2.1. Bacterial strain and preparati

2.1. Bacterial strain and preparation
Pathogenic V. parahaemolyticus strain BCC 24339 with the
thermostable direct hemolysin (tdhþ/trhe) genewas used in this
study. This bacterium was isolated from prawn (Litopenaeus
vannamei) (Vandamei) by the Faculty of Public Health, Mahidol
University, Thailand. The prawn was cultivated in Thailand.
Virulence gene tdh and pandemic clonal marker orf8 were
confirmed positive by a multiplex PCR method. The isolated
V. parahaemolyticus cells were maintained at 80
C at
a concentration of 109e1010 cfu/ml in Tryptic soy broth (TSB;
Merck, Darmstadt, Germany) with 3% NaCl (w/v) and 20% glycerol
(Sigma Chemical Company, St. Louis, Mo, USA). For each
experiment, 10 ml of thawed stock culture was inoculated into
a 25 ml Erlenmeyer flask containing 9 ml of sterile TSB with 3%
NaCl (w/v) and incubated at 37
C for 20e24 h at 140 rpm on
a rotary shaker (SK-300, Jeio Tech, Korea). The start culture was
re-cultured with the same procedure for 18 h prior to use. One
ml of the start culture was then transferred into 9 ml of phosphate
buffered saline (PBS, pH 7.4). The phosphate buffered
saline was made of 285 mmol/L NaH2PO4 with 3% NaCl (w/v) and
adjusted to pH 7.4 with NaOH. This cellular suspension was
diluted with the phosphate buffered saline prior to inoculate
into prawn.

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

2.1. แบคทีเรียต้องใช้และเตรียมอุบัติ V. parahaemolyticus สายพันธุ์ BCC 24339 ด้วยการgenewas thermostable hemolysin โดยตรง (tdhþ trhe) ที่ใช้ในการนี้ศึกษา แบคทีเรียนี้ถูกแยกจากกุ้ง (Litopenaeusกุลา) (Vandamei) โดยคณะสาธารณสุข มหิดลมหาวิทยาลัย ประเทศไทย กุ้งมีปลูกในประเทศไทยVirulence ยีน tdh และ orf8 เครื่องหมาย clonal ระบาดค่าบวกที่ยืนยัน ด้วยวิธี multiplex PCR การแยกV. parahaemolyticus เซลล์ถูกจัดเก็บอยู่ที่ 80 C ที่ความเข้มข้นของ 109e1010 cfu/ml ในซุปถั่วเหลือง Tryptic (TSBเมอร์ค ดาร์มส เยอรมนี) กับ 3% NaCl (w/v) และกลีเซอร 20%(ซิกเคมี บริษัท St. Louis, Mo สหรัฐอเมริกา) สำหรับแต่ละทดลอง 10 ml ของวัฒนธรรม thawed หุ้นถูก inoculated เป็นml 25 Erlenmeyer หนาวประกอบด้วย 9 ml ของ TSB กอซ 3%NaCl (w/v) และ incubated ที่ 37 C สำหรับ 20e24 h ที่ 140 รอบต่อนาทีในแบบโรตารี่เชคเกอร์ (SK 300, Jeio เทคโนโลยี เกาหลี) วัฒนธรรมเริ่มต้นได้อีกอ่าง ด้วยกระบวนการเดียวกันใน 18 h ก่อนนำไปใช้ หนึ่งml ของวัฒนธรรมเริ่มต้นถูกแล้วซื้อ 9 ml ของฟอสเฟตถูกบัฟเฟอร์น้ำเกลือ (PBS ค่า pH 7.4) ฟอสเฟต bufferedทำน้ำเกลือของ 285 mmol/L NaH2PO4 ด้วย 3% NaCl (w/v) และปรับค่า pH 7.4 กับ NaOH แขวนโทรศัพท์มือถือนี้ผสมกับฟอสเฟต saline ก่อนถูกบัฟเฟอร์ปลูกฝีในกุ้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

2.1 สายพันธุ์แบคทีเรียและการเตรียมการ
ที่ทำให้เกิดโรคเครียด V. parahaemolyticus BCC 24339 กับ
อุณหภูมิ hemolysin โดยตรง (tdhþ / trhe) genewas นี้ใช้ใน
การศึกษา แบคทีเรียนี้ถูกแยกได้จากกุ้ง (Litopenaeus
vannamei) (Vandamei) โดยคณะสาธารณสุขศาสตร์มหิดล
มหาวิทยาลัย กุ้งได้รับการปลูกฝังในประเทศไทย.
TDH ยีนความรุนแรงและการแพร่ระบาด orf8 เครื่องหมาย clonal ได้รับ
การยืนยันในเชิงบวกโดยวิธี PCR multiplex แยก
โวลต์ เซลล์ parahaemolyticus ได้รับการดูแลที่ 80 C ที่?
ความเข้มข้นของ 109e1010 โคโลนี / มิลลิลิตรในน้ำซุปถั่วเหลือง tryptic (TSB;
เมอร์ค, Darmstadt, เยอรมนี) กับ 3% โซเดียมคลอไรด์ (w / v) และกลีเซอรีน 20%
(Sigma เคมี บริษัท เซนต์ หลุยส์โมสหรัฐอเมริกา) สำหรับแต่ละ
การทดลอง 10 มล. ของวัฒนธรรมหุ้นละลายได้รับเชื้อเข้าไปใน
25 มล. ขวด Erlenmeyer มี 9 มิลลิลิตร TSB ผ่านการฆ่าเชื้อด้วย 3%
โซเดียมคลอไรด์ (w / v) และบ่มที่อุณหภูมิ 37 องศาเซลเซียสสำหรับ 20e24 ชั่วโมงที่ 140 รอบต่อนาทีใน
เครื่องปั่นหมุน ( SK-300, Jeio เทคเกาหลี) วัฒนธรรมเริ่มต้นที่ได้รับการ
เพาะเลี้ยงอีกครั้งกับขั้นตอนเหมือนกันสำหรับ 18 ชั่วโมงก่อนที่จะใช้ หนึ่ง
มิลลิลิตรของวัฒนธรรมที่เริ่มต้นจากนั้นก็ย้ายเป็น 9 มิลลิลิตรฟอสเฟต
บัฟเฟอร์น้ำเกลือ (พีบีเอสพีเอช 7.4) ฟอสเฟตบัฟเฟอร์
น้ำเกลือที่ทำจาก 285 มิลลิโมล / ลิตร NaH2PO4 3% โซเดียมคลอไรด์ (w / v) และ
ปรับค่าพีเอช 7.4 ด้วย NaOH นี้โทรศัพท์มือถือถูกระงับ
เจือจางด้วยน้ำเกลือฟอสเฟตบัฟเฟอร์ก่อนที่จะฉีดวัคซีน
เข้ากุ้ง

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

2.1 . แบคทีเรียเชื้อโรคสายพันธุ์ tdh และการเตรียม

ตรง BCC 24339 กับความร้อนโดยตรง ( tdh þ / trhe ) genewas ที่ใช้ในการศึกษานี้

ปฏิกิริยานี้ถูกแยกจากกุ้งง
vannamei ) ( vandamei ) โดยคณะสาธารณสุขศาสตร์ มหาวิทยาลัยมหิดล
มหาวิทยาลัย ประเทศไทย กุ้งอยู่ที่ปลูกในประเทศไทย .
tdh ยีนโรคระบาดและงาน orf8 มีเครื่องหมาย
การยืนยันในเชิงบวกโดยวิธี PCR มัลติเพล็กซ์ แยก
tdh เซลล์ถูกเก็บรักษาไว้ที่  80
C ที่
ความเข้มข้นของ 109e1010 cfu / ml ในซุปถั่วเหลืองอาหาร ( TSB ;
เมอร์คดาร์มสตัดท์ , เยอรมนี , 3 ) โซเดียมคลอไรด์ ( w / v ) และ 20 % กลีเซอรอล
( ซิกม่า เคมี บริษัท เซนต์ หลุยส์ โม สหรัฐอเมริกา ) สำหรับแต่ละ
ทดลอง 10 กรัมละลายหุ้นวัฒนธรรมเป็นเชื้อ
25 ml ขวดเออร์เลนเมเยอร์ที่มี 9 มิลลิลิตรของ TSB หมัน 3 %
NaCl ( w / v ) และบ่มที่ 37 องศาเซลเซียสเป็นเวลา
20e24 H ที่ 140 rpm บน
เครื่องปั่น Rotary ( sk-300 jeio , เทคนิค , เกาหลี ) วัฒนธรรมเริ่มถูก
re เพาะเลี้ยงด้วยขั้นตอนเดียวกันสำหรับ 18 ชั่วโมงก่อนใช้งาน 1
4 วัฒนธรรมเริ่มถูกโอนเข้าสู่ 9 มิลลิลิตรกรดเกลือฟอสเฟต
( PBS pH 7.4 ) ฟอสเฟตบัฟเฟอร์
น้ำเกลือเป็น 285 มิลลิโมล / ลิตร nah2po4 กับ 3% NaCl ( w / v )
ปรับ pH 7.4 กับ NaOH แขวนโทรศัพท์มือถือนี้ถูกเจือจางด้วยฟอสเฟตบัฟเฟอร์

น้ำเกลือก่อนฉีดวัคซีนในกุ้ง