DNA was extracted using the modifie

DNA was extracted using the modified method described by Subbotin et al. (2001) and Fullaondo et al. (1999). Five cysts from each region were collected randomly into an Eppendorf tube filled with 150 μl lyses buffer (125 mM KC; 25 mM Tris–HCl, pH 8.0; 3.75 mM MgCl2; 2.5 mM DTT; 1.125 % Tween 20 and 0.025 % gelatin) and 5 μl Proteinase K (600 μg/ml) (USB, UK) and were crushed using a plastic pistil. Following consecutive incubation periods at 65 °C for 1 h and 95 °C for 10 min, and centrifugation at 11,000 g for 10 min. DNA then was purified into chloroform-isoamyl alcohol (24:1) and precipitated with 3 M sodium acetate and absolute ethanol. DNA extract was resuspended into 20 μl sterile water and kept at −20 °C. Three primers used were as follows; specific primer for

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

ดีเอ็นเอถูกสกัดโดยใช้วิธีการปรับเปลี่ยนการอธิบายโดย Subbotin et al, (2001) และ Fullaondo et al, (1999) ห้าซิสต์จากแต่ละภูมิภาคท​​ี่ถูกเก็บรวบรวมสุ่มเข้าไปในหลอด Eppendorf ที่เต็มไปด้วยบัฟเฟอร์ 150 ไมโครลิตร lyses (125 มิลลิ KC 25 มิลลิ Tris-HCl ค่า pH 8.0; 3.75 มิลลิ MgCl2; 2.5 มิลลิ DTT; 1.125% Tween 20 และเจลาติน 0.025%) และ 5 ไมโครลิตร Proteinase K (600 ไมโครกรัม / มิลลิลิตร) (USB สหราชอาณาจักร) และถูกบดขยี้โดยใช้เก​​สรตัวเมียของดอกไม้พลาสติก ต่อไปนี้เป็นระยะเวลาติดต่อกันบ่มที่ 65 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 1 ชั่วโมงและ 95 องศาเซลเซียสเป็นเวลา 10 นาทีและหมุนเหวี่ยงที่ 11,000 กรัมเป็นเวลา 10 นาที ดีเอ็นเอนั้นบริสุทธิ์เป็นแอลกอฮอล์คลอโรฟอร์ม isoamyl (24: 1) และตกตะกอน 3 เอ็มอะซิเตตโซเดียมและเอทานอลที่แน่นอน สารสกัดดีเอ็นเอ resuspended เป็น 20 ไมโครลิตรน้ำหมันและเก็บไว้ที่อุณหภูมิ -20 องศาเซลเซียส สามไพรเมอร์ที่ใช้มีดังนี้; ไพรเมอร์ที่เฉพาะเจาะจงสำหรับ

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

ดีเอ็นเอโดยใช้วิธีดัดแปลงแบบที่อธิบายโดย subbotin et al . ( 2001 ) และ fullaondo et al . ( 1999 ) ห้าซีสต์จากแต่ละภูมิภาคจำนวนสุ่มเป็นหลอดเพนดอร์ฟเต็มไปด้วย 150 μผม lyses บัฟเฟอร์ ( 125 มม. 25 มม. และบริษัท เคซี ; HCL pH 8.0 ; 3.75 มม. ชุด ; 2.5 มม. ส่วน ; 1.125 tween 20 และ 0.025% เจลาติน ) และ 5 μผมโปร K ( 600 μ g / ml ) USB ,อังกฤษ ) และถูกบดโดยใช้อะโกรพลาสติก ต่อไปนี้ระยะเวลาการบ่มที่ 65 ° C ติดต่อกันเป็นเวลา 1 ชั่วโมง และ 95 องศา C เป็นเวลา 10 นาที และ 3 , 000 กรัมเป็นเวลา 10 นาทีในดีเอ็นเอแล้วบริสุทธิ์ในคลอโรฟอร์มในปริมาณแอลกอฮอล์ ( 24 : 1 ) และตกตะกอนด้วยโซเดียมอะซิเตต และ 3 เอ็มแน่นอน เอทานอล สกัดดีเอ็นเอ resuspended เป็น 20 μลิตรน้ำหมันและเก็บไว้ที่− 20 ° Cสามชนิดที่ใช้เป็นสีรองพื้นเฉพาะ
ดังนี้