Invasion and fluorescence assayIECs

Invasion and fluorescence assay
IECs were grown to confluence on glass coverslips (in 12-well
plates). Each monolayer was overlaid with approximately 120
activated larvae suspended in 0.2 ml of serum-free DMEM
containing 15 mM HEPES and 1.75% agarose [7]. The IECs
were incubated at 37uCin5%CO2 for 1 h. During incubation,
invasion of IECs by T. spiralis infective larvae were observed
continuously under inverted phase contrast microscope (Olympus).
At the end of the experiment, the agarose containing larvae was
removed, and the monolayers were stained with trypan blue. The
area of damaged cells was quantified by NIH image software (ver.
1.57). A total of 25 fields per monolayer were captured by video
microscopy with a 46objective (Olympus).

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การบุกรุกและการทดสอบการเรืองแสง
Iecs มีปลูกไปบรรจบใน coverslips แก้ว (ใน 12 ดี
แผ่น) monolayer แต่ละบุด้วยประมาณ 120
เปิดใช้งานตัวอ่อนที่ลอยอยู่ใน 0.2 มิลลิลิตร DMEM ซีรั่มฟรี
ที่มี 15 มิลลิ HEPES และ 1.75% agarose [7] Iecs
บ่มที่อุณหภูมิ CO2 37uCin5% เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ในระหว่างการบ่ม
การรุกรานของ Iecs โดย T. spiralis ตัวอ่อนติดเชื้อถูกตั้งข้อสังเกต
อย่างต่อเนื่องภายใต้กล้องจุลทรรศน์ตรงกันข้ามกลับเฟส (Olympus).
เมื่อสิ้นสุดการทดลอง, agarose ที่มีตัวอ่อนที่ถูก
ลบออกและ monolayers ถูกย้อมด้วยสีฟ้าทริแพน
พื้นที่ของเซลล์ที่เสียหายได้รับการวัดโดยซอฟต์แวร์ภาพ NIH (ver.
1.57) รวมทั้งสิ้น 25 สาขาต่อ monolayer ถูกจับโดยวิดีโอ
กล้องจุลทรรศน์กับ 46objective (Olympus)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

การรุกรานและการเรืองแสง (
iecs ปลูกบรรจบใน coverslips แก้ว ( 12 แผ่นดี
) แต่ละอย่างถูกหุ้มด้วยประมาณ 120
เปิดตัวอ่อนแขวนลอยใน 0.2 มิลลิลิตร serum-free dmem
ที่ 15 มม. และฮีเปส 1.75% ( [ 7 ] การ iecs
อุณหภูมิ CO2 37ucin5 % เป็นเวลา 1 ชั่วโมง ในช่วงระยะเวลา iecs
บุกโดย spiralis infective larvae พบ
อย่างต่อเนื่องภายใต้กล้องจุลทรรศน์แบบต่างระดับ ( Olympus )
เมื่อสิ้นสุดการทดลองที่ประกอบด้วยตัวอ่อนถูก
, ลบและ monolayers ถูกย้อมด้วยสีไตรแพนสีฟ้า
พื้นที่เซลล์ที่เสียหายถูก quantified โดยซอฟต์แวร์ภาพ NIH ( Ver .
1.57 ) รวม 25 สาขา ต่ออย่างถูกจับโดยวิดีโอ
จุลทรรศน์ด้วย 46objective ( โอลิมปัส )