METHODSCell line. GF cells (Clem et

METHODS
Cell line. GF cells (Clem et al., 1961) were purchased from ATCC.
Cell lines were maintained in basal medium Eagle (BME; MP
Biomedicals) supplemented with 10% FBS (Equitech-Bio) and
antibiotics (100 U penicillin ml21 and 100 mg streptomycin ml21),
and were cultivated at 25 uC.
Virus. The virus used for the present study, RSIV KagYT-96, was
isolated in 2010 using GF cells from a diseased Japanese amberjack
frozen at 280 uC originally sampled in Kagoshima Prefecture in 1996.
Homogenate of the spleen was prepared with approximately 50 times
volume of BME and passed through a 0.45 mm filter after
centrifugation (400 g, 4 uC, 10 min). Then, 500 ml of the inoculum
was added into a 25 cm2 flask containing suspended GF cells just after
dispersion and the GF cells were incubated at 25 uC for isolation of
the virus.

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

วิธี
สายพันธุ์ของเซลล์ เซลล์ GF (. เคล็ม, et al, 1961) ที่ซื้อมาจาก ATCC.
เซลล์ที่ถูกเก็บรักษาไว้ในฐานกลาง Eagle (BME; MP
Biomedicals) เสริมด้วย 10% FBS (Equitech ชีวภาพ) และ
ยาปฏิชีวนะ (100 U ml21 penicillin และ 100 มิลลิกรัม streptomycin ml21)
และได้รับการปลูกฝังที่ 25 UC.
ไวรัส ไวรัสที่ใช้ในการศึกษาครั้งนี้ RSIV KagYT-96 ถูก
โดดเดี่ยวในปี 2010 โดยใช้เซลล์ GF จากญี่ปุ่น amberjack โรค
แช่แข็งที่ 280 UC ตัวอย่างแรกในจังหวัดคาโกชิมาในปี 1996
homogenate ของม้ามถูกจัดทำขึ้นประมาณ 50 เท่า
ปริมาณของ BME และผ่านตัวกรอง 0.45 มมหลังจาก
การหมุนเหวี่ยง (400 กรัม 4 UC, 10 นาที) จากนั้น 500 มล. ของเชื้อ
ถูกเพิ่มเข้าไปในขวด 25 cm2 มีเซลล์ GF ระงับเพียงหลังจาก
การกระจายตัวและเซลล์ GF ถูกบ่มที่ 25 UC สำหรับการแยก
เชื้อไวรัส

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

วิธีการเซลล์ที่บรรทัด GF เซลล์ ( เคลม et al . , 1961 ) ซื้อมาจาก ATCC .เซลล์ถูกเก็บรักษาไว้ในแรกเริ่มนกอินทรีขนาดกลาง ( BME ; ส.biomedicals ) เสริมด้วย 10% FBS ( equitech ไบโอ ) และยาปฏิชีวนะ ( 100 u เพนนิซิลิน ml21 และ 100 มก. ml21 streptomycin )และบ่มที่อุณหภูมิ 25 UC .ไวรัส ไวรัสใช้เพื่อศึกษา ปัจจุบัน rsiv kagyt-96 ,แยกใน 2010 ใช้ GF เซลล์จากโรคปลาสำลีญี่ปุ่นแช่แข็งที่ 280 UC เดิมตัวอย่างในรัฐบริติชโคลัมเบียในปี 1996อนของม้ามถูกเตรียมด้วยประมาณ 50 ครั้งปริมาณของ BME และผ่านตัวกรอง 0.45 มม. หลังจากปั่น ( 400 กรัม 4 UC 10 นาที ) แล้ว 500 ml ของเชื้อเพิ่มเป็น 25 ขวดที่มีเซลล์แขวนลอย cm2 GF เพียงหลังการกระจายและเซลล์ GF อุณหภูมิ 25 UC สำหรับการแยกไวรัส