According to the previous method (Xie et al., 2013), the activity of DES was determined by monitoring the release of sulfide from l-Cys in a total volume of 3 ml containing 2.5 mM dl-dithiothreitol (DTT), 0.8 mM l-Cys, 100 mM Tris–HCl (pH 9.0), and enzyme extract. The reaction was initiated by the addition of l-Cys. After incubation at 37 °C for 15 min, the reaction was terminated by adding 300 μl of 30 mM FeCl3 dissolved in 1.2 N HCl and 300 μl 20 mM N,N-dimethyl-p-phenylenediamine dihydrochloride dissolved in 7.2 N HCl. The formation of methylene blue was determined at 670 nm. The DES enzymatic activity was calculated by comparison to a standard curve of Na2S.
ตามวิธีก่อนหน้านี้ (เจีย et al., 2013), กิจกรรมของ DES ถูกกำหนด โดยการตรวจสอบรุ่นของซัลไฟด์จาก l-Cys ในปริมาณรวมของ 3 ml ประกอบด้วย 2.5 mM dl-dithiothreitol (DTT), 0.8 mM l Cys, 100 มม.ตรี – HCl (pH 9.0), และสารสกัดจากเอนไซม์ เริ่มปฏิกิริยา โดยเพิ่ม l Cys หลังจากบ่มที่ 37 ° C สำหรับ 15 นาที ปฏิกิริยาถูกยกเลิก โดยการเพิ่ม μl 300 มม. 30 FeCl3 ละลายใน 1.2 N HCl และ μl 300 mM 20 N, dihydrochloride N-dimethyl-p-phenylenediamine ละลายใน 7.2 N HCl การก่อตัวของเมทิลีนไดบลูกำหนดที่ 670 nm กิจกรรมของเอนไซม์ในระบบ DES ถูกคำนวณโดยการเปรียบเทียบกับเส้นโค้งมาตรฐานของ Na2S
การแปล กรุณารอสักครู่..
