To test the ability of HIV-1 protea

To test the ability of HIV-1 protease to inhibit the translation of cellular proteins,western blot assays were performed on 293Tcells transfected with the vectors pcDNA3_GFP_PR-wt, -RI, -RH and-D25N at different tipranavir concentrations. The results for GFP detection showed that the whole GFP–PR was only visible when the drug inhibited HIV-1 protease and that this inhibition was dose-dependent (Figure 1c). In addition, the detection of GFP–PR was dependent on the resistance mutations contained within the protease, as shown in the vector containing PR-RH, which cannot be inhibited by the drug at any concentration. In contrast, cells transfected with inactive protease (D25N) showed detectable GFP–PR, even in the absence of the drug (Figure 1c). This is due to the inability of this protease to excise itself from the fusion protein. The result for protease detection alone showed that visible protease, such as GFP–PR, was dependent on the drug concentration, protease resistance mutations and processing of the protease evaluated (Figure 1c). In addition, evaluation
of the cellular translation factors eIF4GI and PABP showed proteolytic processing when the HIV-1 protease was not inhibited. In contrast, evaluation of the inactive PR-D25N showed its inability to cleave eIF4GI and PABP (Figure 1d). Those results show that the pattern of resistance mutations within the HIV-1 protease and the concentration of the protease inhibitor are able to modulate the translation of cellular proteins, suggesting that our phenotypic system is based on the ability of HIV-1 protease to cleave cellular translation factors

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

การทดสอบความสามารถของโปรติเอสของเชื้อเอชไอวี-1 เพื่อยับยั้งการแปลของเซลลูลาร์โปรตีน assays น้าตะวันตกได้ดำเนินการใน 293Tcells transfected กับการเวกเตอร์ pcDNA3_GFP_PR-wt, -RI, -RH และ-D25N ที่ความเข้มข้นต่าง ๆ ทิปรานาเวียร์ ผลลัพธ์สำหรับ GFP ตรวจจับพบว่า GFP – PR ทั้งเท่ามองเห็นได้เมื่อยายับยั้งเชื้อเอชไอวี-1 โปรติเอส และว่า การยับยั้งนี้ขึ้นอยู่กับปริมาณ (รูปที่ 1 c) นอกจากนี้ การตรวจสอบของ GFP – PR ถูกพึ่งกลายพันธุ์ต้านทานที่มีอยู่ภายในน้ำย่อย ดังที่แสดงในเวกเตอร์ที่ประกอบด้วย PR-RH ซึ่งไม่สามารถยับยั้งได้ โดยยาที่ความเข้มข้นใด ๆ ตรงกันข้าม เซลล์ transfected กับงานโปรติเอส (D25N) แสดงให้เห็นตรวจ GFP – PR แม้ในการขาดยาเสพติด (รูปที่ 1 c) นี่คือเนื่องจากไม่สามารถโปรติเอสนี้สรรพสามิตเองจากโปรตีนฟิวชั่น ผลการตรวจจับโปรติเอสเพียงอย่างเดียวพบว่าน้ำย่อยที่เห็น เช่น GFP – PR ที่ได้ขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของยา การกลายพันธุ์ต้านทานโปรติเอส และประมวลผลโปรติเอสที่ประเมิน (รูปที่ 1 c) นอกจากนี้ การประเมินผลปัจจัยแปลมือถือ eIF4GI และ PABP พบย่อยโปรตีนการประมวลผลเมื่อไม่ถูกยับยั้งน้ำย่อยเอชไอวี-1 ตรงกันข้าม PR-D25N งานการประเมินแสดงให้เห็นว่าตนไม่สามารถแบะ eIF4GI และ PABP (รูปที่ 1 d) ผลแสดงว่า รูปแบบของการกลายพันธุ์ต้านทานภายในรติเอสเอชไอวี-1 และความเข้มข้นของสารยับยั้งน้ำย่อยจะสามารถปรับการแปลของโปรตีนเซลลูลาร์ การแนะนำว่า ระบบฟีโนไทป์ของเราเป็นไปตามความสามารถของโปรติเอสของเชื้อเอชไอวี-1 แบะปัจจัยแปลเซลลูลาร์

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

เพื่อทดสอบความสามารถของเชื้อ HIV-1 น้ำย่อยในการยับยั้งการแปลของโปรตีนโทรศัพท์มือถือ, ตรวจดวงตะวันได้ดำเนินการใน 293Tcells transfected กับเวกเตอร์ pcDNA3_GFP_PR-WT, -RI, -RH และ D25N ที่ความเข้มข้น tipranavir ที่แตกต่างกัน ผลการตรวจหา GFP แสดงให้เห็นว่าทั้ง GFP-PR เป็นเพียงมองเห็นได้เมื่อยายับยั้งการติดเชื้อ HIV-1 protease และยับยั้งนี้คือปริมาณขึ้นอยู่กับ (รูปที่ 1C) นอกจากนี้การตรวจสอบของ GFP-PR ก็ขึ้นอยู่กับการกลายพันธุ์ต้านทานที่มีอยู่ภายในน้ำย่อยดังแสดงในเวกเตอร์ที่มี PR-RH ซึ่งไม่สามารถยับยั้งโดยยาเสพติดที่มีความเข้มข้นใด ๆ ในทางตรงกันข้ามเซลล์ transfected กับน้ำย่อยไม่ได้ใช้งาน (D25N) แสดงให้เห็นว่าการตรวจพบ GFP-PR แม้ในกรณีที่ไม่มียาเสพติด (รูปที่ 1C) เดอะ นี้เกิดจากการไร้ความสามารถของโปรติเอสนี้จะภาษีสรรพสามิตตัวเองจากโปรตีนฟิวชั่น ผลการตรวจหาน้ำย่อยเพียงอย่างเดียวพบว่าโปรติเอสที่มองเห็นได้เช่น GFP-PR, ขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของยาเสพติด, การกลายพันธุ์ต้านทานน้ำย่อยและการประมวลผลของโปรติเอสประเมิน (รูปที่ 1C)
นอกจากนี้การประเมินผล ของการแปลภาษามือถือปัจจัย eIF4GI และ PABP แสดงให้เห็นว่าการประมวลผลโปรตีนเมื่อ HIV-1 protease ไม่ได้ยับยั้ง ในทางตรงกันข้ามการประเมินผลการใช้งาน PR-D25N แสดงให้เห็นว่าไม่สามารถที่จะไปผูกพัน eIF4GI และ PABP (รูปที่ 1D) ผลลัพธ์เหล่านั้นแสดงให้เห็นว่ารูปแบบของการกลายพันธุ์ต้านทานภายใน HIV-1 protease และความเข้มข้นของสารยับยั้งน้ำย่อยที่มีความสามารถในการปรับเปลี่ยนการแปลของโปรตีนของเซลล์บอกว่าระบบฟีโนไทป์ของเราขึ้นอยู่กับความสามารถของ HIV-1 น้ำย่อยยึดโทรศัพท์มือถือ ปัจจัยการแปล เช่น GFP-PR, ขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของยาเสพติดน้ำย่อยกลายพันธุ์ต้านทานและการประมวลผลของโปรติเอสประเมิน (รูปที่ 1C) นอกจากนี้การประเมินผล ของการแปลภาษามือถือปัจจัย eIF4GI และ PABP แสดงให้เห็นว่าการประมวลผลโปรตีนเมื่อ HIV-1 protease ไม่ได้ยับยั้ง ในทางตรงกันข้ามการประเมินผลการใช้งาน PR-D25N แสดงให้เห็นว่าไม่สามารถที่จะไปผูกพัน eIF4GI และ PABP (รูปที่ 1D) ผลลัพธ์เหล่านั้นแสดงให้เห็นว่ารูปแบบของการกลายพันธุ์ต้านทานภายใน HIV-1 protease และความเข้มข้นของสารยับยั้งน้ำย่อยที่มีความสามารถในการปรับเปลี่ยนการแปลของโปรตีนของเซลล์บอกว่าระบบฟีโนไทป์ของเราขึ้นอยู่กับความสามารถของ HIV-1 น้ำย่อยยึดโทรศัพท์มือถือ ปัจจัยการแปล เช่น GFP-PR, ขึ้นอยู่กับความเข้มข้นของยาเสพติดน้ำย่อยกลายพันธุ์ต้านทานและการประมวลผลของโปรติเอสประเมิน (รูปที่ 1C) นอกจากนี้การประเมินผล ของการแปลภาษามือถือปัจจัย eIF4GI และ PABP แสดงให้เห็นว่าการประมวลผลโปรตีนเมื่อ HIV-1 protease ไม่ได้ยับยั้ง ในทางตรงกันข้ามการประเมินผลการใช้งาน PR-D25N แสดงให้เห็นว่าไม่สามารถที่จะไปผูกพัน eIF4GI และ PABP (รูปที่ 1D) ผลลัพธ์เหล่านั้นแสดงให้เห็นว่ารูปแบบของการกลายพันธุ์ต้านทานภายใน HIV-1 protease และความเข้มข้นของสารยับยั้งน้ำย่อยที่มีความสามารถในการปรับเปลี่ยนการแปลของโปรตีนของเซลล์บอกว่าระบบฟีโนไทป์ของเราขึ้นอยู่กับความสามารถของ HIV-1 น้ำย่อยยึดโทรศัพท์มือถือ ปัจจัยการแปล นอกจากนี้การประเมินผล ของการแปลภาษามือถือปัจจัย eIF4GI และ PABP แสดงให้เห็นว่าการประมวลผลโปรตีนเมื่อ HIV-1 protease ไม่ได้ยับยั้ง ในทางตรงกันข้ามการประเมินผลการใช้งาน PR-D25N แสดงให้เห็นว่าไม่สามารถที่จะไปผูกพัน eIF4GI และ PABP (รูปที่ 1D) ผลลัพธ์เหล่านั้นแสดงให้เห็นว่ารูปแบบของการกลายพันธุ์ต้านทานภายใน HIV-1 protease และความเข้มข้นของสารยับยั้งน้ำย่อยที่มีความสามารถในการปรับเปลี่ยนการแปลของโปรตีนของเซลล์บอกว่าระบบฟีโนไทป์ของเราขึ้นอยู่กับความสามารถของ HIV-1 น้ำย่อยยึดโทรศัพท์มือถือ ปัจจัยการแปล นอกจากนี้การประเมินผล ของการแปลภาษามือถือปัจจัย eIF4GI และ PABP แสดงให้เห็นว่าการประมวลผลโปรตีนเมื่อ HIV-1 protease ไม่ได้ยับยั้ง ในทางตรงกันข้ามการประเมินผลการใช้งาน PR-D25N แสดงให้เห็นว่าไม่สามารถที่จะไปผูกพัน eIF4GI และ PABP (รูปที่ 1D) ผลลัพธ์เหล่านั้นแสดงให้เห็นว่ารูปแบบของการกลายพันธุ์ต้านทานภายใน HIV-1 protease และความเข้มข้นของสารยับยั้งน้ำย่อยที่มีความสามารถในการปรับเปลี่ยนการแปลของโปรตีนของเซลล์บอกว่าระบบฟีโนไทป์ของเราขึ้นอยู่กับความสามารถของ HIV-1 น้ำย่อยยึดโทรศัพท์มือถือ ปัจจัยการแปล

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เพื่อทดสอบความสามารถของ HIV-1 protease ยับยั้งการแปลของโปรตีนในเซลล์ , Western blot ) จำนวน 293tcells transfected กับเวกเตอร์ pcdna3_gfp_pr-wt , - ริ - Rh and-d25n ทิปรานาเวียร์ที่ความเข้มข้นแตกต่างกัน ผลการค้นหาพบว่าทั้ง GFP GFP –ประชาสัมพันธ์ ปรากฏเฉพาะเมื่อยายับยั้ง HIV-1 protease และการยับยั้งนี้เป็นสัปดาห์ ( รูป 1C ) นอกจากนี้ การตรวจสอบของ GFP –พีอาร์ขึ้นอยู่กับความต้านทานการกลายพันธุ์ที่มีอยู่ภายในโปรตามที่แสดงในเวกเตอร์ที่มี pr-rh ซึ่งไม่สามารถยับยั้งโดยยาในความเข้มข้น ในทางตรงกันข้าม เซลล์ transfected กับโปรไม่ใช้ ( d25n ) พบว่าตรวจพบ GFP –พีอาร์ แม้ในกรณีที่ไม่มียา ( รูป 1C ) นี้คือเนื่องจากการไร้ความสามารถของโปรนี้เพื่อกำจัดตัวเองจากฟิวชันโปรตีน ผลการค้นหาพบว่าโปรตีเอสเอสคนเดียวที่มองเห็น เช่น GFP –พีอาร์ก็ขึ้นอยู่กับตัวยาเข้มข้น โปรต้านการกลายพันธุ์และการประมวลผลของโปรติเอสประเมินตัวเลข ( 1C ) นอกจากนี้ การประเมินผลของโทรศัพท์มือถือและพบว่าปัจจัย eif4gi แปล pabp การประมวลผลระเมื่อโปรตีน HIV-1 ไม่ยับยั้ง ในทางตรงกันข้าม , การประเมิน pr-d25n ไม่พบไม่สามารถจะตัด eif4gi และ pabp ตัวเลข ( 1D ) ผลลัพธ์ที่แสดงให้เห็นว่ารูปแบบของยีนต้านทานภายในโปรตีน HIV-1 และความเข้มข้นของโปรตีน ซึ่งสามารถที่จะปรับการแปลของโปรตีนเซลล์ บอกว่าระบบคุณสมบัติของเราจะขึ้นอยู่กับความสามารถของ HIV-1 protease จะตัดปัจจัยแปลมือถือ