MATERIALS AND METHODS Microencapsul

MATERIALS AND METHODS Microencapsulation
The method of Sheu and Marshall (27) was adopted for encapsulating the bifidobacterial cells. Microencap- sulation was performed using κ-carrageenan (Sigma Chemical Co., St. Louis, MO). Cells were harvested

from 80 ml of a 24-h culture (late log phase) by centrifu- gation at 5000  g. The cells were then washed twice, under the same centrifugation conditions, with 20 ml of sterile normal saline and resuspended in 10 ml of sterile saline. The final cell concentration was adjusted to 1.0 to 1.2  109 cfu/ml by diluting with sterile saline and checking the optical density at 600 nm. A 20-ml cell suspension was added to 60 ml of 2% κ-carrageenan, containing 0.9% NaCl to improve the dispersability of κ-carrageenan (21), and tempered in a water bath at
47 to 48C. The κ-carrageenan was boiled but not steri-
lized, since sterilization prevents encapsulation. Vege- table oil (100 ml, Crisco) at 40C was stirred for 2 to 3 min with 0.1% (vol/vol) Tween 80 (Fisher Scientific, Pittsburgh, PA) added as an emulsifier. The cell/κ-car- rageenan mix was then quickly added to the oil and stirred for about 10 min to allow for emulsification and encapsulation to occur. Then, 150 ml of 0.3 M KCl was added quickly down the side of the beaker to break the emulsion. The oil phase was removed from the top with an aspirator and the capsules were harvested from the KCl solution by gentle centrifugation at 350  g for 10 min. The capsules were then washed twice in 0.3 M KCl, using the same centrifugation conditions, and stored at
4C until used. The capsules were used within 1 to 2 d.


Yogurt

Nonfat dried milk and water were blended at 50C for a total solids content of approximately 15%. The resulting mix was pasteurized at 95C for 10 min and cooled to 42 to 43C before inoculation with starter culture (YC-180, Chr. Hansen, Milwaukee, WI). Since YC-180 is a relatively slow acid producer, 6 to 7% starter was added. The parent mix was divided into three por- tions. One portion was the control (without bifidobact- eria), and encapsulated and nonencapsulated bifido- bacteria were added separately to the other two por- tions to give an initial cell concentration of 4 to 5  108 cfu/ml for each treatment. The different mixes (control, encapsulated, and nonencapsulated) were then dis- pensed into 100-ml polystyrene cups and incubated at
42  1C for 4 to 5 h. The final titratable acidity was
monitored and stopped to 0.90 to 0.95% as lactic acid. Samples were stored at 4.4C for storage studies.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

วัสดุและวิธีการที่ไมโคร
วิธีการ sheu และมาร์แชลล์ (27) ถูกนำมาใช้สำหรับห่อหุ้มเซลล์แสงอาทิตย์เซลล์ bifidobacterial microencap-sulation ได้รับการดำเนินการโดยใช้κ-คาราจีแนน (ซิกเคมีร่วม. เซนต์. Louis, MO) เซลล์ที่ถูกเก็บเกี่ยว

จาก 80 มล. ของวัฒนธรรม 24 ชั่วโมง (ขั้นตอนการเข้าสู่ระบบในช่วงปลาย) โดย centrifu-gation ที่ 5000 กรัม เซลล์ที่ถูกล้างแล้วสองครั้งภายใต้เงื่อนไขการปั่นแยกเดียวกันกับ 20 มิลลิลิตรของน้ำเกลือปลอดเชื้อและ resuspended ในปริมาณ 10 มล. น้ำเกลือปลอดเชื้อ ความเข้มข้นของเซลล์ขั้นสุดท้ายที่จะมีการปรับ 1.0-1.2  109 / มล. โคโลนีโดยเจือจางด้วยน้ำเกลือปลอดเชื้อและการตรวจสอบความหนาแน่นของแสงที่ 600 นาโนเมตร เซลล์แขวนลอย 20 มล. ถูกบันทึกอยู่ใน 60 มล. 2% κ-คาราจีแนนมี 09% โซเดียมคลอไรด์ในการปรับปรุง dispersability ของκ-คาราจีแนน (21), และอารมณ์ในอ่างน้ำที่
47-48 ค κ-คาราจีแนนถูกต้ม แต่ไม่ steri-
lized เนื่องจากฆ่าเชื้อป้องกันการห่อหุ้ม น้ำมัน Vege ตา​​ราง (100 มล. , Crisco) ที่ 40 คถูกกวนเป็น 2 ถึง 3 นาที 0.1% (โดยปริมาตร / ปริมาตร) ทวี 80 (ฟิชเชอร์ทางวิทยาศาสตร์, Pittsburgh, PA) เพิ่มเป็นอิมัลชันผสม rageenan cell/κ-car-จากนั้นก็เข้ามาอย่างรวดเร็วเพื่อให้น้ำมันและคนประมาณ 10 นาทีเพื่อให้ emulsification และการห่อหุ้มที่จะเกิดขึ้น แล้ว 150 มล. 0.3 เมตร kcl ถูกเพิ่มเข้ามาอย่างรวดเร็วลงด้านข้างของถ้วยแก้วที่จะทำลายอิมัลชันระยะที่น้ำมันจะถูกลบออกจากด้านบนที่มีเครื่องช่วยหายใจและแคปซูลถูกเก็บเกี่ยวจากการแก้ปัญหา kcl โดยการหมุนเหวี่ยงอ่อนโยนที่ 350 กรัมเป็นเวลา 10 นาที แคปซูลนั้นถูกล้างสองครั้งใน 0.3 เมตร kcl โดยใช้เงื่อนไขการหมุนเหวี่ยงเดียวกันและเก็บไว้ที่
4  C จนกว่าจะใช้ แคปซูลถูกนำมาใช้ภายใน 1 ถึง 2 ง.




โยเกิร์ตไม่มีน้ำมันนมแห้งและน้ำปั่นที่ 50  C เป็นเวลาปริมาณของแข็งทั้งหมดประมาณ 15% ผสมผลให้ได้รับการพาสเจอร์ไรส์ที่ 95  C เป็นเวลา 10 นาทีและเย็นที่ 42-43  C ก่อนที่จะฉีดวัคซีนกับวัฒนธรรมเริ่มต้น (YC-180, chr. hansen, Milwaukee, WI) ตั้งแต่ YC-180 เป็นผู้ผลิตกรดค่อนข้างช้า, 6-7% เริ่มต้นถูกเพิ่มเข้ามา ผสมปกครองแบ่งออกเป็นสาม por ทั้งนี้ส่วนหนึ่งคือการควบคุม (ไม่ bifidobact-Eria) และห่อหุ้มและ nonencapsulated แบคทีเรีย bifido ถูกเพิ่มแยกกันกับอีกสอง por ทั้งนี้เพื่อให้ความเข้มข้นของเซลล์เริ่มต้นของ 4 ถึง 5  108 / มล. โคโลนีสำหรับแต่ละการรักษา สูตรที่แตกต่างกัน (การควบคุมการห่อหุ้มและ nonencapsulated) เป็นโรคแล้ว pensed ลงในถ้วยสไตรีน 100 มล. และบ่มที่
42  1  C เป็นเวลา 4 ถึง 5 ชั่​​วโมง ความเป็นกรดที่ไตเตรทสุดท้ายคือการตรวจสอบและ
หยุด 0.90-0.95% เป็นกรดแลคติก ตัวอย่างถูกเก็บไว้ที่ 4.4 คสำหรับการศึกษาการจัดเก็บ.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Microencapsulation วิธีและวัสดุ
วิธีการ Sheu และมาร์แชล (27) ถูกนำมาใช้ใน encapsulating เซลล์ bifidobacterial Microencap-sulation ที่ดำเนินการโดยใช้κ-carrageenan (ซิกเคมี Co. เซนต์หลุยส์ MO) เซลล์เก็บเกี่ยว

จาก 80 ml ของวัฒนธรรม 24 h (สายล็อกระยะ) โดย centrifu-gation ที่ 5000  g เซลล์ถูกแล้วล้างสองครั้ง ภายใต้ centrifugation เงื่อนไขเดียว กับ 20 ml ของกอซปกติ saline และ resuspended ใน 10 ml ของน้ำเกลือฆ่าเชื้อ ความเข้มข้นสุดท้ายเซลล์ถูกปรับปรุง 1.0 การ 1.2  109 cfu/ml โดย diluting ด้วยน้ำเกลือฆ่าเชื้อ และตรวจสอบความหนาแน่นออปติคัลที่ 600 nm ระงับเซลล์ 20 ml ถูกเพิ่ม 60 ml ของ 2% κ-carrageenan ประกอบด้วย 09% NaCl ในการปรับปรุง dispersability ของκ-carrageenan (21), และอารมณ์ในห้องน้ำที่
47 เพื่อ 48C Κ carrageenan ถูกต้มแต่ไม่ steri-
lized เนื่องจากฆ่าเชื้อป้องกันการ encapsulation มีกวนน้ำมันตาราง vege (100 ml, Crisco) ที่ 40C สำหรับ 2-3 นาทีด้วย 0.1% (vol/vol) Tween 80 (Fisher วิทยาศาสตร์ พิตส์เบิร์ก PA) เพิ่มเป็นอิมัลซิ ผสมเซลล์/κ-รถยนต์-rageenan แล้วอย่างรวดเร็วเพิ่มน้ำมัน และกวนสำหรับประมาณ 10 นาทีให้ emulsification ปริมาณการ encapsulation เกิดขึ้น , 150 Ml ของ 0.3 M KCl ที่เพิ่มอย่างรวดเร็วลงข้างบีกเกอร์จะทำลายอิมัลชัน ระยะน้ำมันถูกเอาออกจากด้านบนมีการ aspirator และแคปซูลเก็บเกี่ยวจากโซลูชัน KCl โดย centrifugation อ่อนโยนที่ 350 g สำหรับ 10 นาที แคปซูลถูกล้างแล้วสองครั้งใน 0.3 M KCl ใช้เงื่อนไข centrifugation เดียว และจัดเก็บที่
4C จนกว่าจะใช้ ใช้ภายใน 1-2 แคปซูล d.


โยเกิร์ต

Nonfat แห้งนมและน้ำผสมได้ที่ 50C สำหรับเนื้อหาของแข็งทั้งหมดประมาณ 15% ผสมผล pasteurized ที่ 95C สำหรับ 10 นาที และระบายความร้อนด้วยการ 42 ไป 43C ก่อน inoculation กับวัฒนธรรมสตาร์ท (YC-180, Chr. แฮนเซ่น มิลวอกี WI) YC-180 เป็น โปรดิวเซอร์กรดค่อนข้างช้า มีเพิ่มเริ่มต้น 6-7% ส่วนผสมหลักถูกแบ่งออกเป็นสามปอ-tions ส่วนหนึ่งถูกควบคุม (โดย bifidobact eria), และสรุป และ nonencapsulated bifido แบคทีเรียเพิ่มแยกต่างหากเพื่อการอื่น ๆ สองปอ-tions ให้เข้มข้นเซลล์เริ่มต้นที่ 4-5  108 cfu/ml สำหรับผู้ป่วยแต่ละ ออกแบบผสมแตกต่างผสาน (ควบคุม สรุป และ nonencapsulated) แล้วได้หรือไม่??-pensed ลงในถ้วยโฟม 100 มล. และ incubated ที่
1C 42 สำหรับ 4-5 h ว่า titratable สุดท้ายถูก
ตรวจสอบ และหยุดการ 0.90 0.95% เป็นกรด ตัวอย่างถูกเก็บไว้ที่ 4.4C ศึกษาเก็บ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เอกสารวิธีใดวิธีหนึ่งวิธี microencapsulation
และ sheu และมาร์แชล( 27 )ได้นำมาใช้เพื่อครอบคลุมพื้นที่เซลล์ bifidobacterial ที่ microencap - sulation ได้ดำเนินการโดยใช้κ - carrageenan ( Six Sigma สารเคมี. co . th St . Louis , MO ) เซลล์ก็เก็บเกี่ยว

จาก 80 มล. 24 - ชั่วโมงวัฒนธรรม(เฟสล็อกอินเข้าสู่ช่วงดึก)โดย centrifu - gation ที่ G 5000  เซลล์ที่ได้ล้างสองครั้งแล้วผลิต ภายใต้ เงื่อนไขเดียวกันกับที่พร้อมด้วย 20 มล.ขวดนมปราศจากเชื้อได้ปกติน้ำเกลือและ resuspended ใน 10 มล.ฆ่าเชื้อขวดนมของน้ำเกลือ. การรวมกลุ่มเซลล์ครั้งสุดท้ายที่มีการปรับให้ 1.0 ถึง 1.2  109 CFU ,/ ML โดย diluting ฆ่าเชื้อขวดนมด้วยน้ำเกลือและตรวจสอบความหนาแน่นออปติคอลไดรฟ์ออกที่ 600 นิวตันเมตร 20 - แขวนเซลล์มล.ที่ถูกเพิ่มใน 60 มล. 2% κ - carrageenan ประกอบด้วย 09% NaCl เพื่อปรับปรุง dispersability ของκ - carrageenan ( 21 )และกระจกแบบเทมเปอร์นิร ภัย กระจกแบบอยู่ในอ่างอาบน้ำน้ำที่
47 ถึง 48 c . κ - carrageenan นั้นต้มสุกแต่ไม่ steri -
lized นับตั้งแต่การฆ่าเชื้อเพื่อป้องกันไม่ให้ไลบรารี่ใช้งาน ผักคั้นสด - โต๊ะน้ำมัน( 100 มล. crisco )ที่ 40 c รุนแรงขึ้นสำหรับผู้ใช้บริการ 2 ถึง 3 นาทีพร้อมด้วย 0.1% (/ 2006 / 2006 /)ส่วนกลาง 80 (ชาวประมงทางวิทยาศาสตร์ Pittsburgh ป่า)เพิ่มเป็น emulsifier ที่ผสมให้เข้ากันเซลล์/κ - รถ - rageenan นั้นได้อย่างรวดเร็วเพิ่มในน้ำมันและขยับสำหรับประมาณ 10 นาทีเพื่ออนุญาตให้สำหรับไลบรารี่ใช้งาน(และจะเกิดขึ้นแล้ว แล้ว 150 มล.ของ 0.3 ม. kcl ได้ถูกเพิ่มลงไปได้อย่างรวดเร็วด้านข้างของโถปั่นเพื่อการหยุดพักที่น้ำยาช่วงที่น้ำมันถูกลบออกจากที่ด้านชั้นบนสุดพร้อมด้วยเครื่องดูดและแคปซูลถูกเก็บเกี่ยวจาก kcl โซลูชันโดยผลิตที่อ่อนโยน 350 กรัมเป็นเวลา 10 นาทีแคปซูลจากนั้นก็ล้างสองครั้งใน 0.3 ม. kcl ,การใช้ที่เหมือนกันผลิตและเก็บไว้ใน
4 c จนกว่าใช้. แคปซูลนี้จะถูกใช้ ภายใน 1 ถึง 2 D .




โยเกิร์ตnonfat แห้งน้ำและนมผสมเป็นที่ 50 c สำหรับเนื้อหาเป็นของแข็งรวมประมาณ 15% ผสมให้เข้ากันได้ส่งผลให้มีรสจืดที่ 95 c สำหรับ 10 นาทีและทำความเย็นถึง 42 กับ 43 c ก่อนปลูกฝีพร้อมด้วยอาหารเรียกน้ำย่อยวัฒนธรรม( YC -180 , CHR Hansen Milwaukee , WI ) YC -180 ตั้งแต่เป็นผู้ผลิตน้ำกรดค่อนข้างช้าที่เรียกน้ำย่อย 6 ถึง 7% ได้เพิ่ม การผสมผสานของพ่อแม่ที่ถูกแบ่งออกเป็นสาม ภพ - ใช้งานหนึ่งส่วนจะเป็นการควบคุม(ไม่มี bifidobact - งาน ERIA )และแบบห่อหุ้มและ nonencapsulated bifido - เชื้อแบคทีเรียได้เพิ่มเข้ามาแยกกันเพื่อที่คนทั้งสอง ภ . - ใช้งานในการให้บริการข้อมูลของสถานีฐานครั้งแรกความเข้มข้นของ 4 ใน 5  108 CFU ,/ ML สำหรับแต่ละการบำบัด. ผสมผสานที่แตกต่างกันไป(การควบคุมแบบห่อหุ้มและ nonencapsulated )ได้แล้ว pensed incubated ในถ้วยและโพลีสไตรีน 100 - มล.ที่
... -42  1 c สำหรับผู้ใช้บริการ 4 ถึง 5 ชั่วโมง. กรด titratable สุดท้ายเป็น
ซึ่งจะช่วยตรวจสอบและหยุดเพื่อ 0.90 ถึง 0.95% เป็นกรดเกี่ยวกับนม ตัวอย่างก็จัดเก็บไว้ที่ 4.4 c สำหรับการศึกษาการจัดเก็บ.