Acollection of 132 clinical Enterob

Acollection of 132 clinical Enterobacteriaceae strains from Germany
was investigated. The strains were referred to the German
reference laboratory for multidrug-resistant Gram-negative bacteria
by 40 different laboratories because of elevated carbapenem
MICs. The strain collection investigated comprised Citrobacter
farmeri (n  1), Citrobacter freundii (n  4), Escherichia coli (n 
18), Enterobacter aerogenes (n  10), Enterobacter asburiae (n 
1), Enterobacter cloacae (n  24), Klebsiella oxytoca (n  3), Klebsiella
pneumoniae (n  65), Proteus mirabilis (n  1), Providencia
stuartii (n  1), and Serratia marcescens (n  4).
All of the strains were tested for the presence of carbapenemases
by the modified Hodge test (3), as well as combined disk tests with boronic acid (12) for the detection of class A carbapenemases
or with EDTA for the detection of metallo-
-lactamases
(13). In addition, PCR, gel electrophoresis, and subsequent sequencing
were performed as described before for blaKPC (22),
blaOXA-48 (14), blaVIM (7, 13), and blaIMP (13). A PCR assay for
blaNDM was conducted with primers NDM-1_a_fw (5=-CAATAT
TATGCACCCGGTCG-3=) and NDM-1_a_rev (5=-CCTTGCTG
TCCTTGATCAGG-3=). PCR assays for rarely occurring carbapenemases
like blaGES (21) or blaGIM (2) were performed if
necessary. In order to exclude carbapenemase production, a bioassay
based on cell extracts was performed in a manner similar to
that described before (9). Briefly, an imipenem disk was placed on
Mueller-Hinton agar inoculated with a susceptible E. coli indicator
strain. Bacterial lysates with and without potential inhibitors like
EDTA, boronic acid, cloxacillin, and clavulanic acid were added to
blank disks placed at edge of the expected imipenem inhibition zone.
Invaginating growth into the inhibition zone indicates
-lactamase
production. By PCR and subsequent sequencing, carbapenemase
genes like blaKPC-2 (n13), blaKPC-3 (n11), blaKPC-2 and blaVIM-1
(n  1), blaVIM-1 (n  17), blaVIM-2 (n  2), blaVIM-4 (n  3),
blaVIM-26 (n2), blaIMP-13 (n1), blaIMP-14 (n2), blaNDM-1 (n
7), blaGIM-1 (n3), blaOXA-48 (n24), blaOXA-162 (n5), blaOXA-181
(n1), blaOXA-204 (n1),andblaGES-5 (n1) were found (Table 1).
All of the strains producing a carbapenemase, except one VIM-1-
producing E. cloacae strain and one NDM-1 producing Providencia
rettgeri strain, were positive by the modified Hodge test for imipenem.
All KPC-producing strains except the one strain coproducing
KPC-2 and VIM-1 displayed an increase of
4 mm for imipenem
and meropenem in the combined disk test with boronic acid. All of
the strains producing a metallo-
-lactamase showed an increase of

6mmfor meropenem in the combined disk test usingEDTA,again
except the one strain coproducing KPC-2 and VIM-1. Carbapenemase
production could be excluded in 38 strains.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

Acollection 132 Enterobacteriaceae สายพันธุ์ทางการแพทย์จากประเทศเยอรมนีรับการตรวจสอบ สายพันธุ์มาสู่เยอรมันห้องปฏิบัติการอ้างอิงสำหรับแบคทีเรียแกรมลบ multidrug ทนโดยห้องปฏิบัติการต่าง ๆ 40 เนื่องจากยกระดับ carbapenemไมโครโฟน การเก็บรวบรวมสายพันธุ์การตรวจสอบประกอบด้วย Citrobacterfarmeri (n 1), Citrobacter freundii (n 4), Escherichia coli (n18), Enterobacter aerogenes (n 10), Enterobacter asburiae (n1), Enterobacter cloacae (n 24), Klebsiella oxytoca (n 3), Klebsiellapneumoniae (n 65), Proteus mirabilis (n 1), Providenciastuartii (n 1), และ Serratia marcescens (n 4)ทั้งหมดของสายพันธุ์ที่ได้รับการทดสอบสำหรับการปรากฏตัวของ carbapenemasesโดย Hodge แก้ไข ทดสอบ (3), เช่นเดียวกับดิสก์รวมทดสอบ ด้วยกรด boronic (12) สำหรับตรวจหาระดับ carbapenemasesหรือ EDTA สำหรับตรวจหา metallo - - lactamases(13) . นอกจากนี้ PCR เจลอิ และลำดับต่อมาดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนสำหรับ blaKPC (22),blaOXA-48 (14), blaVIM (7, 13), และ blaIMP (13) การทดสอบ PCR สำหรับblaNDM จัดทำไพรเมอร์ของ NDM-1_a_fw (5 =-CAATATTATGCACCCGGTCG-3 =) และ 1_a_rev ของ NDM (5 =-CCTTGCTGTCCTTGATCAGG-3 =) Assays PCR สำหรับไม่ค่อยเกิดขึ้น carbapenemasesเช่น blaGES (21) หรือ blaGIM (2) ดำเนินการถ้าจำเป็น เพื่อแยกการผลิต carbapenemase การ bioassayคะแนนจากเซลล์ สารสกัดจากดำเนินการในลักษณะที่คล้ายกับที่อธิบายไว้ก่อน (9) สั้น ๆ วางดิสก์ imipenem มีอาหารเลี้ยงเชื้อ Mueller Hinton inoculated ด้วยตัวบ่งชี้ของ E. coli ที่ไวต่อสายพันธุ์ Lysates แบคทีเรียที่มี และไม่ มีศักยภาพยับยั้งเช่นEDTA กรด boronic, cloxacillin และกรด clavulanic ถูกเพิ่มเข้าไปดิสก์เปล่าวางที่ขอบของโซนการยับยั้ง imipenem คาดเจริญเติบโต invaginating ในโซนยับยั้งการบ่งชี้ - lactamaseการผลิต โดย PCR และลำดับต่อมา carbapenemaseยีน เช่น blaKPC-2 (n 13), (n 11) blaKPC-3, blaKPC-2 blaVIM-1(n 1), blaVIM-1 (n 17), blaVIM-2 (n 2), blaVIM-4 (n 3),blaVIM-26 (n 2), blaIMP-13 (n 1), blaIMP-14 (n 2), blaNDM-1 (n7), (n 3) blaGIM-1, blaOXA-48 (n 24), blaOXA-162 (n 5) blaOXA-181(n 1), blaOXA-204 (n 1), andblaGES-5 (n 1) พบว่า (ตารางที่ 1)สายพันธุ์ที่ผลิต carbapenemase ทั้งหมดยกเว้นหนึ่ง VIM-1 -ผลิตสายพันธุ์ E. cloacae และหนึ่งของ NDM-1 ผลิต Providenciarettgeri สายพันธุ์ที่ดี โดยการทดสอบ Hodge แก้ไขสำหรับ imipenem มากสายพันธุ์ KPC ผลิตทั้งหมดยกเว้นหนึ่งสายพันธุ์ coproducingแสดงการเพิ่มขึ้นของ 4 มม.สำหรับ imipenem KPC-2 และ VIM-1และ meropenem ในการทดสอบรวมดิสก์ด้วยกรด boronic ทั้งหมดสายพันธุ์ที่ผลิตแบบ metallo - - lactamase แสดงให้เห็นว่าการเพิ่มขึ้นของ6mmfor meropenem ในการรวมดิสก์ทดสอบ usingEDTA อีกครั้งยกเว้นสายพันธุ์หนึ่ง coproducing KPC-2 และ VIM-1 Carbapenemaseการผลิตจะถูกแยกออกในสายพันธุ์ 38

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

Acollection 132 สายพันธุ์คลินิก Enterobacteriaceae จากเยอรมัน
ได้รับการตรวจสอบ สายพันธุ์ที่ถูกเรียกว่าเยอรมัน
ห้องปฏิบัติการอ้างอิงสำหรับแบคทีเรียแกรมลบดื้อยาหลาย
40 ห้องปฏิบัติการที่แตกต่างกันเนื่องจากการยกระดับ carbapenem
MICs คอลเลกชันความเครียดสอบสวนประกอบด้วย Citrobacter
farmeri (n? 1), Citrobacter freundii (n? 4), Escherichia coli (n?
18), aerogenes Enterobacter (n? 10), Enterobacter asburiae (n?
1), Enterobacter cloacae (n? 24), Klebsiella oxytoca (n? 3), Klebsiella
pneumoniae (n? 65) Proteus mirabilis (n? 1), Providencia
stuartii (n? 1) และ marcescens Serratia (n? 4).
ทุกสายพันธุ์ได้รับการทดสอบ การปรากฏตัวของ carbapenemases
โดยการทดสอบการแก้ไขฮ็อดจ์ (3) เช่นเดียวกับการทดสอบดิสก์รวมกับกรด boronic (12) สำหรับการตรวจสอบของ carbapenemases ชั้นเรียน
หรือ EDTA ในการตรวจหาโลหะหรือไม่ - - lactamases
(13) นอกจากนี้วิธี PCR gel electrophoresis และลำดับต่อมา
ได้ดำเนินการตามที่อธิบายไว้ก่อนสำหรับ blaKPC (22),
blaOXA-48 (14), blaVIM (7, 13) และ blaIMP (13) ทดสอบ PCR สำหรับ
blaNDM ได้ดำเนินการกับไพรเมอร์ NDM-1_a_fw (5 = -CAATAT
TATGCACCCGGTCG-3 =) และ NDM-1_a_rev (5 = -CCTTGCTG
TCCTTGATCAGG-3 =) การตรวจ PCR สำหรับไม่ค่อยเกิดขึ้น carbapenemases
เช่น blaGES (21) หรือ blaGIM (2) ได้ดำเนินการในกรณีที่
จำเป็น เพื่อที่จะไม่รวมการผลิต carbapenemase การทดสอบฤทธิ์ทางชีวภาพ
บนพื้นฐานของสารสกัดจากเซลล์ที่ได้ดำเนินการในลักษณะที่คล้ายคลึงกับ
ที่อธิบายไว้ก่อน (9) สั้น ๆ , ดิสก์ imipenem ถูกวางลงบน
Mueller-Hinton agar เชื้อที่มีความอ่อนไหวต่อ E. coli ตัวบ่งชี้
ความเครียด lysates แบคทีเรียที่มีและไม่มีสารยับยั้งที่มีศักยภาพเช่น
EDTA กรด boronic, Cloxacillin, และกรด clavulanic ถูกเพิ่มไปยัง
ดิสก์เปล่าวางอยู่ที่ขอบของเขตการยับยั้ง imipenem คาดว่า.
Invaginating การเจริญเติบโตในโซนการยับยั้งที่บ่งชี้? -lactamase
ผลิต โดยวิธี PCR และลำดับต่อมา carbapenemase
ยีนเช่น blaKPC-2 (n? 13), blaKPC-3 (n? 11), blaKPC-2 และ blaVIM-1
(n? 1), blaVIM-1 (n? 17), blaVIM -2 (n 2) blaVIM-4 (n? 3),
blaVIM-26 (n 2) blaIMP-13 (n? 1), blaIMP-14 (n 2) blaNDM-1 (n?
7), blaGIM-1 (n? 3), blaOXA-48 (n? 24), blaOXA-162 (n? 5), blaOXA-181
(n? 1), blaOXA-204 (n? 1), andblaGES- 5 (n? 1) พบ (ตารางที่ 1).
ทุกสายพันธุ์การผลิต carbapenemase ยกเว้น VIM-1-
ผลิตอี cloacae ความเครียดและเป็นหนึ่งใน NDM-1 ผลิต Providencia
ความเครียด rettgeri เป็นบวกโดยการทดสอบฮ็อดจ์แก้ไข imipenem.
ทั้งหมด KPC ผลิตสายพันธุ์ยกเว้นสายพันธุ์หนึ่ง coproducing
KPC-2 และ VIM-1 แสดงเพิ่มขึ้น 4 มม imipenem
และเมอโรพีเนมในการทดสอบดิสก์รวมกับกรด boronic ทุก
สายพันธุ์การผลิตโลหะหรือไม่ - - lactamase แสดงให้เห็นว่าการเพิ่มขึ้นของ
6mmfor เมอโรพีเนมในการทดสอบดิสก์รวม usingEDTA อีกครั้ง?
ยกเว้นหนึ่งสายพันธุ์ coproducing KPC-2 และ VIM-1 Carbapenemase
การผลิตจะได้รับการยกเว้นใน 38 สายพันธุ์