Seed inoculations for pot experimen

Seed inoculations for pot experiments
For the first pot experiment isolate Xcc5 was selected because all Paenibacillus spp. isolates
with moderate and high bioactivity in the dual culture assay suppressed this isolate.
Cabbage seeds of cultivar Kameron (South Pacific Seeds (NZ) Ltd) were immersed in
Xcc5 suspension at the concentration of 1 × 109 CFU ml−1 (3 ml suspension per 1 g
seed) or in sterile 0.1% (w/v) BP in a conical flask and mixed gently under vacuum (c.
50 mmHg) for 5 min. Seeds were then air-dried in open Petri dishes in a laminar flow
cabinet overnight in the dark. Paenibacillus suspensions (P1, P6, P9, P10, P16, P20, and
P24 isolates which had demonstrated different bioactivity in dual culture assay) at the concentration of 5 × 109 CFU ml−1 or sterile 0.1% BP (w/v) were then added to these seeds
(0.6 ml/g seed) and mixed well using a sterile spatula. Inoculated seeds were incubated
in closed Petri dishes (non-sealed) overnight in the dark.
For the second pot experiment, another Xcc isolate, Xcc32, which was found to be more
pathogenic in cabbage than Xcc5 was used. Cabbage seeds were inoculated with Xcc32 and
three Paenibacillus isolates (P6, P10, and P16) at three concentrations (5 × 108, 5 × 109,
and 5 × 1010 CFU ml−1) to study the inoculum rate-dependence of biocontrol activity of
these isolates. The positive control (only inoculated with Xcc) was represented in triplicate
to minimise the variance of the difference between it and the treatments. Seeds were also
inoculated with Paenibacillus spp. isolates only (at three concentrations) to check for any
adverse effects of the Paenibacillus spp. isolates on seedling emergence and plant growth.
BIOCONTROL SCIENCE AND TECHNOLOGY 507
A grow-out test was performed for both pot experiments to determine the incidence of
Xcc or Paenibacillus on individual cabbage seeds. Xcc or Paenibacillus treated seeds (50
seeds per treatment) were placed on NA and after 24 h at 28 or 25°C assessed for the presence of Paenibacillus or Xcc colonies, respectively.
To evaluate the effect of Paenibacillus spp. isolates on the germination of cabbage seeds,
germination tests were performed using the top of paper method described in the International Rules for Seed Testing (ISTA, 2014).

ผลลัพธ์ (ไทย) 1:

เมล็ดพันธุ์ประเทศสำหรับการทดลองหม้อสำหรับ isolate ทดลองหม้อแรกเลือก Xcc5 เพราะทุกแยกออกซิเจน Paenibacillusกับทางชีวภาพสูง และปานกลาง ในวัฒนธรรมคู่ ทดสอบยับยั้งโปรตีนนี้เมล็ดกะหล่ำปลีพันธุ์ Kameron (เซาท์แปซิฟิคเมล็ดพันธุ์ (NZ) Ltd) ถูกแช่อยู่ในช่วงล่างของ Xcc5 ที่ความเข้มข้น 1 × 109 CFU ml−1 (ระงับ 3 มิลลิลิตรต่อ 1 กรัมเมล็ด) หรือผ่านการฆ่าเชื้อ 0.1% (w/v) BP ในขวดรูปกรวยและผสมเบา ๆ ภายใต้สูญญากาศ (c50 mmHg) สำหรับเมล็ดพันธุ์ 5 นาทีถูกแล้ว air-dried ใน เปิดจาน Petri ในการไหลหลายตู้ในมืด Paenibacillus สารแขวนลอย (P1, P6, P9, P10, P16, P20 และP24 แยกซึ่งได้แสดงให้เห็นทางชีวภาพแตกต่างกันในสองวัฒนธรรม assay) ที่ความเข้มข้นของ 5 × 109 CFU ml−1 หรือผ่านการฆ่าเชื้อ 0.1% BP (w/v) แล้วเพิ่มเมล็ดเหล่านี้(เมล็ด 0.6 ml/g) และผสมด้วยการใช้ไม้พายเป็นหมัน เมล็ด inoculated ได้รับการกกในปิดอาหารเพาะ (ไม่ใช่ปิดผนึก) ค้างคืนในมืดสำหรับหม้อสองทดลอง Xcc อื่นแยก Xcc32 ซึ่งพบว่ามีเพิ่มเติมทำให้เกิดโรคในกะหล่ำปลี Xcc5 ที่เคยใช้ เมล็ดกะหล่ำปลีได้ inoculated กับ Xcc32 และPaenibacillus สามแยก (P6, P10 และ P16) ที่ความเข้มข้นที่สาม (5 × 108, 5 × 109และ 5 × 1010 CFU ml−1) เพื่อศึกษาการ inoculum อัตราพึ่งพาของ biocontrol กิจกรรมของเหล่านี้แยก การควบคุมเชิงบวก (inoculated เท่ากับ Xcc) ถูกแสดงลข้อเพื่อลดความแปรปรวนของความแตกต่างระหว่างการรักษา เมล็ดก็inoculated กับ Paenibacillus แยกออกซิเจนเท่านั้น (ที่ความเข้มข้น 3) การตรวจสอบใด ๆผลกระทบของออกซิเจน Paenibacillus แยกเกิดต้นกล้าและเจริญเติบโตของพืชBIOCONTROL วิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี 507ทำการทดสอบการเติบโตออกสำหรับการทดลองทั้งสองหม้อเพื่อดูอุบัติการณ์ของXcc หรือ Paenibacillus เมล็ดพันธุ์กะหล่ำปลีแต่ละ Xcc หรือ Paenibacillus ถือว่าเมล็ด (50เมล็ดต่อการรักษา) ถูกวางไว้ ในนา และหลัง จาก 24 ชั่วโมงที่ 25 หรือ 28 ° C ประเมินสถานะของ Paenibacillus หรือ Xcc อาณานิคม ตามลำดับการประเมินผลของ Paenibacillus แยกออกซิเจนในการงอกของเมล็ดกะหล่ำปลีการทดสอบการงอกได้ดำเนินการโดยใช้ด้านบนของกระดาษวิธีที่อธิบายไว้ในกฎระหว่างประเทศสำหรับการทดสอบเมล็ดพันธุ์ (ISTA, 2014)

ผลลัพธ์ (ไทย) 2:

การฉีดวัคซีนเมล็ดพันธุ์สำหรับการทดลองหม้อ
สำหรับการทดลองครั้งแรกหม้อแยก Xcc5 ได้รับเลือกเพราะทุก Paenibacillus เอสพีพี แยก
กับทางชีวภาพในระดับปานกลางและสูงในการทดสอบวัฒนธรรมคู่ปราบปรามแยกนี้.
เมล็ดกะหล่ำปลีพันธุ์ Kameron (แปซิฟิกใต้เมล็ด (NZ) Ltd) ถูกแช่อยู่ใน
Xcc5 ระงับที่ความเข้มข้น 1 × 109 CFU ML-1 (3 มล. ระงับต่อ 1 กรัม
เมล็ด) หรือผ่านการฆ่าเชื้อ 0.1% (w / v) ความดันโลหิตในขวดรูปกรวยและผสมเบา ๆ ภายใต้สูญญากาศ (ค.
50 มิลลิเมตรปรอท) เป็นเวลา 5 นาที เมล็ดแล้วอากาศแห้งในอาหารเลี้ยงเชื้อที่เปิดในไหล
ตู้ค้างคืนในที่มืด แขวนลอย Paenibacillus (P1, P6, P9, P10, P16, P20 และ
P24 แยกซึ่งได้แสดงให้เห็นถึงฤทธิ์ทางชีวภาพที่แตกต่างกันในการทดสอบวัฒนธรรมคู่) ที่ความเข้มข้น 5 × 109 CFU ML-1 หรือผ่านการฆ่าเชื้อ 0.1% BP (w / v) เป็น แล้วเพิ่มเข้าไปในเมล็ดเหล่านี้
(0.6 มล. / เมล็ดกรัม) และเข้ากันดีใช้ไม้พายผ่านการฆ่าเชื้อ เมล็ดเชื้อบ่ม
ในจานเลี้ยงเชื้อปิด (ยังไม่ได้ปิดผนึก) ค้างคืนในที่มืด.
สำหรับการทดลองหม้อสอง Xcc อีกแยก Xcc32 ซึ่งพบว่าจะมีมากขึ้น
ที่ทำให้เกิดโรคในกะหล่ำปลีกว่า Xcc5 ถูกนำมาใช้ เมล็ดกะหล่ำปลีที่ถูกเชื้อด้วย Xcc32 และ
สาม Paenibacillus แยก (P6, P10 และ P16) ที่สามความเข้มข้น (5 × 108, 5 × 109
และ 5 × 1010 CFU ML-1) เพื่อศึกษาเชื้ออัตราการพึ่งพาอาศัยกันของกิจกรรมการควบคุมทางชีวภาพของ
สายพันธุ์เหล่านี้ ควบคุมบวก (เชื้อเฉพาะกับ Xcc) เป็นตัวแทนในการเพิ่มขึ้นสามเท่า
เพื่อลดความแปรปรวนของความแตกต่างระหว่างมันและการรักษาที่ เมล็ดพันธุ์พืชนอกจากนี้ยังมี
เชื้อด้วย Paenibacillus เอสพีพี แยกเท่านั้น (ที่สามความเข้มข้น) เพื่อตรวจสอบสำหรับการใด ๆ
ผลกระทบของเอสพีพี Paenibacillus แยกบนงอกและการเจริญเติบโตของพืช.
Biocontrol วิทยาศาสตร์และเทคโนโลยี 507
ทดสอบการเจริญเติบโตออกได้รับการดำเนินการสำหรับการทดลองทั้งสองหม้อเพื่อตรวจสอบอุบัติการณ์ของ
Xcc หรือ Paenibacillus เมล็ดกะหล่ำปลีของแต่ละบุคคล Xcc หรือ Paenibacillus รับการรักษาเมล็ด (50
เมล็ดต่อการรักษา) ถูกวางไว้บน NA และหลัง 24 ชั่วโมงวันที่ 28 หรือ 25 องศาเซลเซียสการประเมินสำหรับการปรากฏตัวของ Paenibacillus หรือ Xcc อาณานิคมตามลำดับ.
เพื่อประเมินผลกระทบของการ Paenibacillus spp แยกต่อการงอกของเมล็ดกะหล่ำปลี,
การทดสอบการงอกได้ดำเนินการโดยใช้วิธีการด้านบนของกระดาษที่อธิบายไว้ในกฎระเบียบระหว่างประเทศเพื่อการทดสอบเมล็ดพันธุ์ (ISTA 2014)

ผลลัพธ์ (ไทย) 3:

เมล็ด Inoculations สำหรับหม้อการทดลองการทดลองในกระถางแรกแยก xcc5 ได้รับเลือกเพราะ paenibacillus spp . สายพันธุ์ทั้งหมดระดับปานกลางและฤทธิ์สูงในวัฒนธรรมสองวิธีปราบนี้ไอโซเลทกะหล่ําปลีเมล็ดพันธุ์ ( เมล็ด kameron แปซิฟิกใต้ ( นิวซีแลนด์ ) จำกัด ) ถูกแช่อยู่ในxcc5 แขวนลอยที่ความเข้มข้น 1 × 109 CFU ml − 1 ( 3 ml ช่วงล่าง ต่อ 1 กรัมเมล็ด ) หรือเป็นหมัน 0.1% ( w / v ) BP ในขวดรูปกรวยและผสมเบา ๆภายใต้สุญญากาศ ( C50 มิลลิเมตรปรอท ) เป็นเวลา 5 นาที แล้วเปิดเครื่องอบแห้งเมล็ดในจานเลี้ยงเชื้อในการไหลแบบราบเรียบตู้ค้างคืนในที่มืด paenibacillus สารแขวนลอย ( P9 P1 P6 P10 , มีชีวิต p20 , , , , และp24 ไอโซเลตซึ่งมีการแสดงที่แตกต่างกันสองวัฒนธรรม assay ) ที่ความเข้มข้น 5 × 109 CFU ml − 1 หรือปลอดเชื้อบีพี 0.1% ( w / v ) แล้วเพิ่มเมล็ดเหล่านี้( รัมเมล็ด 0.6 มิลลิลิตร ) ผสมแล้วใช้ไม้พายคนเป็นหมัน เมล็ดที่ปลูกเชื้อในจาน Petri ปิดไม่ปิด ) ค้างคืนในที่มืดสำหรับการทดลอง xcc อื่นแยก , xcc32 ซึ่งพบได้มากขึ้นเชื้อโรคใน xcc5 กะหล่ำปลีมากกว่าใช้ เมล็ดพันธุ์ผักกาดขาวกับ xcc32 ปลูกเชื้อและ3 paenibacillus ไอโซเลต ( P6 P10 , และมีชีวิต ) ที่ความเข้มข้น 3 ( 5 × 108 , 5 × 1095 × 1010 CFU ml − 1 ) ศึกษาอัตราการพึ่งพาของเชื้อไบโอคอนโทรลของกิจกรรมเหล่านี้ของเชื้อ การควบคุมในเชิงบวก ( แต่ใส่ xcc ) คือแสดงทั้งสามใบเพื่อลดความแปรปรวนของความแตกต่างระหว่างมันและการรักษา เมล็ดยังที่ใส่ paenibacillus spp . สายพันธุ์เท่านั้น ( 3 ) ) เพื่อตรวจสอบใด ๆผลกระทบของ paenibacillus spp . สายพันธุ์ในการงอกและการเจริญเติบโตของพืชวิทยาศาสตร์และเทคโนโลยีทางไบโอคอนโทรลแบบทดสอบมีการเติบโตจากทั้งหม้อการทดลองเพื่อหาอุบัติการณ์ของxcc หรือ paenibacillus เมล็ดกะหล่ำปลีแต่ละ xcc หรือ paenibacillus ถือว่าเมล็ด ( 50เมล็ดต่อรักษา ) ถูกวางไว้บนนา และหลังจาก 24 ชั่วโมง ที่ 25 ° C หรือสุขภาพสถานะของ paenibacillus หรือ xcc โคโลนีเพื่อศึกษาผลของการ paenibacillus spp . สายพันธุ์ในการงอกของเมล็ดพันธุ์ผักกาดการทดสอบความงอกอยู่ด้านบนของกระดาษโดยใช้วิธีการที่อธิบายไว้ในกฎสากลสำหรับการทดสอบเมล็ดพันธุ์ ( ซึ่ง ปี 2014 )