia cinnamomea

A novel ligninolytic peroxidase gene (ACLnP) was cloned and characterized from a poroid brownrot
fungus, Antrodia cinnamomea. The genomic DNA of the fungus harboured two copies of
ACLnP, with a length of 2111 bp, interlaced with 12 introns, while the full-length cDNA was
1183 bp, with a 66 bp signal peptide and an ORF of 990 bp. The three-dimensional molecular
structure model was comparable to that of the versatile peroxidase of Pleurotus eryngii. ACLnP was
cloned into vector pQE31, successfully expressed in Escherichia coli strain M15 under the control
of the T5 promoter and produced a non-glycosylated protein of about 38 kDa, pI 5.42. The native
and recombinant ACLnP was capable of oxidizing the redox mediator veratryl alcohol, and also
decolorized bromophenol blue and 2,6-dimethoxyphenol dyes, implicating a functional extracellular
peroxidase activity. The significance of discovering a functional ACLnP gene in A. cinnamomea in
terms of wood degradation and colonization capacity in its unique niche is discussed

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

โคลน และ heterologous นิพจน์ของนวนิยาย
ยีน peroxidase ligninolytic จาก poroid สีน้ำตาล-rot
เชื้อรา Antrodia cinnamomea

ยีนมี peroxidase นวนิยาย ligninolytic (ACLnP) ถูกโคลน และลักษณะจาก poroid brownrot
เห็ดรา Antrodia cinnamomea ดีเอ็นเอ genomic ของเห็ดราสำเนาของ harboured
ACLnP ความยาวของ bp 2111 การอินเทอร์เลซกับ 12 introns ขณะ cDNA ปราศจาก
1183 bp เพปไทด์สัญญาณ bp ที่ 66 และเป็น ORF 990 bp ในสามมิติระดับโมเลกุล
โมเดลโครงสร้างได้เปรียบที่ peroxidase อเนกประสงค์ของ eryngii เห็ดนาง ACLnP ถูก
โคลนเป็นเวกเตอร์ pQE31 สำเร็จแสดงใน Escherichia coli ต้องใช้ M15 ภายใต้การควบคุม
ของโปรโมเตอร์ T5 และผลิตโปรตีนไม่ใช่ glycosylated ของประมาณ 38 kDa พาย 5.42 พื้นเมือง
และความสามารถในการรับอิเล็กตรอน redox mediator veratryl แอลกอฮอล์ recombinant ACLnP และ
decolorized bromophenol บลูและ 2,6-dimethoxyphenol สี implicating ที่ทำงาน extracellular
peroxidase กิจกรรม ความสำคัญของการค้นพบยีน ACLnP ทำงานใน cinnamomea A. ใน
กล่าวถึงเงื่อนไขของความสามารถย่อยสลายและสนามในช่องเฉพาะไม้

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การโคลนและการแสดงออกของ heterologous นวนิยาย
ยีนเปอร์ออกซิเด ligninolytic จาก poroid สีน้ำตาลเน่า
เชื้อรา Antrodia cinnamomea นวนิยายยีนเปอร์ออกซิเด ligninolytic (ACLnP) ถูกโคลนและโดดเด่นจาก brownrot poroid เชื้อรา Antrodia cinnamomea ดีเอ็นเอของเชื้อราเก็บงำสองสำเนาของACLnP, มีความยาว 2,111 bp, interlaced กับ 12 introns ขณะที่ยีนยาวเต็มรูปแบบเป็น1,183 bp โดยมีเปปไทด์สัญญาณ 66 bp และ ORF 990 bp โมเลกุลสามมิติรูปแบบโครงสร้างเป็นเปรียบกับของเปอร์ออกซิเดอเนกประสงค์ของ Pleurotus eryngii ACLnP ถูกโคลนเข้าไป pQE31 เวกเตอร์แสดงที่ประสบความสำเร็จในสายพันธุ์ Escherichia coli M15 ภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์ T5 และผลิตโปรตีนที่ไม่มี glycosylated ประมาณ 38 กิโลดาลตัน, pI 5.42 พื้นเมืองและ recombinant ACLnP เป็นความสามารถในการออกซิไดซ์คนกลางรีดอกซ์ veratryl เครื่องดื่มแอลกอฮอล์และยังdecolorized bromophenol สีฟ้าและ 2,6-dimethoxyphenol, รู้เห็น extracellular ทำงานกิจกรรม peroxidase ความสำคัญของการค้นพบยีน ACLnP ทำงานในเอ cinnamomea ในแง่ของการย่อยสลายไม้และความสามารถในการล่าอาณานิคมในช่องที่เป็นเอกลักษณ์จะกล่าวถึง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การโคลนและการแสดงออกของยีนเปอร์ออกซิเดสชนิดใหม่จาก poroid ค่า

สีน้ําตาลเน่าเชื้อรา antrodia ฤทธิ์ทางชีวภาพ

ยีนเปอร์ออกซิเดสค่าใหม่ ( aclnp ) ถูกโคลนและศึกษาลักษณะจาก poroid brownrot
เห็ดรา antrodia ฤทธิ์ทางชีวภาพ . การแยกดีเอ็นเอของเชื้อรา เก็บงำสองสำเนาของ
aclnp มีความยาวร่วม BP interlaced กับ 12 introns ในขณะที่ยีนเต็มตัวคือ
แต่ BP กับ 66 BP สัญญาณเปปไทด์และ ORF ของ 990 BP . แบบจำลองโครงสร้างโมเลกุล
สามมิติได้เทียบเท่ากับที่ของเปอร์ออกซิเดสที่หลากหลายของนางรมรินจิ . aclnp คือ
โคลนเข้า pqe31 เวกเตอร์เรียบร้อยแล้วแสดงออกในเชื้อ Escherichia coli สายพันธุ์ M15 ภายใต้การควบคุมของโปรโมเตอร์
T5 และผลิตโปรตีนประมาณ 38 kDa ของไม่อื่นด 5.42 . พื้นเมือง
โปรตีนที่สามารถออกซิไดซ์และ aclnp ไฟฟ้าคนกลาง veratryl แอลกอฮอล์และยัง
พลึงสีฟ้าและโบรโมฟีน 2,6-dimethoxyphenol สีย้อม พาดพิงไปถึง กิจกรรมเอนไซม์ extracellular
การทํางาน ความสำคัญของการค้นพบยีนที่ทำหน้าที่ใน aclnp . ฤทธิ์ทางชีวภาพในแง่ของความจุของการย่อยสลาย
ไม้และการล่าอาณานิคมในโพรงที่เป็นเอกลักษณ์คือ กล่าว